《Frontiers in Immunology》：The gamma delta T/NK cell product GADEKILL as a novel immunotherapeutic tool for neuroblastoma patients: role of B7H6 and BTN2A1 in tumor cell killing
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本研究报道了一种新型GMP级细胞产品GADEKILL（含细胞毒性γδ T和NK细胞），通过体外实验证明其对高、低GD2表达的神经母细胞瘤（NB）均具有显著杀伤活性。该细胞通过多种活化受体（如NKp30、NKp44）及配体（B7H6、BTN2A1）实现MHC非限制性肿瘤清除，且不引发移植物抗宿主病（GvHD），为复发/难治性高危神经母细胞瘤（R/R HR-NB）提供了新的治疗策略。
背景
神经母细胞瘤（Neuroblastoma, NB）是儿童最常见的颅外实体肿瘤，高危转移性病例占儿科肿瘤死亡的15%。当前标准治疗包括强化化疗、手术、自体造血干细胞移植（HSCT）、放疗及分化剂维持治疗。抗双唾液酸神经节苷脂（GD2）单抗达妥昔单抗β（dinutuximab-β）的应用显著改善了患者生存，但仍有约50%患者复发。尤其值得注意的是，部分复发患者出现GD2表达下调或缺失，导致基于GD2靶向的疗法（如CAR-T）失效。因此，开发不依赖GD2表达的新型免疫疗法成为迫切需求。
GADEKILL细胞产品的特性
GADEKILL是一种符合药品生产质量管理规范（GMP）的细胞产品，主要由细胞毒性γδ T细胞（以Vδ2亚型为主）和NK细胞组成。流式细胞术分析显示，其γδ T细胞高表达CD57、NKG2D、DNAM-1等活化受体，且免疫检查点分子（如PD-1、TIGIT）的表达可能与细胞活化而非耗竭相关。与同一供体来源的纯化NK细胞相比，GADEKILL中的NK细胞表达更高水平的NKp30和NKp44，但CD16和NKG2D表达较低。
体外杀伤功能评估
通过脱颗粒（CD107a+）和靶细胞凋亡（7-AAD+）实验，GADEKILL在1:1的效靶比下对高/低GD2表达的NB细胞系及患者来源3D肿瘤球体均表现出显著细胞毒性。尤其针对GD2阴性细胞系SK-N-AS，GADEKILL NK细胞的杀伤活性显著优于纯化NK细胞（p=0.02）。在达妥昔单抗β存在时，GADEKILL仍能通过抗体依赖性细胞毒性（ADCC）有效清除GD2阳性肿瘤细胞。
关键配体B7H6与BTN2A1的作用
研究发现，NB细胞普遍表达自然细胞毒性受体（NCR）配体（如B7H6、钙网蛋白）和嗜乳脂蛋白（BTN）家族分子（如BTN2A1、BTN3A1/2/3）。其中，B7H6（NKp30配体）和BTN2A1（Vδ2 TCR配体）的表达水平与GADEKILL诱导的靶细胞裂解呈正相关（p=0.022和0.018）。阻断实验进一步证实，B7H6抗体可显著抑制GADEKILL对高表达B7H6的肿瘤细胞（如K562）的杀伤作用，凸显其在细胞毒性中的关键地位。
结论与临床意义
GADEKILL通过多靶点机制（包括B7H6-NKp30、BTN2A1-Vδ2 TCR等）实现对NB的广谱杀伤，且不受GD2表达水平的限制。该产品具备"通用型"潜力，无需HLA配型且无GvHD风险，尤其适用于GD2低表达/阴性的R/R HR-NB患者。未来可探索将其与单抗或造血干细胞移植联合应用，以进一步提升疗效。
