《Frontiers in Neuroscience》：Neuroprotective effect of resveratrol on Epac-1/Rap-1 signaling pathway in ischemic stroke rats
编辑推荐：
本研究揭示天然多酚白藜芦醇（Res）通过激活环磷腺苷直接激活交换蛋白1（Epac-1）/Ras相关蛋白1（Rap-1）信号通路，调控小胶质细胞从促炎M1表型（诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、白细胞介素12(IL-12)↑）向抗炎M2表型（精氨酸酶1(Arg-1)、白细胞介素10(IL-10)↑）极化，显著降低大鼠大脑中动脉闭塞再灌注（MCAO/R）模型的神经功能缺损评分、脑梗死体积和神经元凋亡，为缺血性脑卒中治疗提供新靶点。
引言
缺血性脑卒中（IS）是全球致残和致死的主要原因之一，其中87%为缺血性卒中。当前再灌注治疗存在时间窗窄和出血风险等局限，而脑缺血再灌注损伤（CIRI）的复杂病理机制涉及神经炎症等关键环节。小胶质细胞作为中枢免疫细胞，其M1/M2表型平衡调控成为治疗新策略——M1表型释放诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、白细胞介素12（IL-12）等促炎因子加剧损伤，M2表型通过精氨酸酶1（Arg-1）、白细胞介素10（IL-10）促进修复。近年研究发现，Epac-1/Rap-1信号通路在调控神经炎症中起关键作用，而天然化合物白藜芦醇（Res）的多效性使其成为潜在治疗候选。
材料与方法
采用30只SD大鼠随机分为假手术组、MCAO/R模型组和Res干预组（40 mg/kg/天腹腔注射预处理3天）。通过线栓法建立MCAO/R模型后24小时，进行神经功能缺损评分（Bederson 5分法）、TTC染色测梗死体积、TUNEL染色检测细胞凋亡、ELISA法检测血清iNOS/Arg-1/IL-12/IL-10浓度、Western blot分析Epac-1/Rap-1蛋白表达。
结果
- 1.
神经功能与梗死体积：与假手术组相比，MCAO/R组神经缺损评分显著升高（**p<0.01），脑梗死率增加（**p<0.01）；Res治疗组评分和梗死率均显著降低（#p<0.05）（图1A-C）。
- 2.
组织病理与细胞凋亡：HE染色显示Res组神经元排列有序、核形态完整，损伤神经元数量减少（##p<0.01）（图2A-B）；TUNEL染色表明Res组凋亡细胞绿色荧光强度明显减弱（##p<0.01）（图3A-B）。
- 3.
炎症因子与表型标记：Res组血清iNOS、IL-12水平较模型组下降（#p<0.05），Arg-1、IL-10水平上升（#p<0.05）（图4A-D），提示M2极化增强。
- 4.
信号通路蛋白表达：Western blot显示Res可逆转MCAO/R引起的Epac-1和Rap-1蛋白表达下调（##p<0.01）（图5A-C），通路机制示意图见图6。
讨论
白藜芦醇通过激活Epac-1（cAMP直接激活交换蛋白1）促进其下游效应分子Rap-1（Ras相关蛋白1）的GTP结合，进而抑制核因子κB（NF-κB）等促炎通路，调控小胶质细胞极化平衡。该作用与减少氧化应激、降低促炎因子（如肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)）及调节B细胞淋巴瘤2（Bcl-2）/Bcl-2关联X蛋白（Bax）凋亡通路协同，共同缓解血脑屏障破坏和神经元损伤。研究局限性包括二甲基亚砜（DMSO）溶剂的潜在干扰、缺乏脑血流实时监测等，需进一步通过Epac特异性调节剂验证因果关联。
结论
白藜芦醇通过Epac-1/Rap-1信号轴驱动小胶质细胞向M2抗炎表型转化，为缺血性脑卒中提供了基于神经免疫调控的新治疗策略。
