西普罗福（Ciprofol）通过促进SIRT1介导的信号通路来调节ERK1/2的过度磷酸化

《Neurochemical Research》：Ciprofol Promotes SIRT1-Mediated Raf Regulation of ERK1/2 Hyperphosphorylation

Ciprofol通过上调SIRT1表达激活去乙酰化酶活性，抑制MAPK/ERK通路中Raf表达和ERK磷酸化，降低海马体兴奋性突触电流及谷氨酸水平，从而减轻颞叶癫痫发作。

　　

摘要

癫痫（EP）的特点是大脑中神经元突然异常放电。其复杂的病理机制限制了有效的治疗策略。近年来，作为一种新型的2,6-二取代酚衍生物，环丙沙星（Ciprofol）因其独特的分子结构和多样的生物功能而受到了广泛关注。本研究旨在探讨环丙沙星抗颞叶癫痫（TLE）的作用机制：具体而言，环丙沙星上调SIRT1（一种NAD⁺依赖的脱乙酰酶）的表达，从而触发其脱乙酰酶活性，进而下调Raf（MAPK/ERK通路的上游因子），并进一步调节MAPK/ERK信号通路中的ERK磷酸化。行为分析表明，环丙沙星显著减轻了由海人酸（KA）和戊四唑（PTZ）诱导的急性TLE小鼠模型中的癫痫发作严重程度。进一步的分子生物学实验，通过电生理记录、Western blotting、代谢组学、转录组测序和qPCR等技术发现，环丙沙星降低了海马区诱发的兴奋性突触后电流（EPSCs）的幅度，并显著下调了突触后NMDA2B和NMDA2A受体蛋白的表达水平；转录组测序显示MAPK/ERK通路相关基因显著富集；LC-MS（代谢组学）结果显示GABA释放量保持不变，而谷氨酸（Glu）水平显著降低。LC-MS测量表明，环丙沙星处理后GABA释放量未发生变化，但谷氨酸（Glu）水平显著下降。此外，气泡图分析表明MAPK/ERK信号通路在环丙沙星的抗癫痫作用中起重要作用。进一步的药理学干预证实了MAPK/ERK信号通路的关键作用。给予ERK1/2抑制剂Ulixertinib以及使用ERK1/2特异性敲除小鼠的实验显著增强了环丙沙星的抗癫痫效果。相反，使用广谱ERK1/2激活剂Okadaic Acid处理则显著减弱了这些效果。这些结果进一步验证了ERK1/2在介导环丙沙星抗颞叶癫痫作用中的关键作用。此外，本研究还发现SIRT1通过其脱乙酰酶活性调节上游因子Raf的表达，从而影响MAPK/ERK通路中ERK1/2的磷酸化状态。因此，本研究首次阐明环丙沙星通过上调SIRT1来介导Raf的脱乙酰化并抑制MAPK/ERK通路中的ERK1/2过度磷酸化，从而发挥抗TLE作用——直接将环丙沙星、SIRT1和抗癫痫作用联系起来。环丙沙星通过SIRT1调节Raf的表达，进而抑制MAPK/ERK通路中ERK1/2的过度磷酸化，从而减少神经元兴奋性突触后电流（eEPSCs）和兴奋性神经递质的释放。