在模拟微重力条件下，利用基于季铵氢肼标记策略的质量光谱定量方法，对C2C12细胞和小鼠血清中的N-糖链变异进行相关性分析

《ANALYTICAL AND BIOANALYTICAL CHEMISTRY》：Relevance analysis of N-glycan variations in C2C12 cells and mouse serum under simulated microgravity using a quaternary phosphonium hydrazide labeling strategy-based mass spectrometry quantitation approach

质谱联用稳定同位素标记技术发现Man3GlcNAc3Fuc1和Man3GlcNAc4Gal1Fuc1Sia1可作为肌萎缩早期诊断生物标志物，通过微波辅助合成新型磷鎓盐标记试剂对提升糖链离子化效率，方法线性良好（R2=0.9984），兼容多种质谱离子源和前端色谱技术。

　　

摘要

质谱技术与稳定同位素标记相结合是一种强大的技术，可用于检测与疾病相关的糖基化模式变化并识别潜在的生物标志物。然而，同时具备高灵敏度、低成本和稳定唾液酸修饰功能的稳定同位素标记试剂仍然较为稀缺。在本研究中，我们开发了一种便捷且经济高效的微波辅助方法，用于合成一种稳定同位素的季铵氢肼标记试剂对¹⁴N/¹⁵N-P₄HZD，利用HPLC-ESI-HRMS技术对N-糖进行定量差异分析，该方法具有高灵敏度和便捷性。该策略具有较高的标记效率、优异的重现性以及在两个数量级范围内的强线性（R² = 0.9984）。这种试剂对可与多种离子源质谱仪和前端色谱分离技术兼容。特别是，它能够提高唾液酸化N-糖的离子化效率，从而便于其检测。相对定量方法已有效应用于分析两种由模拟微重力引起的肌肉萎缩模型（C2C12细胞和后肢卸载小鼠血清）中的N-糖谱变化。我们发现这些变化在两种模型中都表现出显著的相关性。N-糖Man₃GlcNAc₃Fuc₁和Man₃GlcNAc₄Gal₁Fuc₁Sia₁显示出作为肌肉萎缩早期诊断生物标志物的潜力。基于¹⁴N/¹⁵N-P₄HZD试剂对的质谱方法为N-糖谱的差异分析提供了一种便捷可行的策略，显示出在临床生物标志物发现方面的巨大应用潜力。

图形摘要