基于小RNA测序分析共生菌Wolbachia促进宿主灰飞虱生殖的微小RNA

　　

摘要： 【目的】鉴定共生菌Wolbachia调控宿主灰飞虱Laodelphax striatellus生殖的微小RNA(microRNA, miRNA)。【方法】采用小RNA测序技术，对感染及未感染Wolbachia的灰飞虱羽化后第3天雌成虫卵巢内的miRNA进行鉴定，筛选获得差异表达miRNA。将获得的差异表达miRNA与灰飞虱基因组进行比对，确定与参比序列匹配的小RNA；利用miRanda和RNAhybrid软件预测差异表达miRNA的靶基因。运用qRT-PCR检测差异表达miRNA及其靶基因在感染及未感染Wolbachia的灰飞虱雌成虫卵巢中的表达量。【结果】从感染及未感染Wolbachia的灰飞虱雌成虫卵巢中筛选获得7个差异表达miRNA (novel_47, novel_48, novel_60, novel_76, novel_88, novel_160和novel_184)；未感染Wolbachia的灰飞虱雌成虫卵巢中novel_47表达量显著高于感染Wolbachia的灰飞虱的，而感染Wolbachia的灰飞虱雌成虫卵巢中novel_184表达量显著高于未感染Wolbachia的灰飞虱的。其余miRNAs (novel_48， novel_60， novel_76， novel_88和novel_160)在感染Wolbachia的灰飞虱雌成虫卵巢中表达量极显著高于未感染Wolbachia的灰飞虱的。novel_47的靶基因LsJHE在感染Wolbachia的灰飞虱雌成虫卵巢内表达量显著高于未感染Wolbachia灰飞虱的，而novel_48， novel_160和novel_184的靶基因(分别为LsMFS， LsCarE25及LsTreT)在未感染Wolbachia的灰飞虱雌成虫卵巢内表达量显著高于感染Wolbachia的灰飞虱的， 未感染Wolbachia的灰飞虱雌成虫卵巢内novel_60， novel_76和novel_88的靶基因(分别为LsCYP315A1， LsPOD及LsJHAMT)表达量极显著高于感染Wolbachia灰飞虱的。【结论】筛选并获得感染及未感染Wolbachia的灰飞虱雌成虫卵巢内7个差异表达miRNA及其对应的靶基因，为探究miRNA在Wolbachia促进灰飞虱雌虫生殖中的作用机制提供了宝贵的候选基因，为利用miRNA或Wolbachia开发针对灰飞虱的新型靶向控制策略提供了潜在分子靶标。