摘要: 脂质纳米颗粒 (lipid nanoparticles, LNP) 因其安全性高、稳定性好及核酸封装效率优异等特点, 成为极具前景的基因递送载体。当前临床基因治疗主要依赖侵入性给药方式, 因此开发顺应性强、非侵入性的给药途径 (如口服给药)至关重要。然而口服基因递送载体面临着核酸药物在胃肠道酸性环境 (pH 1.5～4.5) 易降解的难题。为此, 本研究基于大肠杆菌的细菌外膜囊泡 (bacterial outer membrane vesicles, OMV) 和阳离子脂质肽 (RLS) 构建了含胆固醇 (cholesterol) 的杂化系统 (a cholesterol-enriched hybrid system based on an amphiphilic cationic lipopeptide and
Escherichia coli outer membrane vesicles, RLSC/OMVC), 该体系在中性和酸性条件下均展现出高效基因递送能力, 并具有优良的体外生物相容性。研究分别表征了不含胆固醇与含胆固醇制剂 (RLS、RLSC、OMV和OMVC) 的物理化学特性, 并通过体外细胞转染, 表明RLSC/OMVC在酸性条件 (pH 4.5) 下的基因递送效率较Lipofectamine 2000显著提升 (约3倍)。进一步通过透射电镜观察、粒径/电位分析和凝胶电泳实验揭示了OMV及胆固醇协同脂质肽保护质粒pDNA (plasmid DNA) 免受酸性降解的作用机制。本研究构建的大肠杆菌外囊泡融合型脂质肽RLSC/OMVC系统, 兼具耐酸性、高效基因递送及优良生物相容性, 为口服基因治疗提供创新策略。
