《Frontiers in Aging Neuroscience》：Electroacupuncture alleviates Parkinson’s disease by targeting HDAC/SIRT-mediated deacetylation of 14-3-3
1 Introduction
帕金森病是第二常见的神经退行性疾病，其特征是黑质致密部多巴胺能神经元的进行性丢失以及含有聚集α-突触核蛋白的路易体存在。虽然运动症状如运动迟缓、震颤和强直是临床标志，但非运动表现包括胃肠功能障碍通常先于运动衰退数年出现，凸显了肠-脑轴在PD发病机制中的参与。
新兴证据表明，肠道微生物群失调通过多种机制促进PD发展，包括免疫激活、炎症和屏障功能受损。将PD患者的粪便微生物群移植到小鼠中可以诱导运动缺陷和神经炎症，支持肠道微生物在PD中的因果作用。此外，最近的研究揭示蛋白质乙酰化失调——一种关键的翻译后修饰——参与神经退行性过程。去乙酰化酶如HDACs和SIRTs活性降低导致各种蛋白质的高乙酰化，破坏细胞稳态并促进神经元死亡。值得注意的是，肠道微生物群衍生的代谢物短链脂肪酸可以在包括大脑在内的多个组织中抑制HDAC活性。在PD患者中，症状严重程度与血浆SCFA水平呈正相关。因此，SCFAs可能作为肠道菌群失调和PD发病机制之间的关键联系，可能通过调节HDAC活性并促进蛋白质乙酰化失调。
电针作为一种补充疗法，在中国已被广泛使用并日益全球认可用于PD治疗。临床和实验研究表明，电针可以改善运动功能，减少α-突触核蛋白聚集，并调节神经炎症。先前的工作表明，电针增强肠道微生物多样性并改善小鼠模型中的PD病理，然而它是否影响蛋白质乙酰化仍不清楚。本研究整合了MPTP诱导的神经毒性和来自PD患者的粪便微生物群移植，建立了一个概括疾病中枢和外周特征的全面PD小鼠模型，旨在确定电针是否通过调节蛋白质乙酰化来减轻PD动物模型中的运动缺陷，并研究HDACs和SIRTs在这一过程中的作用。
2 Materials and methods
2.1 Animals
使用82只无特定病原体雄性C57BL/6小鼠（8周龄，体重25-30克）。动物饲养于上海中医药大学实验动物中心的SPF设施中，环境条件控制为温度22-24°C，湿度50-65%，12小时光/暗周期。所有小鼠在实验前适应1周。实验程序经上海中医药大学动物伦理委员会批准。
2.2 Donor screening and fecal microbiota transplantation protocol
粪便供体招募自上海中医药大学岳阳中西医结合医院针灸科门诊患者以及通过公开广告招募。根据临床状态，供体分为两组：帕金森病粪菌移植组和健康对照粪菌移植组。
PD患者FMT供体选择标准包括符合英国帕金森病学会脑库诊断标准的PD诊断，年龄40-80岁，并提供专门用于粪便捐赠的书面知情同意。关键排除标准包括非典型或继发性帕金森综合征、恶性肿瘤或慢性胃肠道疾病史、主要器官系统显著合并症、精神疾病存在、近期使用益生菌、抗生素或NSAIDs、在此期间接受任何侵入性胃肠道程序、以及坚持纯素饮食。
健康供体FMT筛查标准要求年龄40-80岁，体格检查和常规血液检查无临床显著异常，并提供专门用于粪便捐赠的书面知情同意。此外，严格筛查排除有神经或消化疾病史或症状、遗传性或器质性疾病家族史、改变肠道微生物群组成的条件（如肥胖BMI≥28 kg/m2）以及使用益生菌、抗生素、NSAIDs或任何处方药的个体。
粪便样本收集自符合条件的PD患者和健康对照受试者。采集过程中，参与者排便到放置在马桶座圈上的无菌便盆中，避免尿液或其他体液污染。收集约20毫升中段粪便材料使用无菌容器。采集后立即将样品放入含有冰袋的预冷绝缘盒中，2小时内运输到实验室。所有样品随后储存于-80°C直至进一步处理。
粪便悬浮液制备按照先前描述的方法进行：供体粪便（等重混合）在无菌PBS中稀释至浓度20 mg/mL。粪便混合物在无菌PBS中浸泡约15分钟，彻底涡旋，在4°C下1000 rpm离心5分钟；然后收集上清液。随后在4°C下8000 rpm离心5分钟以沉淀粪便微生物群，然后用无菌PBS过滤两次。所得粪便微生物群悬浮液与等体积40%无菌甘油混合并储存于-80°C直至使用。
粪菌移植方案中，FMT前给小鼠通过饮用水给予广谱抗生素4周以耗尽肠道微生物群。抗生素方案包括氨苄青霉素、新霉素、甲硝唑和万古霉素盐酸盐。抗生素治疗后，从第二天开始，小鼠接受粪便微生物群悬浮液灌胃，每只小鼠200微升，每天一次，连续4周以建立模型。每隔一天测量小鼠体重，观察并记录一般状况。
2.3 PD model establishment
小鼠随机分为正常对照组和建模组，包括健康对照粪菌移植组和PD患者粪菌移植组。按照经典MPTP诱导的PD模型方案，建模组小鼠每天腹腔注射MPTP（30 mg/kg）连续5天（在FMT最后5天期间）。每天记录体重和一般状况。建模过程中四只小鼠死亡。建模后，两只随机选择的建模组小鼠和两只正常对照组小鼠通过黑质酪氨酸羟化酶免疫组化染色进行模型验证以确认模型建立成功。
2.4 Animal grouping and intervention methods
模型成功建立后，动物分为以下组：正常对照组，接受与治疗组相同的处理和约束但无治疗干预；健康对照粪菌移植组，同样接受处理和约束无额外治疗；PD患者粪菌移植组，接受相同处理和约束程序；电针组，建模后24小时开始每天干预，涉及在定制固定器中轻柔约束，并在百会（顶骨中线）和阳陵泉（腓骨头前下）插入针，使用无菌一次性针灸针（0.16×7 mm；苏州华佗）——插入深度4 mm，初始捻转1分钟随后每5分钟重复捻转，总留针时间15分钟每次，根据《实验针灸学》既定方案每天一次连续14天；和雷沙吉兰组，建模后24小时开始每天通过灌胃给予雷沙吉兰甲磺酸（0.2 mg/kg）连续14天。
2.5 Rotarod test
使用商业可用装置进行旋转棒测试，棒直径2厘米。小鼠置于棒上头部垂直于其长轴。旋转速度在5分钟内从10 rpm逐渐加速至30 rpm。MPTP给药前，所有动物接受3天训练以获得在20 rpm旋转棒上停留至少120秒的能力。最后干预后第二天，记录在五个递增速度下的跌落潜伏期：10、15、20、25和30 rpm。使用梯形法推导每组的整体旋转棒性能评分以整合所有速度水平的耐力。
2.6 The adhesive removal test
粘附去除测试用于评估精细运动功能。将小粘附胶带牢固附着于小鼠前爪无毛皮肤，覆盖掌面包括爪垫、鱼际和小鱼际区域。然后将每只小鼠单独放入其家笼，记录首次感知（初始接触）和完全去除粘附胶带所需时间。每只动物进行三次试验，成功去除的平均时间用于统计分析。
2.7 Open field test
旷场测试在27×27×30厘米矩形场地中进行。每只小鼠单独放置在场地中心并允许自由探索5分钟，同时其运动被视频跟踪系统记录和追踪。试验间隙用75%乙醇彻底清洁场地并完全干燥以消除嗅觉线索。测试在安静环境中进行以最小化外部干扰。
2.8 Immunofluorescence staining
进行免疫荧光染色以检测黑质中的TH阳性神经元。小鼠中脑组织在4%多聚甲醛中固定，石蜡包埋，冠状切片厚度4微米。切片在62°C加热，二甲苯脱蜡，并通过梯度乙醇系列复水。抗原修复和内源性过氧化物酶活性封闭后，切片在室温下与5%牛血清 albumin孵育20分钟以防止非特异性结合。随后，切片在4°C与TH一抗（sc-25269, Santa Cruz Biotechnology; 稀释1:100）孵育过夜。PBS洗涤后，切片在37°C黑暗环境中与荧光团缀合二抗孵育30分钟。细胞核用DAPI复染。最终洗涤后，切片用抗衰减封片剂封片。使用荧光显微镜获取图像，并使用ImageJ软件定量分析黑质中TH阳性信号的荧光强度。
2.9 Western blot analysis
通过Western blot评估小鼠黑质中α-突触核蛋白、14-3-3、HDAC1、HDAC2、HDAC3、SIRT1和SIRT2的表达。每组20毫克中脑组织匀浆、裂解并离心收集含总蛋白的上清液。使用BCA测定测定蛋白浓度。蛋白质在金属浴中加热变性，每样品20微克总蛋白通过SDS-PAGE分离并转移到PVDF膜上。膜在室温下用3%脱脂牛奶封闭1小时，然后与针对α-突触核蛋白（ab212184, Abcam, 1:2000）、14-3-3（SYZIA-R1, Sino Biological, 1:500）、HDAC1（ab109411, Abcam, 1:5000）、HDAC2（ab32117, Abcam, 1:2000）、HDAC3（ab32369, Abcam, 1:8000）、SIRT1（ab110304, Abcam, 1:4000）和SIRT2（ab211033, Abcam, 1:2000）以及β-肌动蛋白（1:80000）的一抗在4°C孵育过夜。洗涤后，膜与辣根过氧化物酶缀合二抗（1:20000）在室温下孵育1小时。额外洗涤后，使用增强化学发光法显现蛋白条带并用凝胶成像系统成像。使用ImageJ软件量化条带强度。计算每个样品中α-突触核蛋白与β-肌动蛋白的比率以标准化蛋白表达水平。
2.10 Quantitative real-time PCR analysis
使用TRIzol试剂从黑质组织提取总RNA，通过氯仿提取和异丙醇沉淀，然后75%乙醇洗涤和风干。5倍稀释后使用分光光度计定量RNA。仅使用比率分别在1.8-2.0和大于2.0之间的样品进行下游分析。为确认无基因组DNA污染，在逆转录前对代表性RNA样品进行琼脂糖凝胶电泳。存在清晰、尖锐的28S和18S核糖体RNA条带而无可见基因组DNA拖尾证实了高RNA完整性和无显著DNA污染。cDNA合成从2微克总RNA使用随机引物和RevertAid逆转录酶进行（25°C 5分钟，42°C 60分钟）。使用SYBR Green Master Mix与基因特异性引物在实时PCR系统上进行qPCR，反应体积10微升（1.5微升H2O，5微升2×SYBR Green PCR Master Mix，1微升10微M引物，2.5微升cDNA模板）和热循环条件95°C 2分钟，随后45个循环的95°C 5秒和60°C 10秒。使用2-ΔΔCt方法将相对基因表达标准化为GAPDH。
2.11 4D label-free acetyl proteomic analysis
进行全面的4D无标记乙酰化蛋白质组学分析以分析全局蛋白质乙酰化。详细实验程序——包括样品制备、LC-MS/MS仪器参数、数据采集和生物信息学处理——在附加文件1中提供。生物信息学分析包括基因本体富集、KEGG通路注释、亚细胞定位预测和COG/KOG功能分类。
冷冻中脑组织在液氮中粉碎。所得粉末在四体积裂解缓冲液（8 M尿素，1%蛋白酶抑制剂 cocktail，3微M TSA，50 mM烟酰胺）中裂解，然后超声处理。通过离心在4°C下12000×g 10分钟去除细胞碎片。收集上清液，使用BCA测定测定蛋白浓度。
蛋白质用20%三氯乙酸在4°C沉淀2小时，冰丙酮洗涤并风干。沉淀重悬于200 mM TEAB。蛋白质在56°C用5 mM二硫苏糖醇还原30分钟，在室温黑暗环境中用11 mM碘乙酰胺烷基化15分钟，并在37°C用胰蛋白酶以1:50（w/w）酶与蛋白比率消化过夜。
胰蛋白酶肽在4°C与抗乙酰赖氨酸抗体缀合珠在免疫沉淀缓冲液（100 mM NaCl，1 mM EDTA，50 mM Tris-HCl，0.5% NP-40，pH 8.0）中轻柔振荡孵育过夜。珠用IP缓冲液和去离子水洗涤，结合肽用0.1%三氟乙酸洗脱。洗脱液使用C18 ZipTip脱盐并冻干。
肽在nanoElute UHPLC系统上分离，使用60分钟梯度从6%到80%流动相B（A：0.1%甲酸在2%乙腈中；B：0.1%甲酸在100%乙腈中），流速450 nL/min。洗脱肽在1.7 kV电离并使用在PASEF模式下运行的timsTOF Pro质谱仪分析。采集全MS扫描（m/z 100-1700），随后每个周期最多10个MS/MS扫描，动态排除设置为30秒。
原始数据使用MaxQuant（v1.6.15.0）处理，针对UniProt小家鼠数据库补充诱饵和污染物条目。搜索参数包括：胰蛋白酶/P消化允许最多4个遗漏切割；最小肽段长度7个氨基酸；每个肽最多5个修饰；前体和碎片离子质量容差20 ppm。固定修饰为羧氨基甲基化（C），可变修饰包括氧化（M）、N末端乙酰化和赖氨酸乙酰化。蛋白质和PSM水平的错误发现率设置为1%。
2.12 Statistical analysis
使用SPSS 24.0分析数据。评估正态性和方差齐性。对于正态分布数据，进行单因素ANOVA，然后进行LSD检验或Dunnett's T3检验。非正态分布数据使用非参数检验分析。显著性水平设定为α=0.05，p<0.05认为有统计学意义。
3 Results
3.1 Electroacupuncture ameliorates motor function and increases the number of brain TH-positive neurons in PD mice induced by PD-FMT and MPTP
为确认MPTP联合PD-FMT的致病作用并评估电针的治疗作用，我们系统检测了模型小鼠的运动功能和黑质多巴胺能神经元完整性。雷沙吉兰用作阳性对照，而HC-FMT作为供体匹配参考组以区分PD来源微生物群的特异性效应。
行为学和分子分析显示，MPTP联合PD-FMT引起小鼠显著运动功能障碍和黑质多巴胺能神经元损伤。对于总体运动功能，指示运动协调的整体旋转棒性能评分在HC-FMT组和PD-FMT组均显著低于NC组。PD-FMT组显示出更明显的下降。与NC组相比，PD-FMT组接触粘附点时间有延长趋势，但差异无统计学意义。相比之下，PD-FMT组去除粘附点时间相对于NC组显著延长，进一步证实了PD模型小鼠的精细运动损伤。在分子水平上，与NC组相比，HC-FMT组和PD-FMT组黑质中TH阳性神经元显著下调。这表明MPTP联合FMT（即使是健康供体微生物群）可诱导多巴胺能神经元丢失，而PD患者来源的微生物群加重了这种损伤。
值得注意的是，电针有效逆转了PD-FMT小鼠的这些病理变化。对于总体运动功能，电针显著增加了PD-FMT组的ORP评分，而雷沙吉兰组仅显示ORP评分非显著上升趋势相对于PD-FMT组。对于精细运动功能，电针和雷沙吉兰组均显著缩短了PD-FMT小鼠的粘附点去除时间。对于黑质多巴胺能神经元保护，电针显著上调了PD-FMT小鼠黑质中TH表达。这种恢复效应与阳性对照雷沙吉兰相当，证实电针可有效保护黑质TH阳性神经元的数量和功能。
3.2 Ywhaq hyperacetylation in PD nigra is attenuated by electroacupuncture
为识别电针干预在PD患者粪便微生物群移植诱导的PD小鼠模型中的潜在靶点，我们对NC、PD-FMT和电针处理小鼠的脑组织蛋白质进行了4D无标记乙酰化蛋白质组学分析。数据处理包括乙酰化肽段鉴定、重现性评估、质量控制、差异乙酰化蛋白筛选，以及基因本体、直系同源簇和KEGG通路富集分析。完整乙酰化蛋白质组学数据集在附加文件2中提供。基于倍数变化阈值>1.5（上调）和<1>p<0.05识别组间差异乙酰化位点。火山图显示，与NC组相比，PD-FMT组有16个显著上调和7个下调乙酰化位点（分别对应16和7个蛋白质）。在电针组与PD-FMT组比较中，22个位点上调，27个下调（影响22和26个蛋白质）。对NC vs PD-FMT和PD-FMT vs电针比较中差异乙酰化蛋白的交集分析确定了三个重叠靶点：Sptan1、Ywhaq和Upf1。与NC对照组相比，PD-FMT小鼠黑质中Sptan1和Ywhaq的乙酰化水平显著增加，电针治疗显著降低了它们的乙酰化相对于PD-FMT组。基于文献证据，选择Ywhaq进行Western blot进一步验证。与蛋白质组学结果一致，与NC组相比，HC-FMT组和PD-FMT组Ywhaq乙酰化显著升高，电针治疗显著降低了其乙酰化相对于PD-FMT组。
3.3 Electroacupuncture improves open field behavior and reduces nigral α-synuclein accumulation in PD model mice
基于先前发现电针调节PD小鼠模型中Ywhaq（14-3-3）乙酰化，进行了第二批实验以进一步研究电针对黑质组蛋白去乙酰化酶的调节作用。我们还使用旷场测试评估了电针对运动行为的影响，并通过Western blot评估了α-突触核蛋白积累。建模和电针方案与第一批保持一致。在旷场测试中，与NC组相比，PD-FMT组总运动距离显著减少，穿线次数更少，表明运动和探索行为受损。相对于PD-FMT组，HC-FMT组总距离适度增加，而电针组显示出更显著的改善。Western blot分析显示，与NC组相比，PD-FMT小鼠黑质中α-突触核蛋白显著上调，证实MPTP联合PD-FMT促进α-突触核蛋白聚集。值得注意的是，电针治疗显著降低了α-突触核蛋白表达相对于PD-FMT组，支持其在减轻PD小鼠病理蛋白积累中的作用。
3.4 Electroacupuncture reverses reduced expression of acetylation-modifying enzymes in the substantia nigra of PD model mice
HDAC1、HDAC2、HDAC3、SIRT1和SIRT2是参与从蛋白质去除乙酰基的关键去乙酰化酶。为研究它们在帕金森病中的表达，我们使用Western blot和定量实时PCR评估了这些酶在黑质中各实验组的蛋白和mRNA水平。
与NC组相比，PD-FMT组和HC-FMT组均显示HDAC1、HDAC2、HDAC3和SIRT2的蛋白和mRNA表达显著降低。此外，相对于NC组，PD-FMT组在蛋白和mRNA水平上显示SIRT1表达显著降低。值得注意的是，电针治疗显著抵消了这些改变：与PD-FMT组相比，电针组显示HDAC1、HDAC2、SIRT1和SIRT2蛋白表达增加，以及HDAC1、HDAC2和HDAC3 mRNA水平升高。这些发现表明电针可有效恢复参与PD相关蛋白质乙酰化失调的主要去乙酰化酶的表达。
4 Discussion
帕金森病是一种进行性神经退行性疾病，其特征是黑质致密部多巴胺能神经元的选择性丢失以及错误折叠α-突触核蛋白在路易体和路易神经突中的病理积累。临床表现包括经典运动症状——静止性震颤、运动迟缓、强直和姿势不稳——以及非运动特征如胃肠功能障碍、嗅觉障碍和神经精神障碍，这些通常先于运动缺陷数年出现并凸显疾病的系统性本质。
PD的病因涉及复杂的遗传和环境相互作用。LRRK2、Parkin和PINK1等基因的突变破坏线粒体功能、蛋白质清除和神经炎症反应。环境因素——包括神经毒素暴露、头部创伤和慢性肠道炎症——进一步增加易感性。最近，肠道微生物群失调和受损的蛋白质乙酰化稳态已成为PD发病机制的关键机制。
先前的临床研究表明针灸改善PD患者的运动功能，表现为步长增加、UPDRS评分降低和行走时间缩短。临床前研究表明针灸减少α-突触核蛋白积累、增强溶酶体功能并保护MPTP诱导的PD小鼠中的多巴胺能神经元。然而，针灸可显著调节溶酶体功能，清除PD小鼠脑中积累的α-突触核蛋白，保护神经元并改善PD小鼠的异常行为表现。本研究重现了这些先前发现。另一项研究揭示针灸可保护PD小鼠中的多巴胺能神经元，改善其运动功能，并增强肠道微生物多样性以及调节肠道微生物群丰度，证实针灸对肠道微生物群的调节作用可能是其神经保护作用的关键机制之一。这些发现推动了当前对电针机制的研究，特别是通过肠道微生物群和蛋白质乙酰化途径。
在本研究中，电针对MPTP联合PD患者粪便微生物群移植诱导的PD模型小鼠发挥治疗作用。行为评估显示电针显著改善PD-FMT小鼠的运动缺陷——提高ORP评分、缩短粘附点去除时间和增加旷场总距离——逆转相对于正常对照的受损表现。在分子水平上，电针恢复了降低的黑质酪氨酸羟化酶表达并减少了PD-FMT小鼠中升高的α-突触核蛋白积累。使用4D无标记乙酰化蛋白质组学，我们鉴定了PD-FMT小鼠中Sptan1和Ywhaq（14-3-3）的高乙酰化，电针逆转了这种变化。我们进一步验证电针降低了Ywhaq乙酰化并恢复了去乙酰化酶（HDAC1/2/3, SIRT1/2）在蛋白和mRNA水平的表达。这些结果表明电针至少部分通过上调去乙酰化酶表达减轻PD相关高乙酰化。
肠道微生物群失调已被确定为PD发病机制的早期和关键驱动因素。临床研究一致证明PD患者表现出独特的肠道微生物特征，其特征是短链脂肪酸产生菌（包括粪杆菌和罗氏菌）丰度减少，以及促炎类群（如阿克曼菌和大肠杆菌）水平增加。这种菌群失调损害肠屏障完整性，证据是紧密连接蛋白（包括occludin和ZO-1）表达下调，使得微生物代谢物如脂多糖和SCFAs易位到体循环中。升高的外周SCFAs特别是与PD严重程度相关，可能通过抑制HDACs和促进小胶质细胞激活。将PD患者微生物群移植到小鼠中重现了运动缺陷和α-突触核蛋白病理，而健康供体的粪便微生物群移植可能轻度改善早期PD的运动症状。为在临床前模型中重现这种"肠-脑轴"功能障碍，我们的研究采用了双重建模方法：首先，PD患者粪便微生物群移植诱导小鼠肠道微生物失调，随后MPTP给药触发多巴胺能神经元丢失。这种方法模拟PD的肠道和中枢病理特征，提供了一个研究肠道菌群失调和神经退行性变之间相互作用的模型。在我们的研究中，电针进一步显示出缓解PD-FMT小鼠中肠道微生物群失调诱导的病理效应的能力。这可能间接支持其缓解肠-脑轴相关损伤的潜力，从而减少对中枢神经系统的后续损伤。尽管当前研究未直接评估肠道来源介质，电针在该模型中的疗效表明其在调节肠-脑通信中的潜在作用，这一假设值得进一步研究。
赖氨酸乙酰化是一种可逆的翻译后修饰，由乙酰转移酶和去乙酰化酶（包括Zn2+依赖性HDACs和NAD+依赖性sirtuins）调节。乙酰化调节多种细胞过程——转录、信号传导、蛋白质聚集、自噬——其失调与神经退行性变有关。PD患者和模型显示HDAC1/2和SIRT1下调，导致非组蛋白的高乙酰化。
我们发现Ywhaq（14-3-3）在Lys49的高乙酰化——一个位于其功能结合沟内的残基——与PD样病理相关并被电针逆转。乙酰化中和了赖氨酸的正电荷，可能损害14-3-3结合客户蛋白的能力。14-3-3蛋白在脑中高表达，并在稳定磷酸化蛋白、调节亚细胞定位和防止聚集中起关键作用。它们与多种PD相关蛋白相互作用，包括LRRK2、α-突触核蛋白和parkin。例如，14-3-3结合维持LRRK2磷酸化和活性，而14-3-3θ/τ抑制α-突触核蛋白聚集并促进重折叠。降低的14-3-3功能加剧神经毒性，而过表达具有神经保护作用。因此，乙酰化介导的14-3-3功能破坏可能有助于PD发病机制，电针的去乙酰化可能恢复其神经保护作用。
应注意几个局限性。急性MPTP+PD-FMT模型不能完全重现人类慢性进行性PD。14-3-3乙酰化的下游效应——特别是其与PD相关蛋白的相互作用——仍不清楚，缺乏电针与肠-脑轴介质（如SCFAs）直接联系的证据。未来研究应采用慢性模型，研究14-3-3客户蛋白网络，并量化微生物代谢物。
5 Conclusion
总之，电针通过恢复去乙酰化酶表达和标准化蛋白质乙酰化，特别是14-3-3的乙酰化，改善PD模型小鼠的行为和神经病理表型。我们的结果强调了电针的治疗潜力，并突出乙酰化调节作为PD治疗的有前景策略。
