《Frontiers in Oncology》：Study on the regulation mechanism of TBX5 gene and Gegen Qinlian decoction on colorectal cancer
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本研究通过整合生物信息学与实验验证，系统探讨了转录因子TBX5在结直肠癌（CRC）中的致癌作用及其与中药复方葛根芩连汤（GQD）的潜在关联。研究发现TBX5在CRC组织中高表达且与不良预后相关，其通过调控上皮-间质转化（EMT）、肿瘤干细胞特性及免疫抑制微环境（如髓源性抑制细胞MDSCs）促进肿瘤进展。分子对接预测GQD活性成分（如芒柄花素）可与TBX5结合，动物实验证实GQD及TBX5敲低均能抑制肿瘤生长，为CRC的靶向治疗提供新思路。
背景
结直肠癌（CRC）是全球癌症相关死亡的主要原因之一，其发病机制涉及遗传、环境和免疫因素。TBX5是T-box转录因子家族成员，在胚胎发育中起关键作用，但其在CRC中的功能尚不明确。葛根芩连汤（GQD）作为传统中药方剂，近年研究发现其可通过调节肠道菌群和肿瘤微环境增强PD-1抑制剂疗效。本研究旨在探索TBX5在CRC中的表达、预后价值及与GQD的相互作用机制。
材料与方法
研究利用TCGA-CRC数据库的转录组数据（638例肿瘤组织与51例正常组织），通过差异表达分析筛选差异基因（DEGs）和差异miRNA（DEMs）。采用生存分析、免疫浸润分析（ssGSEA算法）、基因富集分析（GSEA）及网络构建（GeneMANIA、TargetScan等数据库）解析TBX5功能。通过分子对接（AutoDock Vina）预测GQD活性成分与TBX5的结合能力，并利用裸鼠移植瘤模型（HCT116细胞）验证GQD和TBX5敲低对肿瘤生长的抑制效果。
结果
- 1.
TBX5在CRC中高表达且预示不良预后
泛癌分析显示TBX5在CRC（尤其是结肠腺癌COAD）中显著上调，免疫组化证实其核定位与肿瘤进展相关。生存分析表明TBX5高表达组患者总生存率更低（图1C, 1D）。
- 2.
TBX5相关基因与关键通路关联
筛选出SPTBN4、CHD5、ATP8A2等7个与TBX5表达显著相关的预后基因。多因素Cox回归确定年龄、N分期和M分期为独立预后因素（图3B）。富集分析提示TBX5参与ECM受体相互作用、EMT及血管生成通路，且高表达组中肿瘤干细胞特性评分显著升高（图4C）。
- 3.
TBX5重塑免疫微环境
TBX5高表达组中MDSCs、单核细胞等免疫抑制细胞浸润增加，其中MDSCs与患者生存期缩短显著相关（图5B），表明TBX5可能通过调节免疫逃逸促进CRC进展。
- 4.
GQD与TBX5的调控网络
构建mRNA-miRNA-lncRNA网络（如TBX5-hsa-mir-1270-TMPO-AS1），分子对接显示GQD成分（如芒柄花素、肉桂酸）与TBX5具有高亲和力（结合能<-5 kcal/mol）（图7）。动物实验证实GQD干预和TBX5敲低均能抑制肿瘤体积与重量（图9C, 9D），免疫组化显示两组TBX5蛋白表达下调（图9F）。
讨论
本研究揭示TBX5作为CRC致癌基因的新角色，其高表达通过激活EMT、干细胞通路及招募MDSCs驱动肿瘤恶性进展。GQD活性成分与TBX5的相互作用为中药现代化治疗CRC提供了分子依据。未来需深入探索TBX5调控免疫细胞的具体机制及GQD的临床转化潜力。
结论
TBX5是CRC潜在的预后生物标志物和治疗靶点，GQD可能通过靶向TBX5相关通路抑制肿瘤发展，为联合免疫治疗提供新策略。
