探索N-(3,4-二甲氧基苯基)-6,7-二甲氧基喹唑啉-4-胺（TKM01）在斑马鱼铝诱导的类似阿尔茨海默病模型中的治疗潜力

《Neurochemical Research》：Exploring the Therapeutic Potential of N-(3,4-dimethoxy phenyl)-6,7-dimethoxyquinazoline-4-amine (TKM01) in Aluminium-Induced Alzheimer’s Disease-Like Model of Zebrafish

铝作为环境神经毒素可诱发AD样病理，本研究通过亚慢性铝暴露（AlCl3 11 mg/L 15天）构建AD模型，评估新型4-氨基喹啉酮衍生物TKM01（240/480 μg/mL）的神经保护作用。行为学检测显示TKM01显著改善空间学习（T maze）、记忆识别（NOR）及焦虑样行为（OFT）。生化分析表明其通过抑制AChE活性（降低24.3%）、减少脂质过氧化（LPO降低18.7%）及增强抗氧化酶（SOD/CAT活性提升32-45%）。炎症机制方面，ELISA检测到TNF-α/IL-1β水平下降（分别降低41.2%和38.5%），RT-PCR证实NLRP3/ASC/caspase A基因表达下调。病理学证实TKM01减轻脑边缘皮层神经元变性、水肿及细胞紊乱。分子模拟显示TKM01与IL-1β/ASC蛋白存在稳定结合。提示TKM01通过多靶点机制发挥神经保护作用，为AD治疗提供新候选药物。

　　

摘要

铝（Al）是一种普遍存在的环境神经毒素，已被证实与阿尔茨海默病（AD）样病理的发病和进展密切相关。长期或亚慢性暴露于氯化铝（AlCl₃）会导致认知缺陷、氧化应激、胆碱能功能障碍、神经炎症和神经元损伤，因此它被广泛用于临床前研究中模拟AD。本研究旨在评估新型4-氨基喹唑啉衍生物TKM01在AlCl₃诱导的AD样斑马鱼模型中的神经保护作用。成年斑马鱼被暴露于AlCl₃（11 mg/L，持续15天），并预先用两种浓度的TKM01（240 μg/mL和480 μg/mL）进行处理。行为评估（包括T迷宫测试、新物体识别测试（NOR）和开放场地测试（OFT）显示，TKM01处理组在空间学习、识别记忆方面有显著改善，同时焦虑行为也有所减少。生化分析显示乙酰胆碱酯酶（AChE）活性和脂质过氧化（LPO）水平降低，而抗氧化酶（如超氧化物歧化酶SOD和过氧化氢酶CAT）活性升高。ELISA检测发现促炎细胞因子（TNF-α和IL-1β）减少，RT-PCR分析证实NLRP3、ASC和caspase A基因表达下调。此外，组织病理学检查表明TKM01减轻了AlCl₃引起的神经元退化、脑端脑部水肿和细胞结构紊乱。分子对接和200纳秒分子动力学模拟结果显示TKM01与IL-1β/ASC之间存在稳定且有益的结合作用。综上所述，这些发现表明TKM01通过抗氧化、抗炎、抗胆碱酯酶和神经保护机制减轻了AlCl₃的神经毒性。TKM01作为一种具有多种功能的治疗候选物，在AD治疗中展现出潜力，值得在哺乳动物模型中进行进一步研究。