SOCS1缺失通过CCL5趋化因子轴驱动CD8+T细胞炎症极化与单核巨噬细胞募集进而加剧肠道aGVHD的机制研究

《Advanced Science》：Loss of SOCS1 in Donor T Cells Exacerbates Intestinal GVHD by Driving a Chemokine-Dependent Pro-Inflammatory Immune Microenvironment

本综述系统阐释了SOCS1在急性移植物抗宿主病（aGVHD）中的核心调控作用。研究通过T细胞特异性Socs1基因敲除（cKO）模型，结合多组学分析，揭示SOCS1缺失可自主驱动CD8+T细胞前炎性分化，并通过STAT1/2依赖性转录程序上调CCL5等趋化因子，进而招募单核细胞并极化M1样巨噬细胞，最终导致肠道免疫微环境紊乱及组织损伤。重要的是，JAK1/2抑制剂鲁索替尼（Ruxolitinib）可逆转上述病理效应，临床数据也显示供者CD8+T细胞中SOCS1高表达与aGVHD低发生率相关，提示SOCS1可作为aGVHD个性化防治的潜在生物标志物与治疗靶点。

　　

2.1 T细胞特异性Socs1敲除导致T细胞炎症分化

为探究T细胞特异性SOCS1缺失对免疫谱系的影响，研究对野生型（WT）与条件性敲除（cKO）小鼠CD45⁺脾细胞进行单细胞RNA测序。结果显示，cKO组CD4⁺T细胞比例显著降低，而单核来源巨噬细胞（MDM）与NKT细胞扩增。进一步亚群分析发现，cKO小鼠CD8⁺T细胞中初始T细胞（Tn）减少，中央记忆（Tcm）与效应（Teff）亚群增加，且穿孔素、颗粒酶B（GZMB）、TNF-α、IFN-γ、IL-2及CD107a表达升高，表明其细胞毒性增强。CD4⁺T细胞亦呈现类似炎症偏倚，且Treg中异常共表达T-bet与Stat1，形成“Th1样Treg”。NKT细胞则偏向促炎性iNKT1亚群，高表达Gzma、Gzmb、Ccl5等基因。scTCRseq分析显示cKO组CD8⁺Teff中克隆扩增显著，提示SOCS1缺失特异性增强效应T细胞增殖。

2.2 STAT1/2复合体驱动Socs1缺陷CD8⁺T细胞中Ccl5、Ccr5与Cxcr3的激活

通过RNA-seq、ATAC-seq及CUT&Tag多组学整合分析，发现Socs1缺陷CD8⁺T细胞中Ccl5、Ccr5、Cxcr3等趋化因子相关基因的染色质可及性显著增加，尤其在其上游增强子区域（Peak 1/2）。CUT&Tag进一步证实STAT1/2异源二聚体结合于Peak 1，且cKO细胞中pSTAT1与STAT2占据增强。公共数据集验证Stat1/2敲除可降低Ccl5位点可及性。基因调控网络分析将STAT1/2复合体认定为Ccl5最強正调因子，流式细胞术亦证实cKO细胞pSTAT1(Ser727)水平升高。此外，Ccr5与Cxcr3启动子区开放性亦增加。综上，SOCS1缺失通过解除对STAT1/2的抑制，上调Ccl5等趋化因子，进而促进CD8⁺T细胞迁移与炎症微环境形成。

2.3 Socs1缺陷CD8⁺T细胞驱动单核细胞向M1巨噬细胞极化

RNA速度分析显示cKO小鼠脾脏MDM沿单核样细胞向MHC^hi巨噬细胞轨迹分化，末端富集M1相关标志（H2-Aa、H2-Ab1、Cd80等）。cKO单核样细胞干扰素刺激基因（ISG）及MHC分子表达上调，而抗炎基因（Chil3、Tgfb1）下调。流式验证cKO小鼠F4/80^lowCD11b^hi巨噬细胞扩增，且iNOS⁺M1表型比例升高。细胞互作分析提示cKO组CD8⁺T细胞通过CCL5-CCR1轴招募单核细胞。Transwell实验证实cKO CD8⁺T细胞对单核细胞趋化作用增强，且可被CCL5中和抗体阻断。共培养实验中，cKO CD8⁺T细胞诱导BMDM高表达CD80、CD86、MHC II等M1标志。临床数据同步显示aGVHD患者单核细胞CCR1表达升高，且M1基因特征富集。

2.4 Socs1缺陷T细胞浸润并重塑肠道免疫微环境加剧aGVHD严重度

在异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）诱导的aGVHD模型中，输注Socs1缺陷T细胞的小鼠死亡率显著升高且呈剂量依赖性，伴随更严重的临床评分与体重下降。流式检测发现cKO受体外周血与肠道上皮内淋巴细胞（IEL）、固有层（LP）中CD8⁺T细胞浸润增加，且表达更高水平TNF-α、IFN-γ等效应分子。scRNA-seq进一步揭示肠道浸润T细胞终末耗竭亚群（Terminal Tex）比例下降，而Itgae⁺Tox⁺组织驻留样耗竭T细胞扩增，后者在cKO组尤为显著。同时，cKO受体肠道髓系细胞中M1表型比例持续偏高，M2转换受阻。空间转录组显示cKO小鼠肠道隐窝区域增殖相关基因（Mki67、Top2a等）下调，炎症标志（Gzma、Gzmb）与组织驻留标记（Itgae）富集，提示隐窝修复受损且炎症持续。

2.5 Socs1缺陷T细胞维持隐窝局部炎症并加剧肠道损伤

Visium HD空间转录组证实cKO受体肠道隐窝结构破坏严重，隐窝深度与面积减小。隐窝区域内CD8⁺T细胞、单核细胞与M1巨噬细胞形成密集互作网络，而WT组则见M2巨噬细胞富集。M1相关基因（Nfkb1、Rela、Fcgr1）在cKO隐窝高表达，M2标志（Tgfb1、Fabp4）下调，表明局部微环境极化为促炎状态。

2.6 CCL5中和抗体、鲁索替尼与马拉维罗均缓解Socs1缺陷模型的肠道aGVHD

为靶向CCL5轴，研究在aGVHD模型中使用CCL5中和抗体、CCR5拮抗剂马拉维罗（Maraviroc）及JAK1/2抑制剂鲁索替尼进行干预。CCL5抗体治疗可延长生存期，并显著保护肠道隐窝结构，减少巨噬细胞浸润。鲁索替尼单药效果最为显著，可长期存活超过66%小鼠，且临床评分与体重恢复稳定，其机制同时抑制CD8⁺T细胞浸润与M1极化。马拉维罗仅部分有效，与鲁索替尼联用未显协同效应。在移植物抗白血病（GVL）模型中，鲁索替尼虽部分削弱GVL活性，但通过控制aGVHD显著延长总生存期。

2.7 CD8⁺T细胞中高SOCS1表达与allo-HSCT后aGVHD低发生率相关

临床数据分析显示，G-CSF动员后移植物CD8⁺T细胞SOCS1表达升高，但aGVHD患者移植后SOCS1水平下降，且与JAK/STAT及趋化因子信号激活负相关。低SOCS1表达组CCL5、CCR5、CXCR3等基因上调，单核细胞中M1特征富集，提示SOCS1可作为aGVHD风险预测生物标志物。

3 讨论

本研究系统阐明SOCS1在aGVHD中通过负调控JAK/STAT-趋化因子轴维护肠道免疫稳态的核心作用。SOCS1缺失导致CD8⁺T细胞自主活化、趋化因子介导的髓系细胞募集与M1极化，以及隐窝修复障碍。鲁索替尼等靶向干预策略有效逆转病理进程，为aGVHD防治提供新思路。SOCS1表达水平与aGVHD发生风险负相关，凸显其临床预测价值。