均相时间分辨荧光技术测定促黄体生成素生物学活性

　　

摘要: 本研究采用均相时间分辨荧光技术, 在LHCGR(-Ex10)-CRE-luc-HEK293细胞中通过竞争性免疫法检测细胞中cAMP的量, 建立促黄体生成素 (LH) 体外生物学活性测定方法。对方法的关键参数进行优化, 并对方法的相对准确度、中间精密度、线性和范围进行了验证。优化后确定实验条件为: 起始浓度200 nmol·mL^-1、7倍梯度稀释、细胞密度24 000 cells·well^-1、孵育时间30 min。结果表明, 方法在64%～156%的相对效价水平范围内线性良好, 相对准确度高, 且中间精密度良好。本研究成功建立并验证了检测LH生物学活性的均相时间分辨荧光法, 可用于重组促黄体生成素类药物生物活性评价和质量控制, 并可用于鉴别重组促黄体生成素。