《International Journal of Endocrinology》：The Role and Clinical Significance of miR-484 in the Regulation of SGLT2 in Diabetic Nephropathy
编辑推荐：
本研究系统阐明了miR-484在糖尿病肾病（DN）患者血清中表达下调，且与糖化血红蛋白（HbA1c）、尿白蛋白/肌酐比值（ACR）负相关，与估算肾小球滤过率（eGFR）正相关，是DN的独立危险因素。研究证实miR-484可靶向抑制钠-葡萄糖协同转运蛋白2（SGLT2）表达，并通过细胞实验证明其可减轻高糖（HG）诱导的肾小管上皮细胞（HK-2）增殖抑制、氧化应激（MDA/SOD）和炎症反应（TNF-α/IL-6/IL-1β），揭示了miR-484/SGLT2轴作为DN潜在生物标志物和治疗靶点的重要价值。
引言
糖尿病肾病（Diabetic Nephropathy, DN）是2型糖尿病（Type 2 Diabetes Mellitus, T2DM）最严重的微血管并发症之一，也是全球终末期肾病（End-Stage Kidney Disease, ESKD）的主要原因，与心血管风险升高密切相关。其发病机制复杂，高血糖是核心驱动因素，通过炎症、氧化应激和肾小管上皮细胞凋亡等机制促进疾病进展。目前临床诊断主要依赖尿白蛋白检测和肾功能评估，但存在漏诊风险。因此，寻找新的生物标志物对于DN的早期检测、疾病进展预测和实施精准医学至关重要。MicroRNAs（miRNAs）作为基因表达的关键调控因子，在DN的发生发展中起重要作用。本研究旨在系统探讨miR-484在DN中的表达谱及其对下游基因SGLT2的分子调控机制。
研究参与者与临床数据采集
研究纳入蚌埠医学院第一附属医院收治的189例T2DM患者，其中103例伴DN（DN组），86例不伴DN（T2DM组），另招募73名同期健康体检者作为对照组（HC组）。收集所有受试者的年龄、性别、体重指数（Body Mass Index, BMI）、收缩压（Systolic Blood Pressure, SBP）、舒张压（Diastolic Blood Pressure, DBP）等临床数据，并检测糖化血红蛋白（HbA1c）、空腹血糖（Fasting Blood Glucose, FBG）、口服葡萄糖耐量试验2小时血糖（2h-OGTT）、估算肾小球滤过率（eGFR）和尿白蛋白/肌酐比值（Urinary Albumin-to-Creatinine Ratio, ACR）。
miR-484在T2DM中的表达及临床意义
临床基线资料比较显示，三组在年龄、性别、高血压患病率、BMI方面无显著差异，但HbA1c、FBG、2h-OGTT、eGFR和尿ACR存在显著差异。血清miR-484水平在T2DM患者和DN患者中均显著低于健康对照组。受试者工作特征（ROC）曲线分析表明，miR-484能有效区分健康个体与T2DM患者（曲线下面积AUC=0.853，敏感性79.07%，特异性78.08%），以及T2DM患者与DN患者（AUC=0.829，敏感性80.58%，特异性74.42%）。
血清miR-484表达与糖代谢及肾功能异常显著相关且是DN的独立危险因素
Pearson相关分析显示，血清miR-484表达水平与HbA1c（r = -0.669）、FBG（r = -0.666）、2h-OGTT（r = -0.630）和ACR（r = -0.599）呈显著负相关，与eGFR（r = 0.630）呈显著正相关。多因素Logistic回归分析进一步证实，miR-484（OR = 0.100, 95% CI: 0.044–0.228, p < 0.001）、HbA1c、FBG和2h-OGTT是T2DM患者进展为DN的独立危险因素。
miR-484模拟物减轻高糖诱导的HK-2细胞增殖抑制、氧化应激和炎症反应
在高糖（30 mM）处理的HK-2细胞模型中，miR-484表达显著下调。转染miR-484模拟物（mimics）可恢复其表达。细胞功能实验表明，高糖抑制HK-2细胞增殖并诱导细胞凋亡，而miR-484模拟物可逆转高糖对细胞增殖的抑制作用并抑制细胞凋亡。在氧化应激指标方面，高糖处理导致细胞内丙二醛（Malondialdehyde, MDA）水平升高、超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase, SOD）活性降低，miR-484模拟物可降低MDA水平并恢复SOD活性。在炎症因子方面，高糖暴露升高了肿瘤坏死因子-α（Tumor Necrosis Factor-α, TNF-α）、白细胞介素-6（Interleukin-6, IL-6）和白细胞介素-1β（IL-1β）的水平，miR-484模拟物则能降低这些炎症细胞因子的水平。
miR-484与SGLT2靶向相互作用且高糖通过调控miR-484增强SGLT2表达
通过生物信息学数据库TargetScan预测，SGLT2是miR-484的潜在下游靶基因。双荧光素酶报告基因实验证实，miR-484可直接结合SGLT2的3'非翻译区（3'UTR），负调控其活性。qPCR和Western blot实验结果一致显示，高糖处理可上调HK-2细胞中SGLT2的mRNA和蛋白表达水平。转染miR-484模拟物可抑制高糖诱导的SGLT2表达上调，而转染miR-484抑制剂（inhibitor）则进一步增强SGLT2的表达。
讨论
本研究系统阐明了miR-484在DN中的表达特征、临床意义及其分子机制。结果表明，血清miR-484水平与DN严重程度负相关，可作为反映糖代谢紊乱和肾损伤的双重指标，并具有较高的早期诊断价值。细胞实验证实，miR-484通过靶向抑制SGLT2表达，减轻高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤、氧化应激和炎症反应，在DN发病机制中起关键保护作用。miR-484/SGLT2轴的发现为DN的早期诊断、风险分层和靶向治疗提供了新的见解和候选策略，有望推动DN精准医学的发展。
伦理声明
本研究遵循《赫尔辛基宣言》原则，并获得蚌埠医学院第一附属医院伦理委员会批准，所有参与者均签署知情同意书。
利益冲突
作者声明无利益冲突。
资助
作者未从任何组织获得为本研究提供的支持。
数据可用性声明
通讯作者可提供相关数据和研究材料。
