镍和钴会干扰光合共生海蛞蝓Berghia stephanieae(á. Valdés, 2005)的微生物群及其代谢功能

《Marine Environmental Research》:Nickel and Cobalt Disrupt the Microbiome and Metabolic Function of the Photosymbiotic Sea Slug Berghia stephanieae (á. Valdés, 2005)

【字体: 时间:2026年01月19日 来源:Marine Environmental Research 3.2

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  本研究通过毒性测试和微生物组分析,探讨了镍和钴对海洋腹足类Berghia stephanieae的微生物群落及代谢途径的影响。发现低浓度(1 mg/L)即可显著改变群落结构,中间浓度(3 mg/L)出现金属特异性代谢响应(如钴抑制硝化作用,镍增强硫氧化),高浓度(17 mg/L)导致功能冗余丧失。

  
科琳娜·西金格(Corinna Sickinger)、艾丽西亚·蒂尔(Alicia Thiel)、尤利娅·博恩霍斯特(Julia Bornhorst)、格雷戈尔·克里斯塔(Gregor Christa)、安杰利卡·普赖斯费尔德(Angelika Preisfeld)
德国伍珀塔尔大学动物学与生物学教学研究所,伍珀塔尔

摘要

电动出行的全球快速扩张增加了对镍和钴的需求,这两种元素是锂离子电池的关键组成部分。因此,采矿活动正在加剧,但它们对海洋生态系统的生态影响仍知之甚少。在这项研究中,我们探讨了镍和钴对海洋光合腹足类动物Berghia stephanieae的微生物组组成和细菌代谢途径的影响。初步的毒性测试显示,金属的吸收具有浓度依赖性,在高浓度(镍和钴约为18毫克/升)下,出现了行为压力反应,如迟钝、停止进食以及触角的脱落。在不同浓度(镍和钴分别为1毫克/升、3毫克/升和17毫克/升)下的微生物组分析显示,群落组成和功能发生了显著变化。在1毫克/升的浓度下,观察到的效应是浓度依赖性的,而非特定于金属的,表现为α多样性的下降以及Mycoplasma属细菌的减少和PseudofulvibacterEndozoicomonas属细菌的增加。在3毫克/升的浓度下,Shewanella属细菌的数量增加,并出现了特定于金属的效应,钴会强烈抑制反硝化作用和木质素降解代谢途径,而镍则会促进硫氧化代谢途径。在17毫克/升的浓度下,许多代谢途径受到抑制,这与宿主所受的压力相符,表明可能存在功能冗余性的丧失。总体而言,镍和钴的暴露导致了明显的微生物组变化,其中中等浓度下的影响最为显著。

引言

近年来,人们开始从依赖化石燃料转向可持续能源,包括可再生能源和电动出行。钴和镍因作为锂离子电池的关键组成部分而从电动汽车革命中受益匪浅[1]。开阔海域中的镍浓度通常在0.2–0.7微克/升之间[2, 3]。然而,在受采矿影响的地区,镍浓度显著升高。据报道,澳大利亚、加拿大、古巴、俄罗斯和南非等地区的镍污染严重,浓度范围达到100至2000微克/升[4]。最严重的镍污染发生在加拿大安大略省的萨德伯里(Sudbury),这是一个主要的镍矿区,污染已蔓延到陆地和水生环境[5, 6]。该地区也是全球钴污染最严重的地区之一,地表水中的钴浓度高达2028微克/升[7]。在美国,采矿区附近的地表水中钴浓度在0.1–1000微克/升之间[8],远高于自然海水中的0.002–0.02微克/升水平[2, 9]。
尽管这些数值令人担忧,但在受采矿影响的海洋生态系统中确定镍和钴的确切浓度仍然困难,特别是在印度尼西亚和新喀里多尼亚等国家,这些地方的采矿活动正在迅速扩张,且采矿场通常位于河流或海岸线附近。在新喀里多尼亚,沿海地区的沉积物样本显示出极高的镍富集度(高达7700毫克/千克[10, 11, 12]),但相关的海水测量数据却非常缺乏。同样,对于目前全球镍和钴主要生产国之一的印度尼西亚,关于金属浓度及其生态后果的详细和一致的数据也非常有限[13]。
迄今为止,大多数关于镍和钴影响的研究主要集中在温带海洋生物的经典毒性终点上。相比之下,亚致死效应(如生理功能的紊乱或宿主相关微生物群落的改变)却很少受到关注[14, 15, 16]。然而,微生物组分析是一种强大的工具,可以精确评估这些隐藏的效应,因为它们提供了环境污染物如何影响共生关系、发育过程和宿主适应能力的见解[17, 18]。与海洋无脊椎动物相关的微生物群落可以通过分类组成的变化或转座子介导的遗传可塑性来适应化学压力[19]。此外,宿主相关的微生物组通常含有能够降解复杂化合物(如碳氢化合物甚至金属)的细菌[20, 21, 22, 23]。这种功能可塑性对宿主非常有益,可以增强其应对环境压力的能力,并支持在金属暴露下的解毒过程。
像镍或钴这样的金属常常在宿主组织中积累,干扰离子运输,破坏代谢和发育过程,并引发氧化应激[24, 25, 26, 27, 28]。虽然钴是一种必需的微量元素,也是维生素B12的组成部分,但其生物学作用有限,正常细胞功能只需要极少量的钴[29]。过量的钴会触发活性氧(ROS)的产生,尤其是在溶酶体内,导致DNA氧化损伤和线粒体介导的细胞凋亡[30]。同样,镍暴露也被证明会引发氧化应激,损害DNA、蛋白质和脂质等关键生物分子。一种可能的机制是镍可能替代金属蛋白中的必需金属,或通过别构抑制干扰酶的活性,无论是直接结合到催化残基上还是在其活性位点之外。这些干扰会破坏细胞稳态,最终损害生物体的健康[31]。例如,从康涅狄格州海岸收集的Botryllus schlosseri个体含有高浓度的镍(高达9毫克/升)和钴(高达1毫克/升),远高于周围海水的浓度。在B. schlosseri中,镍与几种未鉴定的代谢物以及Pirellulales目细菌呈负相关,表明这些化合物和微生物对高浓度镍敏感。钴与已知代谢物(如thalassospiramide D和talaroconvolutin D)呈强负相关,表明可能存在螯合相互作用,可能影响钴的可用性和代谢过程[32]。另一方面,当Acropora muricata硬珊瑚暴露于45、90、470、900和9050微克/升的镍浓度时,其微生物组组成没有变化,尽管在470微克/升的浓度下已经观察到白化现象[33]。
在这项研究中,我们首次对镍和钴进行了初步毒性测试,研究了金属的生物可利用性,以及镍和钴对光合海蛞蝓Berghia stephanieae(á. Valdés, 2005)微生物组的影响。B. stephanieae属于Cladobranchia腹足类,专门以海葵Exaiptasia diaphana(Rapp, 1829)为食。B. stephanieae与其食物来源中的Symbiodiniaceae家族单细胞藻类具有不稳定的光合作用共生关系。这些单细胞藻类被纳入蛞蝓的消化腺系统中,并在几天内保持光合作用活性后被排出[34]。B. stephanieae是一种常用的软体动物模型生物,其基因组[35]、转录组[36]和微生物组[37]已得到广泛研究。这项研究首次全面探讨了镍和钴暴露如何影响海洋腹足类的微生物群落结构和细菌代谢途径。虽然之前关于海洋无脊椎动物金属压力的研究主要集中在珊瑚和海绵上,但我们的方法结合了分类学分析和功能途径分析,提供了前所未有的见解,揭示了镍和钴如何重塑微生物组及其在Berghia stephanieae中的潜在代谢作用。我们假设镍和钴的暴露通过改变群落组成和微生物代谢功能来破坏B. stephanieae的微生物组。这种干扰预计是浓度依赖性的,并可能对营养循环过程产生下游影响。

Berghia stephanieae培养

2023年1月,我们从德国的本地供应商Seepferdchen24 Meeresaquaristik GmbH获取了B. stephanieae的成体个体。繁殖对分别放置在直径75毫米的塑料容器中(含有35毫升人工海水ASW),温度为21摄氏度,光照/黑暗周期为12小时(光照强度约为30微摩尔光子每平方米每秒,使用Daylight Sunrise 520光源,Sera品牌)。ASW(盐度33 PSU,pH值8.0)每周更换三次。动物被提供Exaiptasia diaphana的小息肉(直径7毫米)

B. stephanieae对钴和镍的致死反应

在96小时的初步毒性测试范围内(钴:3毫克/升至32毫克/升;镍:3毫克/升至37毫克/升),对照组的所有蛞蝓都保持健康状态,在96小时内观察到进食和移动行为。在镍和钴浓度约为18毫克/升时,出现了迟钝行为(停止进食、不动、触角脱落)。
由于从死亡蛞蝓中提取的蛋白质浓度太低,因此需要根据样本中的蛋白质含量进行归一化处理

讨论

在初步毒性测试中,我们研究了镍和钴暴露对B. stephanieae的影响。随着浓度的升高,金属的吸收量增加,在相对较高的浓度(镍和钴约为18毫克/升)下首次观察到明显的迟钝行为(移动减少、停止进食、触角脱落)。在刺胞动物中,光合生物在调节内部金属浓度方面起着核心作用。

结论

这项研究是探讨镍和钴如何影响海洋腹足类B. stephanieae的微生物组和微生物代谢途径的第一步。我们的结果表明,即使在采矿影响严重的沿海地区也报告的低浓度(1毫克/升)就足以引发细菌多样性和群落结构的显著变化。这些早期变化主要是由浓度驱动的,而非特定于金属的。在中等浓度(3毫克/升)下,

CRediT作者贡献声明

科琳娜·西金格(Corinna Sickinger):撰写——审稿与编辑、初稿撰写、项目管理、数据管理、概念构思。艾丽西亚·蒂尔(Alicia Thiel):撰写——审稿与编辑、方法学研究、数据管理。尤利娅·博恩霍斯特(Julia Bornhorst):撰写——审稿与编辑、方法学研究、资金获取。格雷戈尔·克里斯塔(Gregor Christa):撰写——审稿与编辑、初稿撰写、监督。安杰利卡·普赖斯费尔德(Angelika Preisfeld):撰写——审稿与编辑、监督

利益冲突

作者声明,本研究未涉及任何可能被视为潜在利益冲突的商业或财务关系。

数据可用性

数据已存入NCBI BioProject数据库,链接为PRJNA1298235,SRA访问号码见附加文件2:表1。

资助

这项工作得到了“基于金属的化合物(MeBaCo)”计划的支持,该计划由伍珀塔尔大学和数学与自然科学学院资助。此外,这项工作还得到了DFG研究基础设施NGS_CC(项目编号407495230)的支持,属于下一代测序能力网络(项目编号423957469)的一部分。NGS分析在基尔基因组分析中心进行。

利益冲突声明

? 作者声明他们没有已知的财务利益冲突或个人关系可能影响本文所述的工作。
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