《HUMAN MUTATION》：Proprotein Convertase Subtilisin/Kexin Type 9 Induces Platelet-Derived Transforming Growth Factor-β to Promote Myocardial Fibrosis After Myocardial Infarction
编辑推荐：
本文揭示了前蛋白转化酶枯草溶菌素9（PCSK9）在心肌梗死（MI）后通过激活血小板、促进转化生长因子-β（TGF-β）分泌，进而驱动心肌纤维化的新机制。研究通过动物模型和细胞共培养实验证实，抑制PCSK9可显著改善心脏功能并减轻纤维化，为靶向PCSK9治疗心肌修复提供了理论依据。
引言
心肌梗死（MI）后心脏修复过程中，心肌纤维化是影响心功能预后的关键因素。前蛋白转化酶枯草溶菌素9（PCSK9）作为调节脂代谢的关键分子，近期研究提示其可能通过非脂质途径参与心肌修复。本文旨在探讨PCSK9是否通过调控血小板活化及其衍生的TGF-β，介导MI后心肌纤维化的进程。
材料与方法
研究使用野生型（WT）和PCSK9基因敲除（KO）的C57BL/6J小鼠，通过左冠状动脉前降支结扎建立MI模型。术后6周，通过超声心动图评估心功能，Masson染色观察纤维化程度，免疫荧光和Western blot检测纤维化标志物表达。通过转录组测序分析差异基因，并利用血小板-成纤维细胞共培养体系验证PCSK9对TGF-β分泌及成纤维细胞表型转化的影响。
结果
3.1 PCSK9在MI后表达升高并促进心肌纤维化
MI后小鼠心脏功能显著下降，左心室射血分数（LVEF）、左心室短轴缩短率（LVFS）和E/A比值均降低（图1a-d）。血浆脑钠肽（BNP）和PCSK9水平在MI组显著升高（图1g,h）。Masson染色显示MI组心肌纤维化面积增加（图1e,f），免疫荧光显示α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达上调（图1i,j）。Western blot和qPCR证实PCSK9、TGF-β和α-SMA在MI心肌组织中表达增加（图1k-q）。
3.2 PCSK9敲除改善MI后心功能并抑制纤维化
PCSK9-KO MI组小鼠的LVEF、LVFS和E/A比值均优于WT MI组（图2a-d）。Masson染色显示KO组纤维化程度减轻（图2e,f），α-SMA和TGF-β表达下调（图2g-m）。提示PCSK9缺失可通过抑制纤维化改善心功能。
3.3 转录组分析揭示PCSK9调控免疫与黏附通路
差异表达基因分析发现，PCSK9-KO MI组中41个基因下调、33个基因上调（图3a）。GO和KEGG富集分析显示，PCSK9缺失影响血小板活化、细胞外基质（ECM）受体相互作用等通路（图3c,d）。蛋白互作网络提示整合素α2b（Itga2b）可能是PCSK9调控血小板活化的关键节点（图3e）。
3.4 PCSK9通过血小板源性TGF-β促进成纤维细胞活化
体外实验显示，PCSK9处理可增强血小板活化标志物Itga2b表达（图4j），并促进血小板聚集（图4f-i）。在血小板-成纤维细胞共培养体系中，PCSK9通过诱导血小板释放TGF-β，促进成纤维细胞向肌成纤维细胞转化，表现为α-SMA表达上调、细胞增殖和迁移能力增强（图5a-g）。qPCR显示纤维化相关基因（Col1a1、Fn1、Acta2）表达升高，而TGF-β中和抗体可逆转该效应（图5h-j）。
讨论
本研究首次提出PCSK9通过激活血小板、促进TGF-β分泌，驱动MI后心肌纤维化的新机制。Itga2b作为血小板活化的关键分子，可能是PCSK9作用的重要媒介。抑制PCSK9不仅改善脂代谢，还可能通过干预血小板-成纤维细胞交互作用减轻纤维化，为心肌修复提供了新靶点。
结论
PCSK9通过诱导血小板活化及TGF-β分泌，促进MI后心肌纤维化进程。靶向PCSK9可能成为改善心肌重构的潜在策略。
