《Environmental Science & Technology》:Tracing Environmental DNA Transport in a Large Lake with Synthetic DNA Microparticles and Hydrodynamic Modeling
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本研究通过开发可生物降解的合成DNA微粒(sDNAp)作为定量示踪剂,结合三维水动力模型(3D-hydrodynamic model)与拉格朗日粒子追踪(Lagrangian particle-tracking)技术,首次在卡尤加湖(Cayuga Lake)实现了对环境DNA(eDNA)传输过程的湖尺度精准示踪。研究证实sDNAp具有高灵敏度(检测限3–5 particles mL–1)和持久性(传输距离>7 km),揭示了风驱环流(wind-driven circulation)与分层作用(stratification)对eDNA传输路径的关键影响,为eDNA溯源(source attribution)提供了概率化分析框架。
合成DNA微粒的设计与表征
研究团队通过双乳液溶剂蒸发法将特定序列的单链DNA片段封装于聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)微粒中,制备出三种sDNAp示踪剂(TQ1、TQ2、TQ3)。扫描电镜(SEM)分析显示微粒直径范围为0.2–2.5 μm(均值0.72±0.37 μm),符合鱼类eDNA的粒径分布特征(图2A–C)。稳定性实验表明,sDNAp在湖水中释放初期(0.5 h内)快速释放65%的DNA,随后50小时内保持稳定(图2D),其缓慢沉降特性(斯托克斯速度≤10–7m s–1)使其成为模拟eDNA传输的理想保守示踪剂。
野外实验设计与实施
2022年11月4日,研究团队在卡尤加湖南部浅水区(水深<6 m)同步释放三种sDNAp(TQ1、TQ3各2 g,TQ2为1 g),并通过搭载潜水泵的船只进行33小时的空间采样(覆盖面积约11 km2)。采样采用深度积分法(图1C),共获取278个水样,通过TaqMan MGB qPCR技术定量检测sDNAp浓度。实验期间,持续南风(风速>10 m/s)驱动表层水北向流动,形成具有垂直剪切特性的环流结构(图4A–C)。
传输动力学与模型验证
野外检测结果显示,sDNAp最远传输距离达7.2 km(TQ2),最高浓度达1049 particles mL–1(图3)。三维水动力模型(Si3D)耦合粒子追踪模拟表明,sDNAp的水平位移受垂直位置敏感性的显著影响:粒子在零速度深度(zero-velocity depth)附近的垂直分布决定其沿湖岸方向的运动方向(图4D–F)。模型预测与实测数据的均方根距离(RMSD)在3.5 km范围内为198–432 m(图4J),验证了模型对水平平流(horizontal advection)和垂直混合(vertical mixing)的捕捉能力。
溯源概率分析的应用价值
通过反向粒子追踪模拟(backward particle-tracking),研究评估了从检测点反推sDNAp释放源的概率(图5)。结果显示,在200×200 m网格分辨率下,近距离采样点(如131、134)的溯源概率可达10–2量级,而远距离点概率显著降低(图5A)。进一步分析表明,限制溯源精度的关键因素包括粒子垂直扩散(vertical diffusivity)和湖流结构的时空异质性(图5K–N)。这一发现强调了对eDNA检测结果进行水动力校正的必要性。
研究意义与技术前瞻
本研究建立的sDNAp-模型耦合框架为eDNA在复杂水体中的传输机制提供了定量解析工具。通过调整PLGA降解参数(如分子量、单体比例),未来可定制具有物种特异性衰减速率的示踪剂,从而更精准地模拟自然eDNA的时空动态。该技术不仅适用于湖泊生态系统,还可拓展至河流、河口等水生环境,为生态监测、入侵物种管理和生物多样性保护提供理论支持。