《Applied and Environmental Microbiology》：Listeria sanitizer tolerance at use-level concentrations shows limited association with genetic loci
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本研究系统评估了501株农产品相关李斯特菌对三种常用消毒剂（苯扎氯铵BC、过氧乙酸PAA、次氯酸钠NaOCl）的耐受性，结合全基因组测序分析，发现已知耐药基因（如bcrABC、mdrL、sugE1/2）与使用浓度下的消毒剂敏感性无显著关联。研究首次通过全基因组关联分析（GWAS）揭示核心基因单核苷酸多态性（SNP）可能影响消毒剂耐受表型，为食品加工环境中李斯特菌控制策略提供了关键分子证据。
李斯特菌消毒剂耐受性研究背景
即食食品（如新鲜农产品）的李斯特菌污染控制是食品安全领域的重要课题。食品加工环境中李斯特菌的长期存留（数月甚至数年）可能增加产品污染风险。消毒是控制李斯特菌的关键措施，但实际应用中消毒剂浓度可能因有机残留或设备结构问题被稀释，导致菌群反复暴露于低浓度消毒剂环境，可能诱导耐药基因（如bcrABC、qacH）或突变积累。
消毒剂耐受性表型分析
研究对501株农产品来源李斯特菌（包括328株单核细胞增生李斯特菌LM和173株其他李斯特菌LS）进行表型测试，发现：
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BC（300 ppm）处理30秒后，菌群对数减少值范围为2.76–5.73 log，变异度最低（方差0.51）；
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PAA（80 ppm）处理后的对数减少值范围最大（0.15–6.16 log），且LS对PAA的耐受性显著高于LM（P<0.001）；
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NaOCl（500 ppm）处理后对数减少值为1.34–7.02 log，变异度介于BC和PAA之间。
聚类分析识别出5株LM对三种消毒剂均表现低敏感性，且分属不同谱系（I、II、III），表明耐受性为非克隆扩散。
耐药基因分布与功能关联
全基因组分析显示：
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BC耐药基因bcrABC在LM中携带率（18.3%）显著高于LS（5.8%），且更常见于采后环境分离株；
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mdrL和sugE1/2广泛存在于LM和部分LS中，但与BC耐受性无显著关联；
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氧化应激相关基因岛SSI-2在L. innocua中携带率高达96.6%，但其存在与PAA/NaOCl耐受性无统计学关联。
质粒分析表明，采后环境分离株的质粒携带率显著高于采前株（P<0.01），提示环境压力可能促进可移动遗传元件传播。
全基因组关联分析揭示SNP作用
GWAS在核心基因中发现多个SNP与消毒剂耐受性相关：
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BC耐受性与yedJ等10个基因的22个SNP相关；
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PAA耐受性关联SNP分布于mngB等61个基因，其中mngB在多亚群中重复出现；
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NaOCl耐受性关联SNP集中于cycA、ptsI等21个基因。
这些SNP所在基因多参与膜转运或应激响应，提示耐受性可能由多基因微效作用叠加导致。
研究结论与应用价值
本研究证实李斯特菌对使用浓度消毒剂的耐受性：
- 1.
主要受多基因协同调控，而非单一已知耐药基因主导；
- 2.
PAA处理后的高变异度提示需关注其诱导菌群进入可培养但非可活状态（VBNC）的风险；
- 3.
GWAS筛选的SNP为开发耐受性预测标记提供新方向。
成果强调在消毒剂效能评估中，除平均对数减少值外需重点考虑变异度，并为食品加工环境中的李斯特菌防控策略提供理论依据。
