Ophiorrhiza brevidentata中新型单萜吲哚生物碱的发现及其免疫抑制活性研究

《Natural Products and Bioprospecting》：Monoterpene indole alkaloids from the aerial parts of Ophiorrhiza brevidentata and their immunological activities

本研究针对自身免疫疾病治疗中免疫抑制剂毒性大、选择性差的问题，从药用植物Ophiorrhiza brevidentata中分离得到10个结构新颖的单萜吲哚生物碱（1-10）及13个已知化合物（11-23）。其中化合物1具有罕见的6/5/6/7/6五环骨架，化合物3-5和9对LPS诱导的B细胞增殖表现出强效抑制活性（IC503.6-9.1 μM）和高选择性（SI>10），为开发低毒性免疫抑制剂提供了先导化合物。

　　

自身免疫疾病如系统性红斑狼疮、类风湿关节炎等影响着全球5-8%的人口，当前免疫抑制剂普遍存在肝毒性、肾毒性等严重副作用，开发高效低毒的新型免疫调节剂迫在眉睫。茜草科Ophiorrhiza属植物富含结构多样的生物碱，前期研究发现该属植物中的ophiorrhine F和G对B细胞增殖具有选择性抑制活性，提示其作为免疫抑制剂开发的潜力。本研究以Ophiorrhiza brevidentata为研究对象，旨在发掘具有免疫调节活性的新颖生物碱成分。

研究人员采用溶剂提取与多种色谱技术（硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶色谱、中压液相色谱及制备型高效液相色谱）从14.5 kg植物材料中分离纯化化合物，通过核磁共振（NMR）、高分辨质谱（HRMS）和量子化学计算（ECD计算、耦合常数计算）进行结构鉴定，并利用MTT法和³H-TdR掺入法评估化合物对小鼠脾淋巴细胞活性和增殖的影响。

2 结果与讨论

2.1 新化合物的结构鉴定

化合物1（ophiorbrevine A）为黄色粉末，分子式C₂₂H₁₈O₅N₂，其结构包含罕见的6/5/6/7/6五环系统，绝对构型经ECD计算确定为15R,16R,17R。化合物2（ophiorbrevine B）与Mappianine B结构相似，但缺少N-25位乙基并在C-5位连接羧基。化合物3（ophiorbrevine C）为3,14-二氢decussine的去N-甲基衍生物。化合物4-10分别被鉴定为具有β-咔啉或吲哚骨架的新型生物碱，其中化合物7和8为C-9或C-10位葡萄糖苷化产物，化合物9为6'-反式阿魏酰基-6'-lyaloside的C-5羧基化衍生物。

2.2 免疫抑制活性评价

化合物3-5和9对LPS诱导的B细胞增殖抑制活性显著（IC₅₀3.6-9.1 μM），且选择性指数（SI）均大于10。化合物1、3-5和10对ConA诱导的T细胞增殖具有中等抑制活性（IC₅₀15.7-58.6 μM）。阳性对照药环孢素A（CsA）对T细胞和B细胞增殖的IC₅₀分别为0.003 μM和0.123 μM。

3 结论

本研究从Ophiorrhiza brevidentata中发现了10个结构新颖的单萜吲哚生物碱，其中化合物1为首次报道的6/5/6/7/6五环骨架类型。活性研究表明化合物3-5和9对B细胞增殖具有强效、高选择性抑制作用，其免疫抑制活性与低细胞毒性相结合，显示出开发为自身免疫疾病治疗药物的潜力。该研究不仅丰富了单萜吲哚生物碱的化学多样性，也为免疫抑制剂的研发提供了天然产物来源的候选分子。