《Annals of Hematology》：LncRNA PVT1 targets miR-143-3p to modulate endothelial cell function and thereby participate in deep vein thrombosis (DVT) of the lower limbs
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本研究针对下肢深静脉血栓（DVT）诊断标志物匮乏及内皮细胞损伤机制不清的问题，通过临床队列与细胞实验验证LncRNA PVT1/miR-143-3p轴在DVT中的调控作用。研究发现LncRNA PVT1可通过吸附miR-143-3p促进内皮细胞凋亡和炎症因子释放，首次揭示其作为DVT新型诊断标志物（AUC=0.8789）及治疗靶点的潜力，为DVT的早期干预提供新策略。
深静脉血栓形成（DVT）是全球范围内具有高致死率的血管疾病，其发病机制涉及血管内皮损伤、凝血功能异常和炎症反应等多重因素。当前临床诊断主要依赖D-二聚体检测和超声检查，但存在假阳性率高、对早期血栓不敏感等局限。与此同时，传统抗凝治疗方案易引发出血风险，且对已形成的陈旧性血栓效果欠佳。这种诊断与治疗的双重困境，促使科研人员不断探索新的分子标志物和治疗靶点。
近年来，长链非编码RNA（lncRNA）作为基因表达的关键调控因子，在心血管疾病领域展现出巨大研究价值。其中，浆细胞瘤变体易位基因1（LncRNA PVT1）已被证实参与炎症反应和细胞凋亡调控，但其在DVT发生发展中的具体作用尚不明确。发表在《Annals of Hematology》的这项研究，首次系统揭示了LncRNA PVT1通过竞争性结合miR-143-3p调控内皮细胞功能，进而参与DVT发病的分子机制。
为全面解析LncRNA PVT1在DVT中的作用，研究团队整合了临床队列分析与实验验证。他们纳入了384例受试者（208例DVT患者和176例健康对照），采集静脉血样本检测LncRNA PVT1表达水平，并通过多普勒超声或静脉造影确认血栓位置和严重程度。在细胞层面，研究人员使用250 μM钴氯化物（CoCl2）诱导人脐静脉内皮细胞（HUVECs）建立损伤模型，通过小干扰RNA（siRNA）技术敲低LncRNA PVT1表达，观察其对细胞功能的影响。
研究采用的关键技术方法包括：RT-qPCR检测基因表达、CCK-8法和流式细胞术评估细胞活力与凋亡、ELISA法测定血管生成因子（VEGF、FGF-2）和炎症因子（TNF-α、IL-6）水平、双荧光素酶报告基因实验验证LncRNA PVT1与miR-143-3p的靶向关系，以及生物信息学分析预测下游信号通路。
临床基线数据与LncRNA PVT1诊断价值
DVT患者组显示更高的体重指数（BMI）、D-二聚体、纤维蛋白原、C反应蛋白（CRP）等指标。LncRNA PVT1在DVT患者血清中显著上调（P<0.0001），且与D-二聚体（r=0.6406）和CRP（r=0.6139）呈正相关。Logistic回归分析表明LncRNA PVT1升高是DVT的独立危险因素（P=0.002），ROC曲线显示其诊断AUC达0.8789（灵敏度81.73%，特异度80.11%）。
LncRNA PVT1对内皮细胞功能的影响
CoCl2诱导后，内皮细胞中LncRNA PVT1表达升高，细胞活力下降，凋亡增加。而si-PVT1转染可逆转CoCl2的损伤效应，增强细胞活力，抑制凋亡相关基因（Bax、Caspase3）表达，促进抗凋亡基因Bcl-2表达。同时，si-PVT1还显著降低血管生成因子（VEGF、FGF-2）和炎症因子（TNF-α、IL-6）水平。
miR-143-3p作为下游靶点的验证
生物信息学预测和双荧光素酶报告实验证实LncRNA PVT1可直接结合miR-143-3p。DVT患者血清中miR-143-3p表达显著下调，且与LncRNA PVT1水平负相关（r=-0.6623）。功能回复实验表明，miR-143-3p抑制剂可抵消si-PVT1对内皮细胞保护和抗炎作用，证实miR-143-3p是LncRNA PVT1的关键下游效应分子。
下游信号通路预测
对miR-143-3p潜在靶基因的富集分析显示，其可能通过钙信号通路、细胞衰老和MAPK信号通路参与DVT调控。在DVT患者中，KRAS、TET2、DNMT3A等基因表达显著上调，提示这些基因可能是LncRNA PVT1/miR-143-3p轴的下游执行者。
本研究通过临床与基础实验相结合的策略，系统阐明了LncRNA PVT1/miR-143-3p轴在DVT中的调控网络。研究不仅发现LncRNA PVT1可作为DVT的新型诊断标志物，还揭示其通过调控内皮细胞功能影响血栓形成的新机制。这些发现为DVT的早期诊断提供了新的分子靶点，也为开发以lncRNA为靶点的抗血栓治疗策略奠定了理论基础。未来研究可进一步探索LncRNA PVT1在动物模型中的治疗潜力，以及其与现有抗凝药物的协同作用，推动DVT精准医疗的发展。
