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为探究犬羊膜间充质干细胞（cAM-MSCs）对特应性皮炎（AD）的疗效，首尔国立大学研究人员开展研究，发现 cAM-MSCs 可有效缓解 AD 症状，为犬 AD 治疗提供新方向。
在宠物的健康问题中，特应性皮炎（Atopic dermatitis，AD）是困扰犬类的一种常见慢性炎症性皮肤病。它不仅让狗狗们瘙痒难耐，频繁抓挠，影响生活质量，还让主人们忧心不已。遗传、环境中的过敏原，像花粉、食物、微生物，还有皮肤屏障受损、感染等多种因素都可能引发犬 AD，而且这种病和人类的 AD 在临床、免疫特征以及治疗方面都有很多相似之处。目前，针对犬 AD 的治疗手段有限，传统药物治疗存在诸多弊端，比如常用的 calcineurin inhibitors（CNIs）类药物，虽然能起到一定的免疫抑制作用，但长期使用安全性存疑，还可能引发皮肤刺激、胃肠道问题等不良反应，美国 FDA 甚至对部分药物发出了 “黑框警告” ，限制其长期使用。
在此背景下，首尔国立大学的研究人员致力于寻找更有效的治疗方法，他们将目光投向了间充质干细胞（Mesenchymal stem cells，MSCs）。MSCs 具有免疫调节、分化和自我更新等多种功能，在再生医学领域备受关注。然而，此前关于犬 MSCs 治疗犬 AD 的长期疗效研究较少，其安全性和有效性仍有待验证。为此，研究人员开展了一项关于犬羊膜间充质干细胞（canine amniotic membrane-derived mesenchymal stem cells，cAM-MSCs）治疗犬 AD 的研究，相关成果为犬 AD 的治疗开辟了新的方向。
研究人员为开展此项研究，运用了多种关键技术方法。在动物实验方面，选用六周龄雄性 BALB/c 小鼠构建 AD 小鼠模型，通过对小鼠背部皮肤反复涂抹化学物质诱导 AD 样皮肤损伤，之后对小鼠进行分组处理，分别给予不同的干预措施。在细胞相关实验中，从犬羊膜中分离培养 cAM-MSCs ，并进行一系列细胞实验。此外，研究人员还运用了组织学染色（如 H&E 染色、甲苯胺蓝染色）、实时荧光定量 PCR（Real-time PCR）、免疫组化（Immunohistochemistry，IHC）、混合淋巴细胞反应（Mixed lymphocyte reaction，MLR） 实验以及流式细胞术（Fluorescence-activated cell sorting，FACS）等技术，从不同层面检测相关指标，探究 cAM-MSCs 对 AD 的治疗效果及机制。
下面来看具体的研究结果：
- cAM-MSCs 改善 AD 小鼠症状：研究人员构建 AD 小鼠模型后，一组小鼠在第 14、28 和 42 天接受皮下注射1.5×10^{6}个 cAM-MSCs，另一组每天涂抹 1% pimecrolimus（Pime）软膏，还有对照组。结果发现，在第 56 天，cAM-MSCs 治疗组小鼠在症状严重程度（如疤痕 / 干燥评分、红斑评分等）和临床评分上，都比 PBS 对照组有显著改善，且体重增加情况良好，未出现明显副作用。这表明 cAM-MSCs 能有效减轻 AD 小鼠的视觉症状和总体评分1。
- cAM-MSCs 改善皮肤病理状态：通过组织学分析发现，cAM-MSCs 治疗组和 Pime 治疗组小鼠的背部皮肤表皮厚度相较于 PBS 对照组显著降低，且 cAM-MSCs 治疗组的表皮厚度低于 Pime 治疗组。同时，cAM-MSCs 治疗组中 CD31 阳性细胞数量明显增加，这意味着血管内皮细胞再生情况更好；肥大细胞浸润和肥大细胞类胰蛋白酶（MCT）阳性细胞数量显著减少，说明 cAM-MSCs 能有效改善伤口功能障碍，调节肥大细胞活性23。
- cAM-MSCs 发挥抗炎作用：研究人员对小鼠皮肤进行染色和定量分析，发现 cAM-MSCs 治疗组中犬 MSCs 阳性表面标记 CD90 的细胞显著多于其他组。通过 Real-time PCR 检测发现，免疫炎症因子 IL-4 和 IL-6 在 cAM-MSCs 治疗后显著降低。此外，免疫调节蛋白 TGF-β1、COX-2 和 IDO1 在 cAM-MSCs 治疗组显著增加。这些结果表明，cAM-MSCs 可通过免疫调节蛋白减少小鼠皮肤中的炎症因子45。
- cAM-MSCs 抑制 T 细胞激活：利用 MLR 实验和 FACS 分析，研究人员发现，无论短期（第 4 天）还是长期（第 8 天），cAM-MSCs 都能抑制犬外周血单个核细胞（PBMCs）中淋巴细胞的激活，且能更有效地抑制效应 T 细胞的激活，减少 CCR7-/CD45ra + 细胞和 CD62L-/CD45ra + 细胞的数量，这一效果比 Pime 更显著677。
综合上述研究，cAM-MSCs 在治疗犬 AD 方面展现出显著的优势。与 PBS 对照组相比，cAM-MSCs 能显著减轻 AD 症状；和 Pime 相比，它能更有效地抑制肥大细胞脱颗粒和降低真皮表皮厚度。而且，长期间隔重复皮下注射 cAM-MSCs 56 天，不会给动物带来额外压力，也未导致体重下降等不良影响。cAM-MSCs 还能显著增加免疫调节蛋白的表达，更有效地抑制效应 T 细胞的增殖能力。不过，研究也存在一定的局限性，比如动物模型的跨物种测试存在局限性，还需进一步研究干细胞在犬 AD 患者中的长期疗效，以及 cAM-MSCs 调节效应 T 细胞的具体机制也有待明确。但总体而言，该研究为犬 AD 的治疗提供了新的思路和潜在的有效方法，cAM-MSCs 有望成为一种安全、有效的干细胞疗法，为众多深受犬 AD 困扰的宠物及其主人带来新的希望。
