《Soil & Environmental Health》:A Novel Ion Chromatography Method for Rapid Phytate Determination in Plant Tissues and Grains: Validation and Application
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本研究针对植物样品中植酸(phytate)准确定量难题,开发了一种基于抑制电导检测的离子色谱(IC-SCD)新方法。该方法实现了植酸与肌醇三磷酸及有机酸盐的有效分离,检出限低至0.2 mg/L,在15种植物样品中的应用表明Wade法因有机酸盐干扰会高估植物组织植酸含量,为植物磷循环研究提供了可靠分析工具。
在植物王国中,植酸(phytate,即肌醇六磷酸盐)扮演着双重角色:它既是谷物中磷的主要储存形式(占总磷65%-90%),又是影响人类和单胃动物矿物质吸收的"抗营养素"。然而,准确测定植物样品中的植酸含量一直是个技术难题——传统方法如Wade法易受有机酸盐干扰,高效液相色谱(HPLC)法则因检测灵敏度不足而难以准确测定植物组织中低含量的植酸。这一技术瓶颈严重制约了人们对植物磷代谢、营养品质改良等领域的深入研究。
近日,浙江大学环境与资源学院的研究团队在《Soil》期刊发表论文,开发了一种基于离子色谱-抑制电导检测(IC-SCD)的植酸快速测定新方法。该方法成功解决了植物样品中植酸准确定量的技术难题,为植物磷循环研究提供了可靠分析工具。
研究团队主要采用离子色谱技术结合抑制电导检测器(IC-SCD),建立了植酸分析方法。通过对15种植物样品(包括2种模式植物、4种作物、4种蕨类植物和5种谷物样品)的系统验证,研究人员比较了IC-SCD法与Wade法、HPLC-UV法的分析性能。方法验证包括线性范围、检出限、精密度和准确度等指标,并通过加标回收实验评估方法可靠性。
方法建立与验证结果显示,IC-SCD法在5-50 mg/L范围内呈现良好线性(r>0.999),检出限低至0.2 mg/L(相当于0.04 mg/g样品),远优于Wade法(约20 mg/L)和HPLC-UV法(1-10 mg/L)。该方法成功实现了植酸与肌醇三磷酸(inositol trisphosphate)的基线分离(保留时间分别为21.0和22.5分钟),分析时间从传统方法的30-65分钟缩短至23分钟。
在分离性能方面,IC-SCD法展现出显著优势。与HPLC-UV法相比,新方法能有效分离植酸与植物中常见的有机酸盐(苹果酸盐、酒石酸盐、草酸盐和柠檬酸盐)。这些有机酸盐在HPLC-UV分析中会产生强烈信号重叠,而IC-SCD法基于电荷差异的分离机制避免了这一干扰。
实际样品分析结果表明,10种植物组织的植酸含量为0.20-1.14 mg/g,其中砷超积累植物蜈蚣草(Pteris vittata)含量最高(1.14 mg/g);5种谷物样品的植酸含量为1.64-3.11 mg/g,符合其作为磷储存器官的特性。值得注意的是,Wade法测得的植物组织植酸含量(6.67-8.01 mg/g)显著高于IC-SCD法,研究人员通过实验证实这种差异源于有机酸盐与Wade试剂中Fe3+的络合反应导致的干扰。
讨论部分指出,IC-SCD法的优势在于其基于离子交换的分离机制与电导检测的结合,能够有效区分植酸与其他干扰物质。该方法不仅解决了植物组织中低含量植酸准确测定的技术难题,还为研究植酸在植物生理功能(如细胞壁生物合成、应激响应)中的作用提供了可靠工具。特别值得关注的是,在砷超积累植物蜈蚣草中检测到较高植酸含量,暗示植酸可能在砷积累过程中发挥特殊作用。
该研究的创新性在于首次系统评估了IC-SCD法在植物样品植酸分析中的性能,明确了有机酸盐干扰是导致传统方法误差的主要原因。这一方法为植物磷营养研究、作物品质改良及环境磷循环研究提供了重要的技术支持,未来可进一步应用于土壤、根系分泌物等环境样品的植酸分析,为深入理解磷生物地球化学循环提供方法学基础。