通过与产色素的Bacillus velezensis和Aspergillus oryzae共同发酵,提升蚕豆酱的物理化学性质和风味特征

《Food Bioscience》:Enhancing the physicochemical and flavor profile of broad bean paste through co-culture fermentation with pigment-producing Bacillus velezensis and Aspergillus oryzae

【字体: 时间:2026年01月30日 来源:Food Bioscience 5.9

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  微生物共发酵提升蚕豆酱品质研究。采用B. velezensis YM-3与A. oryzae MJ-2共发酵或单菌发酵,评估30天发酵过程中物理化学特性及风味化合物变化。结果显示共发酵减缓pH下降,增加还原糖、氨基酸氮含量,促进乳酸和苹果酸积累,抑制草酸和琥珀酸生成。共发酵显著提升挥发性风味物质总量,其中酯类和醇类增加,n-己醛和酚类减少,2-乙基苯酚、2,5-二甲基吡嗪等有益风味物质富集。验证了B. velezensis YM-3作为辅助发酵菌改善蚕豆酱色泽、风味及营养价值的潜力。

  
作者:岳妈敏、张青、何志涵、邱宇、程小梅、张琴、唐洁、向文良
四川大学食品与生物工程学院,四川省食品微生物学重点实验室,中国成都610039

摘要

微生物共培养发酵是一种提高发酵食品质量的成熟策略。本研究探讨了选定的产色素菌株Bacillus velezensis YM-3和Aspergillus oryzae MJ-2单独或共培养时,在30天发酵过程中对蚕豆酱的理化特性和风味化合物的影响。结果表明,共培养发酵减缓了pH值的下降,并显著增加了还原糖和氨基酸氮的含量。值得注意的是,与B. velezensis YM-3共培养使蚕豆酱的红黄色更加鲜艳。代谢物分析显示,共培养增加了乳酸和苹果酸的产量,同时减少了草酸和琥珀酸的含量。此外,共培养显著提高了挥发性风味化合物(尤其是酯类和醇类)的总量。有益风味代谢物(如2-乙基酚、2,5-二甲基吡嗪、芳樟醇、异丁酸1-甲基丁酯和1-苯基-1-戊酮)的相对含量显著增加,而不希望出现的化合物(如正己醛和酚)则减少。这些结果表明,B. velezensis YM-3和A. oryzae MJ-2的共培养发酵有效改善了蚕豆酱的整体质量,突显了B. velezensis YM-3作为发酵食品工业起始菌株的潜力。

引言

传统发酵食品在全球食品文化中占有重要地位,通常是在自然条件下通过内源或外源微生物的作用使食品原料发酵而成(Estruch & Lamuela-Raventós, 2023; Konstantinidi & Koutelidakis, 2019)。这些食品通常具有独特的风味、高营养价值,并对人类健康有益(Estruch & Lamuela-Raventós, 2023; Konstantinidi & Koutelidakis, 2019)。微生物是传统食品发酵过程的关键驱动因素。它们产生多种水解酶,将蛋白质和淀粉等大分子分解为氨基酸和单糖等小分子,这些小分子随后被发酵微生物代谢生成多种有机酸、醇类和其他风味化合物(Yan et al., 2024)。尽管自然发酵具有某些优势,但如果不能有效抑制腐败或致病微生物,可能会导致发酵失败,从而影响发酵产品的感官特性和营养价值(Jin et al., 2024; Torres et al., 2020)。因此,使用来自传统发酵食品的选定本土微生物作为起始菌株可以保证产品的一致性,并改善其感官和功能性特性,有助于推动与传统工业生产相适应的传统发酵食品的发展(Torres et al., 2020)。
Pixian蚕豆酱(PBBP)是一种中国传统发酵调味品,主要采用Aspergillus oryzae作为起始菌株进行自然发酵(Tang et al., 2020)。其特点是天然的红棕色和丰富的香气,这些都是其品质的关键指标(Lu et al., 2020)。蚕豆酱是PBBP的重要半成品,通过将发酵后的蚕豆曲与盐水混合并进行自然发酵制成。其发酵过程和最终品质直接决定了PBBP的风味特性和整体质量(Zhao et al., 2022)。蚕豆酱不仅营养价值高,还具有潜在的健康益处,例如具有保护心脏的作用(Li et al., 2021)。通过对蚕豆酱自然发酵过程的分析(使用依赖培养的方法和独立于培养的方法),发现除了接种的A. oryzae外,Bacillus属也是该发酵系统中的主要优势微生物群(Lu et al., 2020)。作为传统发酵食品中的重要属,Bacillus以产生大量胞外降解酶、适应性强、能耐受多种底物以及极端pH值和温度等恶劣环境条件而著称(Herrmann et al., 2024; Kimura & Yokoyama, 2019; Li et al., 2023)。此外,研究表明某些Bacillus菌株可以用作起始菌株,从而积极影响发酵豆制品的风味特征或生物活性化合物。例如,从泡菜中分离出的Bacillus amyloliquefaciens作为起始菌株接种到蚕豆酱发酵中,可增加蚕豆酱中总挥发性化合物和关键风味物质的含量(Lin et al., 2024)。Bacillus sphaericus被广泛用于豆类食品的发酵(Li et al., 2023; Liu et al., 2022)。Bacillus licheniformisB. amyloliquefaciens常用于生产快速发酵的韩国大豆制品cheonggukjang(Kim et al., 2012)。Bacillus subtilis在传统日本食品纳豆的发酵中也有广泛应用(Zhang et al., 2021)。此外,对Bacillus菌株的有益特性的分析表明,许多菌株(如B. subtilisB. licheniformisBacillus coagulansBacillus velezensisBacillus菌株并探索其在发酵过程中的应用可能有助于提高产品质量。
B. velezensisBacillus属中的一个相对较新的物种,近年来成为研究热点。作为一种安全且环保的益生菌,B. velezensis广泛存在于天然和发酵食品中,据认为它可以提升发酵食品的风味和营养价值(Su et al., 2024)。例如,使用选定的B. velezensis GZ1起始菌株进行发酵可以丰富发酵大豆食品中的生物活性化合物(Cui et al., 2020)。同样,产纤溶酶的B. velezensis SN-14可以减少总胺的产生并提升发酵豆豉的风味感官评分(Long et al., 2021)。然而,B. velezensis对PBBP生产的潜在益处尚未得到充分研究。此外,不同微生物菌株的组合是影响共培养发酵产物生物活性和风味特性的关键因素(Tang et al., 2024)。例如,B. velezensis的共接种可以增加共发酵韩国doenjang-meju(一种传统发酵大豆制品)中挥发性化合物的多样性和含量(Han et al., 2023)。同样,B. velezensisBacillus subtilis>的接种改变了传统曲的微生物群落组成,增加了挥发性风味化合物的浓度,提升了曲的品质(He et al., 2019)。与单独使用Aspergillus oryzae发酵相比,包含A. oryzae和其他微生物的共培养发酵对PBBP具有明显优势(Lin et al., 2024)。因此,有必要开展专门研究,探索A. oryzae和B. velezensis>的共培养发酵,以提升发酵蚕豆酱的品质。
在我们之前的研究中,从传统PBBP中分离并鉴定出一种产橙红色色素的菌株B. velezensis YM-3。然而,B. velezensis菌株的产色素能力及其提升发酵蚕豆酱颜色和风味的潜力尚未被报道。在这项工作中,我们使用B. velezensis YM-3和A. oryzae MJ-2进行蚕豆酱的共培养发酵,并根据颜色、理化特性以及有机酸、氨基酸和挥发性化合物的含量评估了共培养发酵与单培养对蚕豆酱质量的影响。这项研究为B. velezensis YM-3作为辅助发酵的有希望的起始菌株及其在提升蚕豆酱品质和外观方面的作用提供了新的见解。

菌株和培养基

B. velezensis YM-3是一种产橙红色色素的菌株,是从传统PBBP中分离并鉴定出来的(图1A),用作蚕豆酱发酵的起始菌株。A. oryzae MJ-2是从传统Pixian蚕豆曲中筛选出来的,并保存在四川大学食品微生物学重点实验室的-80°C环境中。B. velezensis YM-3和A. oryzae MJ-2既用于单菌株发酵实验,也用于

理化特性

为了评估使用B. velezensis YM-3、A. oryzae MJ-2或两者共培养发酵的蚕豆酱的质量,测量了基本理化指标,包括pH值、还原糖、总酸和氨基酸氮含量。结果如图1所示。
所有发酵组中的蚕豆酱pH值最初呈下降趋势,但在发酵过程中保持相对稳定(图1B)。仅使用A. oryzae MJ-2发酵的组

结论

总之,与A. oryzae MJ-2单菌株发酵相比,使用产色素的B. velezensis YM-3和A. oryzae MJ-2的共培养发酵增强了蚕豆酱的红黄色和光泽。共培养系统减缓了pH值的下降,增加了还原糖和氨基酸氮的含量,提高了乳酸和苹果酸的含量,并减少了草酸和琥珀酸的含量。共培养发酵产生了更多种类更丰富的挥发性风味化合物

作者贡献声明

何志涵:研究、数据分析。邱宇:方法学设计、研究。张青:撰写 – 审稿与编辑、初稿撰写、监督、方法学设计、研究、资金筹集。岳妈敏:初稿撰写、方法学设计、研究、数据分析。向文良:概念构思。张琴:验证、方法学设计。唐洁:撰写 – 审稿与编辑、资源协调、资金筹集。程小梅:数据分析

利益冲突声明

作者声明他们没有已知的可能会影响本文研究的财务利益或个人关系。

致谢

本研究得到了四川省自然科学基金(2025ZNSFSC0213)、四川大学研究生科技创新竞赛项目(YK20240248)和中国农业大学-四川农业与工业研究院基金的支持。
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