增强型淋巴毒素α DNA的高甲基化及其与中国人群类风湿关节炎遗传多态性的相关性

《Cytokine》：Enhanced lymphotoxin alpha DNA hypermethylation and correlation with genetic polymorphism in rheumatoid arthritis among the Chinese population

【字体：大中小】 时间：2026年01月18日 来源：Cytokine 3.7

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　　类风湿关节炎（RA）患者LTA基因DNA甲基化水平显著升高，并与炎症指标及特定SNP（rs2009658 CC、rs2229094 TT）相关，提示甲基化可能作为炎症标志和表观遗传治疗靶点。

宋静静|刘振|徐晓红|王彦妮|杨帆|张婷|张云清|毕玉飞|潘正伦

山东大学齐鲁医院（青岛）风湿病科，齐鲁医学院，青岛，中国

摘要

背景

类风湿性关节炎（RA）是一种多因素自身免疫性疾病，其特征是持续的炎症和关节破坏。尽管对RA的免疫病理学有了深入的了解，但其表观遗传调控机制仍需进一步探索，尤其是在不同人群中。本研究旨在通过分析中国人群中的淋巴毒素α（LTA）DNA甲基化情况，并探讨其与基因多态性的关系，来填补这一空白。

方法

本研究共纳入了145名RA患者和140名年龄匹配的健康对照组，来自中国青岛。我们使用亚硫酸氢盐测序技术分析了LTA基因的DNA甲基化情况，并通过高分辨率熔解分析技术评估了SNP基因型。随后利用SPSS软件进行统计分析，以探讨甲基化模式与RA严重程度的临床指标之间的关联。

结果

与对照组相比，RA患者LTA基因中的多个CpG位点的甲基化水平显著升高。这些甲基化模式与红细胞沉降率、C反应蛋白和疾病活动评分-28等临床指标呈正相关，表明它们在RA的病理生理过程中起着重要作用。rs2009658基因的CC基因型与LTA基因中多个CpG位点的甲基化升高有关，rs2229094基因的TT基因型也是如此。

结论

LTA DNA甲基化可能是RA的一个潜在炎症指标和治疗靶点。rs2009658的CC基因型和rs2229094的TT基因型与LTA高甲基化相关。

引言

类风湿性关节炎（RA）是一种致残性的自身免疫性疾病，其特征是慢性炎症和进行性关节损伤。促炎细胞因子的存在直接刺激RA纤维母细胞样滑膜细胞（FLS）的增殖和活化，这是RA发病机制中的关键事件。针对肿瘤坏死因子（TNF）、IL-6等因子的生物制剂已在临床实践中得到广泛应用。在RA的炎症级联反应中，TNF-α起着核心作用，它是驱动炎症过程、导致关节侵蚀和全身症状的关键细胞因子。淋巴毒素α（LT-α）与TNF密切相关，常被称为TNF-β，主要在淋巴细胞中表达，而TNF-α主要由巨噬细胞产生。LT-α在功能和结构上与TNF-α有显著相似性，包括与相同的TNF受体（TNFR1和TNFR2）结合。LT-α主要通过结合TNFR1发挥作用，但也能结合HVEM。一些患者对针对TNF-α的英夫利昔单抗无反应，而对同时针对TNF-α和LT-α的依那西普有反应，这表明LT-α在RA中可能具有独立的作用[1]。先前的研究[2],[3],[4],[5]证实LT-α在RA患者的外周血和滑膜组织中表达异常，参与了关节炎症和骨破坏过程。目前尚无研究探讨RA或其他自身免疫性疾病中LTA的甲基化状态，LTA DNA甲基化在RA相关炎症中的作用仍不清楚。

基因表达受复杂的调控机制控制，其中表观遗传修饰起着重要作用。DNA甲基化[6],[7],[8],[9],[10]是一种关键的表观遗传修饰，涉及在DNA分子上共价添加甲基。Marzena Ciechomska[6]回顾了RA中的DNA甲基化模式，指出了其在RA及其他自身免疫性疾病诊断和治疗中的挑战。Kazuhisa Nakano[7]分析了6例RA患者和5例骨关节炎（OA）患者的FLS细胞的基因组DNA，发现了1859个差异甲基化位点。这些差异甲基化的基因可能调控FLS细胞的基因表达，并参与RA的发病机制。Dongyi He的团队[8],[9]依次检测了RA患者中HTR2A和HIPK3的甲基化水平，并将这些数据与临床参数进行了整合。他们的发现表明，这些基因的甲基化水平具有潜在的临床诊断价值，并与炎症活动相关。

在这里，我们研究了LTA的表观遗传调控机制，特别是DNA甲基化。我们假设LTA DNA的差异甲基化与RA患者的疾病活动相关。我们分析了RA患者和对照组之间的LTA甲基化差异，探讨了它们与临床炎症指标的关联，以及单核苷酸多态性（SNPs）与甲基化模式之间的联系。这种方法不仅加深了我们对RA复杂病因的理解，也为通过表观遗传调控来调节疾病进展的新治疗策略奠定了基础。

参与者

我们招募了145名在2017年1月至2022年12月期间到访山东大学齐鲁医院青岛校区的RA患者。纳入标准：符合2010年美国风湿病学会（ACR）的RA诊断标准[11]；年龄在18至70岁之间；自愿参与并签署知情同意书。排除标准：患有肿瘤、严重肝/肾功能障碍或传染病；同时患有其他自身免疫性疾病（如系统性红斑狼疮）。

人口统计和临床特征

本研究分析了145名RA患者和140名健康对照组中的LTA DNA甲基化水平。人口统计分析显示两组在年龄和性别上无显著差异。RA患者的平均年龄为57.23 ± 12.41岁，对照组为56.40 ± 13.20岁，男女比例分别为1:3.53和1:3.83。体质指数（BMI）比较也无统计学意义。RA患者的白细胞计数较高。

讨论

我们的研究结果显示，与健康对照组相比，RA患者的LTA及其CpG位点的甲基化程度显著升高。滑膜炎是RA的关键特征，滑膜组织主要由FLS组成。在RA患者中，浸润的淋巴细胞可以聚集形成有组织的淋巴结构，甚至形成类似生发中心的结构。在一项研究中，64例滑膜组织活检样本中有23.4%出现了含有生发中心的淋巴滤泡。

局限性

本研究主要关注RA患者和健康对照组中的LTA甲基化模式和SNPs的检测。然而，也存在一些局限性：首先，我们缺乏关于外周血或滑膜组织中LT-α表达水平的数据，也未进行功能测定或组织特异性验证；其次，由于未经治疗的RA患者样本量较小，我们仅基于药物亚组进行了差异甲基化分析，未排除其他影响因素。

作者贡献声明

宋静静：撰写初稿、软件使用、资源准备、项目管理、数据分析、数据整理、概念构思。刘振：指导工作、软件使用、数据分析、数据整理。徐晓红：软件使用、资源准备、方法学设计、数据分析、概念构思。王彦妮：撰写初稿、数据可视化、资源准备、数据整理。杨帆：撰写修订稿、指导工作、方法学设计、概念构思。张婷：数据可视化、方法学设计。