《Brain Research Bulletin》：TCF7L2 Transcriptionally Regulates
C1QB to Exacerbate Synaptic Pruning-Dependent Neuronal Injury in the Epileptic Hippocampus
编辑推荐：
本研究针对癫痫中补体C1QB异常表达及其转录调控机制不明的关键问题，揭示了转录因子TCF7L2可直接结合C1QB启动子区域并正向调控其表达。通过体内外实验证实，抑制Tcf7l2能有效逆转癫痫模型中海马区C1qb过表达，减轻小胶质细胞异常活化与突触吞噬，从而改善神经元损伤。该发现不仅阐明了TCF7L2-C1QB轴在癫痫致病过程中的新机制，更为靶向该通路的抗癫痫治疗策略提供了理论依据。
癫痫作为一种常见的慢性神经系统疾病，全球患者人数超过7000万，其特征为反复发作的无诱因痉挛。尽管现有20余种抗癫痫药物可用于症状控制，但约三分之一患者对药物治疗反应不佳，因此探寻新的治疗靶点迫在眉睫。近年研究发现，神经炎症反应在癫痫发生发展中起关键作用，其中小胶质细胞（中枢神经系统主要免疫细胞）的异常活化及其介导的突触修剪（synaptic pruning）过程尤为引人关注。补体系统（complement system）中的重要组分C1q（由A、B、C三条多肽链构成）被证实参与小胶质细胞的吞噬活性，在阿尔茨海默病等神经退行性疾病中促进突触丢失。特别值得注意的是，C1q的B链由C1QB基因编码，在癫痫患者及动物模型的海马组织中呈现显著高表达，但其在癫痫中的具体作用机制尚未明确。
与此同时，经典Wnt信号通路中的关键转录因子TCF7L2（transcription factor 7-like 2）在神经发育、突触可塑性及胶质细胞功能调控中发挥重要作用。前期研究表明TCF7L2可促进小胶质细胞活化，但其是否参与癫痫病理过程，特别是与C1QB之间存在调控关系，仍有待探索。南京医科大学附属儿童医院团队在《Brain Research Bulletin》发表的研究，正是针对这一科学问题展开系统研究。
研究人员综合运用生物信息学分析、染色质免疫共沉淀（ChIP）、双荧光素酶报告基因检测、免疫荧光染色、蛋白质印迹（Western blot）、实时定量PCR、体外细胞模型（人小胶质细胞系HMC3）及体内动物模型（红藻氨酸诱导的C57BL/6J小鼠癫痫模型）等关键技术方法，其中动物实验均经南京医科大学动物伦理委员会批准（IACUC-2503056），细胞模型采用无镁细胞外液诱导的癫痫细胞模型。
研究结果首先通过免疫荧光共定位分析证实，在癫痫小鼠海马区，C1qb与Tcf7l2表达均显著上调，且与神经元标志物NeuN及小胶质细胞标志物IBA1共定位，提示二者在癫痫病理环境下被特异性激活。尼氏染色显示癫痫小鼠海马区神经元数量减少、尼氏体密度下降，伴随小胶质细胞形态活化（胞体面积增大、分支端点增多、总分支长度增加）。通过CD68（吞噬标志物）/PSD95（突触后密度蛋白95）/IBA1三重荧光染色及Western blot检测，发现癫痫组小胶质细胞吞噬活性增强，突触蛋白PSD95和突触素（SYN）表达降低，表明异常突触修剪参与癫痫神经元损伤。
机制探讨方面，研究人员通过JASPAR数据库预测并在实验验证发现，TCF7L2可直接结合C1QB启动子区域（-380 bp至-371 bp）。双荧光素酶报告基因实验显示，TCF7L2过表达可增强C1QB启动子活性，而突变结合位点或敲低TCF7L2则逆转此效应。在HMC3细胞中，TCF7L2的敲降或过表达分别导致C1QB mRNA和蛋白水平的相应变化，进一步证实TCF7L2对C1QB的转录正向调控。
体内功能验证中，研究人员通过腺相关病毒介导的Tcf7l2敲降（AAV-shTcf7l2）显著降低癫痫小鼠海马区C1qb表达，减轻小胶质细胞活化与突触吞噬，增加PSD95和SYN表达，改善神经元损伤及癫痫行为（Racine评分降低、发作次数减少）。
研究结论明确揭示TCF7L2通过直接转录上调C1QB表达，促进小胶质细胞异常活化与突触修剪，加剧癫痫海马神经元损伤。该研究首次建立TCF7L2-C1QB调控轴在癫痫中的致病作用，为理解癫痫发病机制提供新视角。讨论部分指出，尽管本研究在实验模型中获得重要发现，未来仍需在临床样本中验证该通路作用，并深入探究小胶质细胞对兴奋性/抑制性神经元突触的特异性吞噬模式。靶向TCF7L2-C1QB通路可能成为耐药性癫痫的潜在治疗策略，特别是针对神经炎症与突触失衡环节的干预具有重要转化意义。
