对一种包含两种标志物（TTF-1和p40）的免疫组化检测方法的分析，用于在脱色后的直接细胞学涂片上区分肺腺癌和鳞状细胞癌

《Annals of Diagnostic Pathology》：Analysis of a two-marker immunohistochemistry panel (TTF-1 and p40) for distinguishing lung adenocarcinoma from squamous cell carcinoma on destained direct cytologic smears

基于TTF-1和p40抗体直接细胞涂片免疫细胞化学检测可有效区分腺癌与鳞癌，灵敏度及预测值均为100%，Kappa值达1.0，证实其作为细胞学诊断辅助工具的价值，同时节省组织用于分子检测。

　　

S.A. Deepa Adiga | Harsha Kunar | Anusha S. Bhatt | Surbhi Patel | Daksha D. Shetty

印度马尼帕尔曼尼帕尔高等教育学院卡斯特尔巴医学院病理学系

摘要

细胞学取样在晚期肺癌的诊断中得到了广泛应用。在靶向治疗的时代，区分腺癌（ADC）和鳞状细胞癌（SCC）对于制定分子检测方案至关重要。关于直接涂片上应用免疫细胞化学（ICC）的研究在文献中仍然有限。本研究旨在评估TTF-1和p40抗体在直接细胞学涂片上区分ADC和SCC的实用性。2016年至2022年间，从形态学上诊断为非小细胞癌（NSCLC）的肺细胞学样本使用了TTF-1和p40抗体进行ICC检测，这些抗体直接应用于经95%乙醇固定并经过Papanicolaou染色的涂片上。根据检测结果，将其与细胞形态学和组织病理学诊断进行比较。在44例通过免疫细胞化学检测出TTF-1阳性的腺癌病例中，有43例在石蜡包埋活检中也呈阳性，敏感性为97.2%，阳性预测值（PPV）为100%。所有鳞状细胞癌病例在ICC和IHC检测中均呈p40阳性，敏感性和PPV均为100%。两种标记物的ICC和IHC结果之间具有显著一致性，Kappa值=1.0。由TTF-1和p40抗体组成的双标记物组合在直接涂片上可作为区分ADC和SCC的宝贵工具，从而克服了细胞形态学的局限性。细胞学涂片便于进行ICC检测，因此无需使用免疫组织化学，并有助于保存组织以供分子检测使用。

引言

肺癌是全球最常见的癌症[1]。随着驱动基因突变的检测技术进步和靶向治疗的引入，准确区分腺癌和鳞状细胞癌变得越来越重要。正确的组织学亚型分类有助于指导患者的进一步分子检测[2][3]。 大多数肺癌患者在晚期才被诊断出来，此时已无法进行手术切除。因此，对小样本（包括细胞学样本）的评估成为准确诊断的主要手段。此外，为分子研究保存组织具有重要意义，因为这关系到治疗方案的选择。在50-70%的不可切除标本中，仅通过形态学特征即可诊断出腺癌和鳞状细胞癌[3]。早期研究已经证明了免疫组织化学（IHC）组合（如甲状腺转录因子TTF-1、napsin-A和细胞角蛋白7（CK7）用于腺癌，以及p63、CK5/6、CK34bE12、desmoglein-3或desmocollin用于鳞状细胞癌）在非小细胞肺癌（NSCLC）亚型分类中的有效性[3][4]。也有研究推荐使用包括p40和TTF-1在内的有限标记物组合[5]。直接细胞学涂片上应用双标记物的研究较为少见。本研究旨在评估这种双标记物方法在NSCLC中区分ADC和SCC的实用性。

研究设计与病例选择

这项回顾性和前瞻性的横断面研究在印度马尼帕尔卡斯特尔巴医学院病理学系进行。研究对象包括2016年至2022年间从支气管刷检、支气管灌洗、肺肿块影像引导下的细针穿刺以及痰液样本中获得的直接涂片，这些样本在形态学上被诊断为NSCLC。细胞数量过少或形态保存不佳的样本被排除在外。

细胞学评估

Papanicolaou（PAP）染色...

结果

研究期间，共有200例肺癌病例通过细胞学检查确诊。其中130例在形态学上被分类为NSCLC。符合纳入标准的87例NSCLC病例被纳入研究，包括71例细针穿刺样本、9例支气管刷检样本和7例支气管灌洗样本。患者年龄主要集中在51-60岁组，其次是61-70岁组，其中男性（71.3%）多于女性。

讨论

由于大多数肺癌患者仅适合进行有限的癌症组织采样（如细胞学检查和针刺活检），因此细胞学样本（如细针穿刺、支气管刷检和支气管灌洗液）成为重要的诊断材料[6][7]。许多研究表明，仅依靠细胞形态学进行肺癌亚型分类存在局限性[7][8]。此外，对细胞学材料进行免疫组织化学（IHC）等辅助检测也是必要的...

结论

据我们所知，这是迄今为止首次评估TTF-1和p40双标记物组合在直接细胞学涂片上用于NSCLC亚型分类中的实用性的研究。我们建议在经95%乙醇固定的PAP染色细胞学材料上应用这种经济实惠的双标记物免疫染色方法，因为它被证明是区分ADC和SCC的有效辅助诊断工具。这有助于减少NDSCLC-NOS的比例，其性能表现良好...

作者贡献声明

S.A. Deepa Adiga：撰写 – 审稿与编辑、初稿撰写、验证、监督、资源协调、项目管理、方法学设计、数据分析、数据整理、概念构思。 Harsha Kunar：撰写 – 审稿与编辑、初稿撰写、验证、方法学设计、数据分析、数据整理。 Anusha S. Bhatt：撰写 – 审稿与编辑、验证、项目管理、方法学设计、数据分析、概念构思。 Surbhi Patel：

伦理声明

本研究的所有程序均遵循赫尔辛基宣言的伦理指南。该研究获得了马尼帕尔卡斯特尔巴医学院机构伦理委员会的批准（批准编号IEC KMC MLR 12-2020/443）。由于本研究使用了回顾性剩余样本，因此无需获得患者的知情同意。

会议发表情况

无。

资金来源

本研究未获得任何公共、商业或非营利机构的资助。

利益冲突声明

作者们没有需要声明的利益冲突。

致谢

无。