大黄甘草蒲公英汤通过调节肠道菌群与抑制NF-κB/ARA通路缓解溃疡性结肠炎的作用机制

《Frontiers in Immunology》：Dahuang gancao dandelion decoction regulates intestinal flora and inhibits NF-κB/ARA signaling pathway to alleviate ulcerative colitis

本研究系统探讨了大黄甘草蒲公英汤（DGD-D）通过多靶点调控肠道微环境、修复肠屏障功能并抑制NF-κB/ARA信号通路，从而有效缓解DSS诱导的小鼠溃疡性结肠炎（UC）。实验证实DGD-D可显著改善疾病活动指数（DAI）、结肠长度及脾指数，下调促炎因子（IL-1β、IL-6、TNF-α等），上调抗炎因子（IL-4、IL-10），并增强紧密连接蛋白（ZO-1、Occludin）及黏蛋白MUC2表达。通过16S rRNA测序与代谢组学分析，发现DGD-D重塑肠道菌群结构（提升Firmicutes/Bacteroidetes比值，富集Lachnospiraceae/Ruminococcaceae），抑制花生四烯酸（ARA）代谢通路关键介质（ARA、LTA4、LTB4、LTD4），最终阻断TLR4/MyD88/NF-κB p65/NLRP3/5-LOX级联反应。该研究为中药复方治疗UC提供了实验依据与机制阐释。

　　

引言

溃疡性结肠炎（UC）是一种慢性复发性炎症性肠病，其特征为肠道上皮持续性炎症、隐窝脓肿及血性黏液腹泻，全球患病人数已超过500万。当前疗法如5-氨基水杨酸（5-ASA）存在疗效局限性与副作用，而中医药通过多靶点调控肠道微环境展现出独特优势。大黄甘草蒲公英汤（DGD-D）由大黄、甘草、蒲公英组成，传统用于清热抗炎，但其治疗UC的机制尚未明确。

材料与方法

研究通过超高效液相色谱-四极杆静电喷雾电离质谱（UHPLC-QE-MS）鉴定DGD-D的418种成分，其中黄酮类（25.12%）和酚酸类（9.33%）为主。网络药理学分析提示NF-κB信号通路为关键靶点。实验采用C57BL/6小鼠，以3%葡聚糖硫酸钠（DSS）诱导UC模型，设对照组、DSS组、DGD-D组（1950 mg/kg）和5-ASA组。评估指标包括结肠长度、脾指数、DAI评分、细胞因子水平（ELISA、qRT-PCR）、组织病理学（H&E、PAS、AB-PAS染色）、肠屏障蛋白（免疫荧光、免疫组化）、肠道菌群（16S rRNA测序）及代谢物（LC-MS）。

结果

化学组成与安全性

DGD-D主要活性成分包括大黄中的芦荟大黄素、大黄酸，甘草中的甘草苷、甘草酸，以及蒲公英中的菊苣酸。动物安全性实验显示低、中、高剂量组均未引起肝、脾、肾及小肠组织病理损伤。

药效学评价

DGD-D显著改善DSS引起的体重下降、血性腹泻及结肠缩短（P< 0.001），降低DAI评分与脾指数（P< 0.01），效果与5-ASA相当。组织学上，DGD-D修复肠上皮损伤，增加杯状细胞数量与糖蛋白含量（P< 0.001），并提升ZO-1、Occludin和MUC2表达（P< 0.01）。

免疫调节作用

DGD-D下调促炎因子IL-1β、IL-6、IL-17、TNF-α、IFN-γ及髓过氧化物酶（MPO）的mRNA与蛋白水平（P< 0.01），同时上调抗炎因子IL-4与IL-10（P< 0.001）。

肠道菌群调控

DSS导致菌群α多样性下降及^Firmicutes/_{Bacteroidetes}比值降低，而DGD-D逆转此趋势（P< 0.05），富益有益菌^{Lachnospiraceae}与^{Ruminococcaceae}，抑制致病菌^{Proteobacteria}、^{Alcaligenaceae}等。菌群功能预测显示DGD-D影响细胞凋亡、氨基酸代谢等通路。

代谢物与信号通路

非靶向代谢组学发现DGD-D下调花生四烯酸（ARA）通路关键介质（ARA、LTA₄、LTB₄、LTD₄；P< 0.001）。机制上，DGD-D抑制TLR4/MyD88/NF-κB p65/NLRP3/5-LOX表达（P< 0.01），阻断NF-κB/ARA信号通路激活。

讨论

DGD-D通过多成分协同作用，重塑肠道菌群平衡，促进短链脂肪酸产生，抑制LPS-TLR4介导的炎症反应，同时直接干预ARA代谢酶5-LOX，减少炎性介质释放，最终恢复肠屏障功能。该研究揭示了中药复方通过“菌群-代谢-免疫”轴治疗UC的整合机制，为临床应用提供理论依据。

结论

DGD-D通过调节肠道菌群结构、修复肠屏障、抑制NF-κB/ARA信号通路，有效缓解UC病理进程，是一种具有潜力的中药衍生治疗策略。