摘要: 探究茯苓中过氧去氢土莫酸 (peroxydehydrotumulosic acid, PHA) 对过敏性哮喘小鼠的干预作用, 并基于代谢组学探究其作用机制。雄性BALB/c小鼠随机分为正常组 (CON)、模型组 (M)、阳性药孟鲁斯特钠组 (Y, 1.3 mg·kg
-1)、PHA低剂量组 (PHA-L, 15 mg·kg
-1)和PHA高剂量组 (PHA-H, 30 mg·kg
-1)。采用腹腔注射卵清蛋白 (ovalbumin, OVA) 和氢氧化铝佐剂进行致敏, OVA雾化激发建立过敏性哮喘小鼠模型。造模前30 min灌胃给予相应药物, 连续给药7天, 最后一次给药24 h后检测小鼠咳喘指标、肺功能、肺系数, 苏木精-伊红 (hematoxylin-eosin, HE) 染色观察小鼠肺组织病理变化, 马松 (Masson) 染色观察其胶原纤维沉积水平, 酶联免疫吸附 (ELISA) 测定小鼠血清和肺泡灌洗液中炎症因子水平, 流式细胞术检测小鼠肺组织凋亡细胞水平以及血中Th17、Tregs细胞水平, 采用液质联用技术 (LC-MS), 对不同处理组小鼠的血清样本小分子代谢产物进行分析, 运用主成分分析 (principal component analysis, PCA) 与偏最小二乘判别分析 (orthogonal partial least squares discriminant analysis, OPLS-DA) 等多元统计方法, 筛选差异代谢物并通过代谢通路富集分析, 探究特征代谢物所参与的生物代谢途径。结果显示, 与M组相比, PHA组可以显著改善小鼠的肺功能, 降低肺系数,减轻肺组织病理损伤和胶原纤维沉积, 显著下调血清中白介素4 (interleukin 4, IL4)、免疫球蛋白E (immunoglobulin E, IgE)、白介素17A (interleukin 17A, IL17A)以及肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子
α (tumor necrosis factor-
α, TNF-
α) 的水平, 抑制肺组织细胞凋亡以及Th17细胞的生成, 增加Tregs细胞水平。代谢组学分析M组与PHA组内源性物质分离明显, 筛选出差异代谢物63个, 标志性差异代谢物11个, 主要涉及花生四烯酸代谢, 视黄醇代谢, 苯丙氨酸、色氨酸、酪氨酸的生物合成, 甘油磷脂代谢和酪氨酸代谢。PHA可以通过抑制炎症因子IL4、IL17A的产生, 阻碍炎症细胞的招募, 调节部分差异代谢物及代谢通路紊乱, 从而改善哮喘的小鼠的病理状态。动物实验获得河南中医药大学动物伦理委员会批准和监督 (伦理编号: DWLL2018080003)。
