T-钙黏蛋白：脂肪干细胞静息与成脂分化的新型调控枢纽

《Frontiers in Cell and Developmental Biology》：Adiponectin receptor T-cadherin emerges as a novel regulator of adipose stem cell quiescence and adipogenesis

本研究系统揭示了T-钙黏蛋白（T-cadherin）作为脂肪间充质干细胞（MSCs）中DPP4+祖细胞亚群的关键调控因子，通过单细胞转录组测序（scRNA-seq）、谱系追踪及基因过表达实验，证实T-钙黏蛋白通过上调DPP4表达抑制细胞增殖与成脂分化，维持干细胞静息状态，为肥胖及相关代谢疾病的细胞靶向治疗提供新视角。

　　

脂肪组织中T-钙黏蛋白表达细胞的发现与空间分布

通过人皮下脂肪组织切片免疫荧光染色，发现T-钙黏蛋白广泛表达于血管周围及大脂滴周围间质区域，且与DPP4⁺细胞存在共定位。定量分析显示，DPP4⁺/T-钙黏蛋白⁺双阳性细胞仅占组织总细胞约1%，其分布在不同供体间存在差异，但均集中于网状间质和脂滴相邻区域。

体外培养MSCs中T-钙黏蛋白与DPP4的共表达特征

早期传代（P2–P4）的人脂肪来源MSCs中，T-钙黏蛋白表达呈镶嵌模式，流式细胞术检测显示15%–38%的细胞为T-钙黏蛋白阳性，其中约10%–15%同时表达DPP4。免疫荧光双染进一步验证了T-钙黏蛋白与DPP4在部分MSCs中的共表达，提示其在体外仍保留体内祖细胞标记特征。

成脂诱导下T-钙黏蛋白表达动态变化

scRNA-seq分析显示，在未分化对照组MSCs中，59%的细胞表达T-钙黏蛋白（CDH13基因），而经过4天成脂诱导后，该比例降至34%。RT-qPCR结果同步证实，成脂诱导第4天时T-钙黏蛋白mRNA水平下降约5倍，并于第10天维持低表达。这表明成脂分化进程中T-钙黏蛋白表达整体下调，但仍存在少量持续表达该蛋白的细胞亚群。

高表达T-钙黏蛋白的MSCs亚群具干细胞特性

整合scRNA-seq数据聚类分析发现，高表达CDH13与DPP4的细胞主要富集于Cluster 3，该集群同时高表达Notch1/3、Wnt通路基因、CD90、PDGFR等干细胞相关标记。热图分析进一步揭示，高CDH13表达细胞中多能性基因（如NANOG、SOX2）表达水平显著高于低表达组，且该特征在成脂诱导后仍得以维持。

T-钙黏蛋白过表达对DPP4及细胞增殖的调控

通过慢病毒载体过表达T-钙黏蛋白后，Western blot与RT-qPCR检测到DPP4蛋白及mRNA水平显著升高。细胞增殖实验显示，过表达T-cadherin的MSCs增殖活性显著低于对照组，大部分细胞停滞于G₁期，提示其进入静息状态。

T-钙黏蛋白抑制成脂分化的功能验证

长期活细胞成像追踪显示，在成脂诱导培养基中培养10天后，T-钙黏蛋白过表达细胞（mKate标记）几乎不积累尼罗红染色的脂滴，而相邻未转染细胞分化明显。AI图像分析统计证实，过表达组分化细胞比例仅为1.76%，显著低于对照组（4.23%–12.75%）。Western blot检测早期成脂标记CEBP Beta在过表达组中表达亦显著降低。

伪时序轨迹揭示T-钙黏蛋白⁺细胞不参与成脂分化路径

Slingshot伪时序分析构建了从Cluster 0（纤维细胞/细胞周期相关）向Cluster 1（前脂肪细胞）的分化路径。Cluster 3（高表达CDH13/DPP4）位于独立分支，与成脂主流路径分离，提示该亚群倾向于维持干细胞特性而非参与脂肪生成。

讨论：T-钙黏蛋白-DPP4轴调控脂肪祖细胞命运

本研究提出T-钙黏蛋白作为DPP4⁺祖细胞的上游调控因子，通过维持细胞静息状态和抑制成脂分化，参与脂肪组织干细胞巢的稳态维持。其与HMW脂联素（adiponectin）的受体功能可能形成反馈调节环路，在代谢疾病中具有潜在靶向价值。