《Virologica Sinica》：Systematic evaluation of HSV-1 Δ34.5Δ47 as a dual-function platform for attenuated HSV-1 vaccine and heterologous antigen delivery
编辑推荐：
本研究针对目前尚无获批疫苗的HSV-1感染问题，系统评估了基于ICP34.5和ICP47双基因缺失构建的减毒HSV-1 Δ34.5Δ47平台。研究证实该平台不仅可作为安全有效的HSV-1减毒疫苗，激发强大的体液和细胞免疫反应，提供完全保护，还能作为病毒载体高效表达SARS-CoV-2核衣壳蛋白，诱导特异性免疫应答，为开发抗HSV-1及异源病原体的多价疫苗提供了新策略。
疱疹病毒，这个潜伏在神经节中的“隐形杀手”，困扰着全球数十亿人。其中，1型单纯疱疹病毒（HSV-1）不仅是口腔疱疹、角膜炎的元凶，更是导致疱疹性脑炎、新生儿疱疹等严重疾病的病原体。尽管抗病毒药物可以缓解症状，却无法根除潜伏的病毒，这使得开发有效的预防性疫苗成为当务之急。然而，数十年的努力尚未催生出一款获批上市的HSV-1疫苗，凸显了这一领域的巨大挑战和迫切需求。
近期，发表在《Virologica Sinica》上的一项研究为这一难题带来了新的希望。来自中山大学的研究团队系统评估了一种基于HSV-1 Δ34.5Δ47的双功能疫苗平台，它不仅展现出作为HSV-1减毒疫苗的巨大潜力，还能作为载体递送异源抗原，为多价疫苗的开发打开了新的大门。
研究人员采用了多种关键技术方法开展研究。他们利用细菌人工染色体-半乳糖激酶同源重组技术构建了HSV-1 Δ34.5和ICP47双基因缺失的减毒病毒株。通过体外病毒增殖曲线测定评估病毒复制能力，使用小鼠模型系统评价疫苗的免疫原性、保护效力及安全性。通过蛋白质印迹法验证异源抗原表达，利用酶联免疫斑点试验和酶联免疫吸附试验检测特异性免疫反应，并采用被动血清转移和体内T细胞清除实验探究保护性免疫机制。此外，还通过定量聚合酶链反应和组织病理学分析评估病毒载量和安全性。
HSV-1减毒疫苗的构建与体内外评价
研究团队首先成功构建了HSV-1 Δ34.5Δ47减毒株。病毒生长曲线显示，与野生型HSV-1 17株相比，减毒株在体外的复制能力显著减弱。更重要的是，该疫苗在小鼠体内诱导了强烈的病毒特异性体液和细胞免疫应答。通过角膜和生殖道两种感染途径的攻毒实验证实，疫苗接种提供了完全的保护，所有免疫小鼠均存活，且体重稳定，而未免疫的对照组全部死亡。
HSV-1作为抗原递送载体同时保持其减毒疫苗特性
为了验证该平台作为疫苗载体的潜力，研究人员构建了表达SARS-CoV-2核衣壳蛋白的重组病毒HSV-1 Δ34.5Δ47-N。实验证明，该重组病毒不仅能有效表达N蛋白，还能诱导强烈的N特异性抗体和T细胞反应。重要的是，插入外源基因并未影响疫苗对HSV-1的攻击保护效果，所有免疫小鼠在致死剂量的HSV-1攻击下均得到完全保护。
HSV-1 Δ34.5Δ47和HSV-1 Δ34.5Δ47-N的初步安全性评价
安全性是减毒疫苗的关键指标。研究发现，与亲本野生型病毒相比，免疫小鼠脑组织中检测不到病毒mRNA，且无病理损伤迹象，表明双基因缺失显著降低了病毒的神经毒性，具有良好的安全性。
针对HSV-1感染的保护作用依赖于体液免疫应答
机制研究表明，疫苗的保护作用主要依赖于体液免疫。被动血清转移实验显示，免疫小鼠的血清能显著提高受体小鼠的存活率。而T细胞清除实验进一步证实，即使在没有T细胞的情况下，疫苗仍能提供完全保护，突出了抗体介导的免疫应答在保护中的主导作用。
这项研究的意义重大。它不仅展示了一种具有良好安全性和免疫原性的HSV-1减毒疫苗候选株，还验证了其作为病毒载体平台的巨大潜力。这种双功能设计为开发针对HSV-1及其他病原体的多价疫苗提供了新思路，特别是其良好的安全记录（基于已获批的溶瘤病毒T-VEC）为后续临床转化奠定了坚实基础。随着进一步研究的深入，这种创新平台有望为应对HSV-1这一全球性健康挑战提供新的解决方案，并在未来疫苗开发中发挥重要作用。
