《MicrobiologyOpen》：Differentiating Damp-Heat and Cold-Damp Diarrhea in Rat Models via Gut Microbiota Dysbiosis and Short-Chain Fatty Acid Profiling
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本研究通过构建大鼠湿热泄泻与寒湿泄泻模型，结合肠道菌群16S rRNA测序和短链脂肪酸（SCFAs）气相色谱-质谱（GC–MS）分析，首次揭示两种证型在菌群结构（如毛螺菌科和马文氏菌丰度差异）、肠黏膜病理（线粒体肿胀vs紧密连接减少）及炎症因子（IL-6、TNF-α等）表达上的特异性差异，为中医证候的微生物标志物诊断提供实验依据。
引言
腹泻作为一种全球发病率达3%–20%的常见病症，其发病与肠道炎症反应、上皮屏障损伤及菌群失调密切相关。中医将腹泻分为湿热泄泻与寒湿泄泻等证型，但二者临床表征重叠，辨证施治存在挑战。本研究基于“方证相应”理论，通过建立大鼠湿热泄泻（DHS）与寒湿泄泻（CDS）模型，结合肠道菌群与SCFAs分析，旨在挖掘鉴别两种证型的潜在生物标志物。
材料与方法
将84只SD大鼠分为对照组（CON）、模型组（DHS、CDS）及中药干预组（PDH、LDH、PCD、LCD）。模型组通过高湿高温（34°C±2°C，湿度90%±5%）或高湿低温（4°C±2°C，湿度90%±5）环境联合番泻叶灌胃造模，干预组分别予白头翁汤（3.76 g/kg/d）或理中汤（4.375 g/kg/d）治疗。检测指标包括腹泻指数（DAI）、血清炎症因子（ELISA法）、结肠组织病理（H&E和AB-PAS染色）、超微结构（透射电镜）、紧密连接蛋白（Occludin、Claudin1/5）及SCFAs受体（GPR41/43/109A）表达（Western blot），并利用16S rRNA测序和GC–MS分析盲肠内容物菌群结构与SCFAs含量。
结果
- 1.
证候表征差异：DHS组大鼠肛温升高、黏膜充血，CDS组肛温降低、黏膜紫红。透射电镜显示DHS组线粒体肿胀，CDS组紧密连接减少。
- 2.
炎症与屏障损伤：两组模型血清IL-6、TNF-α、IL-1β均显著升高，IL-10降低（p<0.05），紧密连接蛋白表达下调。中药干预后，PDH组（白头翁汤治疗湿热）与LCD组（理中汤治疗寒湿）指标改善最显著。
- 3.
菌群与SCFAs谱特征：DHS组和丰度较低，治疗后上升；CDS组二者丰度较高，治疗后下降。Akkermansia在两组中均降低。SCFAs（如丁酸、异戊酸）含量在模型组显著减少，且与有益菌（如）呈正相关（p<0.01）。
- 4.
标志物潜力：黏膜颜色（红vs紫红）与菌群特征（如和丰度变化趋势）可作为鉴别湿热与寒湿泄泻的潜在指标。
讨论
本研究首次从微生物-代谢物轴揭示湿热与寒湿泄泻的生物学差异：湿热证以黏膜充血、线粒体损伤和特定菌群低丰度为特征，而寒湿证以紧密连接破坏和菌群动态反转为主。白头翁汤通过抗炎与菌群调节发挥作用，理中汤则侧重屏障修复与SCFAs受体（如GPR43）激活。局限在于黏膜颜色评估主观性强，未来需结合客观量化技术验证。
结论
肠道菌群失调模式在湿热与寒湿泄泻中存在证型特异性，和或可作为鉴别生物标志物，为中医辨证提供微生物学依据。
