《Journal of Virology》：Annexin A2 negatively regulates IFN-β production through targeting the RLR signaling pathway
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本研究首次揭示膜联蛋白A2（ANXA2）作为RLR信号通路的负向调控枢纽，通过同时破坏MDA5-MAVS和MAVS-TRAF3相互作用，抑制I型干扰素（IFN-β）产生，从而促进多种RNA病毒复制。该发现为开发靶向ANXA2的广谱抗病毒策略提供了理论依据。
ANXA2抑制I型干扰素产生的发现背景
膜联蛋白A2（ANXA2）作为多功能支架蛋白，此前已被报道通过与流感病毒NS1蛋白、猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP9蛋白等特异性互作促进病毒复制。然而，其是否通过宿主通用机制广谱调控抗病毒免疫仍不明确。本研究通过系列实验证实，ANXA2能够独立于病毒特异性互作，直接靶向宿主RLR信号通路核心环节，负调控I型干扰素产生。
ANXA2对I型干扰素产生的抑制作用
在HEK293T细胞中，过表达ANXA2可显著抑制仙台病毒（SeV）、脑心肌炎病毒（EMCV）等RNA病毒或poly(I:C)诱导的IFN-β启动子活性和mRNA表达（图1A-D）。同时，ANXA2缺失细胞（HEK293T-Anxa2-/-）在病毒刺激下表现出更强的IFN-β、ISG56和Mx1表达（图1K-L），且病毒复制被显著抑制（图2D,H）。值得注意的是，ANXA2不影响JAK-STAT通路中ISRE和ISG56的启动子活性（图1O-P），说明其特异性作用于干扰素产生上游。
作用靶点定位：ANXA2破坏RLR信号通路上游信号转导
通过关键分子筛选实验，ANXA2可抑制RIG-I、MDA5、MAVS、TBK1和IKKε介导的IFN-β启动子激活，但对组成型激活的IRF3-5D无影响（图3A-I），表明其作用于IRF3磷酸化上游。进一步机制研究发现，ANXA2作为支架蛋白同时干扰RLR通路两个关键节点：
- 1.
阻断MDA5-MAVS互作：ANXA2通过结合MDA5的CARD结构域（图4E），竞争性抑制MDA5与MAVS的CARD域结合（图4F-G）。
- 2.
破坏MAVS-TRAF3复合物形成：ANXA2结合MAVS连接区（CARD与跨膜结构域之间），阻碍TRAF3招募（图5E-G），从而抑制下游TBK1/IKKε激活。
体内外验证ANXA2的生理功能
在Anxa2-/-基因敲除小鼠模型中，原代腹腔巨噬细胞感染EMCV或水疱性口炎病毒（VSV）后，IFN-β表达显著升高，病毒载量下降（图6D-K）。动物实验进一步证实，Anxa2-/-小鼠对VSV和EMCV攻击表现出更强抵抗力，存活率提高，组织病毒复制减少且炎症损伤减轻（图7A-K）。这些结果在生理层面验证了ANXA2作为免疫负调控因子的功能。
讨论与展望
本研究提出ANXA2通过“感染触发增强抑制”模型精细调控RLR信号：在稳态下，ANXA2与MAVS的基底性互作不干扰线粒体定位；病毒感染后，ANXA2被招募至MDA5-MAVS信号复合物，通过空间位阻或构象封锁方式放大抑制作用。该机制既防止IFN过度反应导致免疫病理，又为病毒逃逸提供可乘之机。未来针对ANXA2-信号复合物结构的解析将为设计时序性抗病毒干预策略提供新方向。
