丝状蓝细菌水华(由伪鱼腥藻和柱孢藻引起)会导致参与氮循环和磷循环的功能基因发生简化

《Journal of Environmental Sciences》:Filamentous cyanobacterial blooms ( Pseudanabaena and Cylindrospermopsis) result in the simplification of functional genes involved in nitrogen and phosphorus cycles

【字体: 时间:2026年01月28日 来源:Journal of Environmental Sciences 6.3

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  有害藻华影响氮磷循环微生物机制研究。通过 Yuqiao 湖水华期与非水华期 metagenomic 分析,发现水华期氮磷循环基因丰度显著差异:水华期氨同化基因(gltB/D)和磷酸盐吸收相关基因(pstA/B/C、ppk1/phoU)上调,支持藻类快速增殖;非水华期则增强硝酸盐同化、反硝化及固氮基因表达,同时有机磷矿化基因主导。微生物群落重组从藻驱动合作稳定结构转为异养菌分工模式,验证了水华通过改变生境驱动功能基因表达。

  
邱鹏飞|李晨杰|刘长子|米五娟|宋高峰|饶本强|吴浩|毕永红
新乡师范学院生命科学学院,中国新乡464000

摘要

有害藻华(HABs)威胁着淡水生态系统,并与养分循环密切相关。我们在遭遇丝状蓝藻(PseudanabaenaCylindrospermopsis)水华的于桥水库进行了宏基因组研究,以阐明HABs期间驱动氮和磷循环的微生物机制。在藻华期和非藻华期,28个参与氮循环和磷循环的基因的丰度存在显著差异。藻华期表现出统一的、高效的代谢策略,其特征是氨同化相关基因(gltB/D)上调,以及无机磷吸收增强,包括高亲和力磷酸转运蛋白(pstA/B/C)和多聚磷酸盐储存基因(ppk1, phoU),这支持了微生物的快速增殖。相反,在非藻华期,代谢方式转变为多样化的氮获取方式,包括硝酸盐同化、硝化、反硝化、耦合硝化-反硝化以及固氮作用的增强。有机磷矿化基因变得占主导地位。同时,氮循环和磷循环的微生物群落也发生了显著重组。尽管在这两个时期,群落主要由放线菌、蓝细菌和变形菌组成,但关键分类单元分析显示,从藻华期间的“自养蓝细菌驱动”模式转变为非藻华阶段的“异养细菌介导的代谢”模式。微生物共现网络分析表明,藻华引发了群落的根本性重组,从广泛合作和稳定的结构转变为更加分割和可能专门化的状态,反映了由于环境条件变化导致的强烈生态位分化。偏最小二乘路径建模证实,藻华通过驱动微生物群落重组来调控功能基因的丰度。我们的发现表明,由藻华介导的微生物代谢模式决定了氮和磷循环基因的统一性,揭示了HABs的生态影响机制。

引言

微生物驱动的氮和磷循环是维持水生生态系统功能的核心过程(Duhamel, 2025)。这些过程在全球生物地球化学循环中起着不可或缺的作用,因此吸引了广泛的科学关注(Liu et al., 2025)。在分子水平上,微生物对养分循环的调控通过功能基因的精确表达来实现。氮循环涉及多个过程,包括固氮、氨同化、硝化和反硝化。每个过程都由特定功能基因编码的酶催化:谷氨酰胺合成酶(glnA)主导氨同化;同化型(narB, nasA)和异化型(napA, narG)硝酸盐还原酶催化硝酸盐转化;nifH基因的丰度表明了生物固氮的潜力;nirKnirS基因编码对反硝化至关重要的亚硝酸盐还原酶(Yang et al., 2023)。在磷循环中,微生物通过溶解、矿化和同化过程驱动磷的转化:< />编码的葡萄糖脱氢酶促进无机磷的溶解;有机磷矿化依赖于phoAphoD基因簇的表达;多聚磷酸盐水解由ppxppa基因家族调控(Han et al., 2024; Pang et al., 2024)。这些功能基因的协调表达和调控构成了水生生态系统中氮和磷平衡的分子基础。
尽管微生物在养分循环中的基本作用已经得到充分证实,但关于有害藻华的传统研究主要集中在微生物过程和养分可用性如何促进藻华的发生(Du et al., 2022; Zheng et al., 2024)上。相比之下,藻华本身在重塑这些微生物循环过程中的关键反馈作用相对被忽视。我们认为,藻华不仅是微生物演替和功能基因表达的后果,也是其强大的驱动因素。这种驱动力主要通过两个相互关联的机制发挥:物理化学栖息地的深刻变化以及随之而来的微生物代谢的重编程(Wang et al., 2023)。首先,藻华衰亡过程中释放的大量生物量形成了一个动态的内源性养分池,从根本上改变了微生物栖息地,推动了浮游细菌组成的演替变化(Aoki et al., 2008; Cottingham et al., 2015; Sintes et al., 2013)。其次,藻类产生的有机物和信号分子积极刺激了藻球中的微生物代谢,增强了关键过程,包括有机碳分解、氮同化速率的改变、硫和磷的周转效率以及微量元素(如铁)的平衡维持(Zhou et al., 2020)。这些代谢变化通过专门的功能群被引导到特定的生物地球化学途径中。这一过程始于异养细菌作为关键分解者,通过矿化有效分解藻类残骸,并将有机氮和磷转化为可直接利用的无机形式(Naeem et al., 2000)。这种养分再生的过程部分抵消了对外部养分输入的依赖,从而减轻了由于养分限制导致的藻华抑制。随后,这些再生的养分支持了更专门的微生物转化。藻华状态的演替驱动了水柱中生物可利用氮物种浓度的动态变化,进而调节了固氮微生物的代谢活动和固氮过程(由nifH基因调控),最终调节了系统中额外生物可利用氮源的输入(Zehr and Turner, 2001)。藻华衰老过程中大量藻类生物量的分解在水体中创造了局部缺氧微环境。这些条件选择性地促进了反硝化(由nirKnirS基因编码的蛋白质催化),导致氮以N?和N?O的形式从水系统中释放,从而深刻改变了氮的平衡(Liu et al., 2018; Valett et al., 2009)。此外,藻华期间频繁变化的氧化/缺氧条件进一步诱导了特定多聚磷酸盐积累生物增强其磷吸收和释放的能力,通过调控ppxppa等功能基因的表达(Song et al., 2025)。最终,这些宏观尺度的循环过程在藻球的微观尺度上得到最有效的整合(Seymour et al., 2017)。在藻细胞周围,藻类和细菌之间紧密交换了光合产物和维生素B12等必需生长因子(Grant et al., 2014; Shi et al., 2012)。这使得富含有机氮和磷的代谢废物能够局部矿化和再生,实现了高效的闭合循环养分利用。该系统不仅支持了藻华期间微生物群落的稳定性,还在一定程度上为藻华的持续或复发提供了养分基础。
尽管认识到了这些相互作用,但在藻华爆发期间氮/磷转化基因及其相关微生物群落的动态表达模式仍知之甚少。这一空白限制了对微生物调控机制和藻华生态效应的全面理解。藻华形成的机制非常复杂,特别是藻华如何调节微生物群落演替和氮磷循环中的关键功能基因仍是一个关键问题。我们假设由藻华决定的微生物群落决定了参与氮和磷生物地球化学循环的功能基因。我们采用比较宏基因组学方法研究了藻华期和非藻华期的微生物群落动态,表征了关键物种和功能基因的演替模式。我们的发现为养分循环过程和藻华的生态影响提供了新的见解。

研究区域和样本采集

于桥水库(40°02′N, 117°25′E)是中国天津市重要的淡水资源,用于市政饮用水和工农业供水,位于蓟州区以东4公里处(图1)。为了研究时空变化,在水库内设置了四个采样点。2021年,在藻华期和非藻华期,分别在0.5米深度采集了表层水样。采样在四个监测点(站点1至4)进行。

水质特性

对12个水质参数的分析显示,藻华期和非藻华期之间存在显著的环境差异(图2)。统计分析显示,藻华期的温度、pH值、总磷和叶绿素-a含量显著升高,而非藻华期的总氮、硝酸盐、溶解氧和正磷酸盐含量显著增加。

参与氮和磷代谢的功能基因

宏基因组分析显示,氮循环相关功能基因的表达存在显著差异

氮代谢方面:从氨同化到多样化

在藻华期间,由gltB/D基因介导的氨同化使NH??可以直接用于氨基酸生物合成。与硝酸盐还原相比,这一途径通过减少ATP消耗来节省细胞能量,从而支持藻类的快速增殖(Flores et al., 2005; Glibert et al., 2016; Senga et al., 2021)。此外,谷氨酸脱氢酶同工酶的差异丰度反映了微生物对氮的不同策略

结论

本研究利用宏基因组方法研究了藻华期和非藻华期间参与氮和磷循环的功能基因。在藻华期间,氨同化基因上调,而非藻华期间,与硝酸盐同化、耦合硝化-反硝化、硝化、反硝化和固氮相关的基因表达增强。磷循环也发生了平行变化:无机磷代谢相关基因

附录A 补充数据

与本文相关的补充数据可在在线版本的附录A中找到。

CRediT作者贡献声明

邱鹏飞:撰写 – 审稿与编辑,撰写 – 原稿,可视化,验证,监督,方法学,资金获取。李晨杰:撰写 – 原稿,可视化,验证,概念化。刘长子:可视化,验证,资源。米五娟:软件,资源,项目管理。宋高峰:项目管理,方法学。饶本强:方法学,调查。吴浩:项目管理,方法学。毕永红:撰写 – 审稿

利益冲突声明

作者声明他们没有已知的竞争性财务利益或个人关系可能影响本文报告的工作。

致谢

本工作得到了河南省自然科学基金(项目编号:252300420730)和天津市水资源科学研究院的支持。作者感谢天津市水资源科学研究院的支持。特别感谢张振、杨杰、王建波和郝志翔的宝贵帮助。
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