《Cardiovascular Therapeutics》：From the Liver to Heart in Nonalcoholic Fatty Liver Disease: Single-Cell and Serum Evidence for Cytokeratin 18 in Predicting Cardiovascular Risk
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本文聚焦非酒精性脂肪肝病（NAFLD）与冠心病（CHD）的关联，通过单细胞测序与血清学分析，首次揭示细胞角蛋白18（CK18）作为肝-心轴关键生物标志物的潜力。研究发现CK18-M30与CK18-M65可有效区分NAFLD合并CHD患者（AUC=0.843），其机制涉及TGF-β/IL-6通路介导的炎症反应与胰岛素抵抗（HOMA-IR）。研究为NAFLD患者心血管风险早期识别提供了新策略。
引言
非酒精性脂肪肝病（NAFLD）作为一种与代谢紊乱密切相关的肝脏疾病，近年发病率持续上升。尽管其命名已更新为代谢功能障碍相关脂肪性肝病（MASLD），本研究为与既往CK18研究保持一致，仍沿用NAFLD术语。NAFLD不仅是肝硬化和肝癌的危险因素，更与心血管疾病（CVD）紧密关联，超过60%的NAFLD患者死亡归因于CVD。肝细胞凋亡与坏死过程中释放的细胞角蛋白18（CK18）片段（M30和M65）已被证实可反映NAFLD严重程度，但其在心血管并发症预测中的作用尚不明确。本研究通过整合单细胞RNA测序（scRNA-seq）与临床血清检测，探讨CK18在NAFLD合并冠心病（CHD）中的诊断价值及肝-心轴机制。
方法
研究纳入2022年9月至2024年7月确诊的127例NAFLD患者，根据CHD存在情况分为CHD组（n=79）与无CHD组（n=48），另设100名健康对照。采集空腹静脉血检测CK18-M30、CK18-M65、肝功能指标（ALT、AST）、血脂（TC、TG）及胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）。单细胞数据来源于Tabula Sapiens数据库，通过CellChat分析肝细胞与心脏细胞（心肌细胞、成纤维细胞、内皮细胞）间的配体-受体互作。采用逻辑回归模型评估CK18对CHD的预测效能，并通过ROC曲线、校准曲线和决策曲线分析验证模型性能。
结果
- 1.
单细胞表达特征：CK18（KRT18）在肝脏中高表达于肝细胞和胆管细胞，在心脏中主要分布于间皮细胞和内皮细胞，为肝-心通讯提供细胞基础（图1-2）。
- 2.
细胞互作网络：CellChat预测肝细胞可通过TGF-β和IL-6信号通路与心脏细胞沟通，虽互作概率较弱，但TGFB1/IL6等配体及其受体在双方细胞中均有低水平表达（图3）。
- 3.
血清标志物差异：NAFLD患者CK18-M65（149.47±36.42 U/mL）和CK18-M30（103.79±36.29 U/mL）水平显著高于健康对照组（p<0.001），且CHD组二者水平进一步升高（p<0.05）。
- 4.
多因素回归分析：CK18-M30（OR=2.798）、CK18-M65（OR=1.001）、TC、ALT、AST和HOMA-IR是NAFLD患者合并CHD的独立危险因素（表5）。
- 5.
诊断效能：CK18-M30/M65联合模型的AUC达0.843（灵敏度87.34%，特异性75.00%），显著优于单一指标（图4）。决策曲线分析显示该模型在0.2-0.8阈值范围内具有临床净获益（图5）。
讨论
本研究首次从单细胞与血清层面证实CK18在NAFLD心血管风险预测中的价值。CK18升高反映肝细胞凋亡（M30）和总细胞死亡（M65），与胰岛素抵抗、炎症通路（TNF/NF-κB）激活密切相关。肝细胞通过TGF-β/IL-6等因子与心脏细胞互动，构成肝-心轴的理论基础。研究局限性包括样本量较小、横断面设计无法推断因果，且排除了糖尿病和高血压患者，未来需扩大队列并纳入预后随访。
结论
血清CK18可作为NAFLD患者合并CHD的无创生物标志物，其机制涉及肝-心轴间的炎症与代谢交互。联合检测CK18-M30/M30有助于早期识别高危人群，为心血管并发症防控提供新思路。
