一种新型的可诱导Cre小鼠模型，用于对传出导管中非纤毛细胞的基因操作

《Biology of Reproduction》：A novel inducible Cre mouse model for genetic manipulation in nonciliated cells of efferent ductules

本研究通过CRISPR/Cas9技术构建Adgrg2基因敲入小鼠模型，揭示输出管发育与功能障碍的分子机制。发现Adgrg2-Cre模型在胚胎期已激活，而Adgrg2-CreERT2模型经他莫昔芬诱导后仅在非纤毛细胞中特异性表达，为研究精子运输和上皮细胞功能提供了精准工具。

　　

摘要

输出导管是精子从睾丸网输送到附睾的重要通道。输出导管上皮中的无纤毛细胞和有纤毛细胞分别负责液体的重吸收和液体的搅拌，以防止精子聚集。这两种细胞类型的任何功能障碍都可能导致阻塞性无精子症。为了系统研究输出导管发育和功能的分子机制，我们通过CRISPR/Cas9技术将Cre-P2A或CreERT2-P2A基因盒插入Adgrg2基因位点，成功构建了两种新型敲入小鼠模型，使得Adgrg2基因的启动子能够驱动内源性Adgrg2基因与Cre重组酶的共同表达。我们在Cre阳性小鼠（与Rosa26LacZ或Rosa26tdTomato报告基因小鼠杂交）中检测了Cre活性组织。Adgrg2-Cre小鼠在胚胎期的输出导管、近端附睾及前体细胞中表现出Cre活性（通过tdTomato荧光标记证实），而出生后的雄性小鼠则在多种组织中观察到广泛的基因重组现象。相比之下，在接受他莫昔芬治疗的Adgrg2-CreERT2小鼠中，Cre活性主要存在于输出导管上皮的无纤毛细胞和近端附睾中，其他组织中的活性较低。这些模型为特定细胞类型和发育阶段的基因操作提供了精确的工具，有助于研究输出导管的发育、液体稳态以及男性不育的机制。尤其是Adgrg2-CreERT2小鼠模型，为无纤毛细胞的特异性基因研究提供了独特的平台。本研究为理解男性生殖道的遗传和分子基础及相关病理提供了新的途径。

图形摘要

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