《Scientific Reports》：Deciphering a novel RP-HPLC based bioanalytical method for Estimation of xanthohumol in rat plasma and postbiotic-based nanostructured lipid carriers
编辑推荐：
本研究针对黄腐酚(xanthohumol)在生物基质中定量分析的挑战，建立了基于反相高效液相色谱(RP-HPLC)的生物分析方法，成功应用于负载黄腐酚的纳米结构脂质载体(NLCs)及大鼠血浆样本的检测。方法验证显示线性范围2-10 ng/mL（R2=0.9992），精密度（RSD<2%），且通过稳定性实验证明其可靠性。该方法的建立为黄腐酚制剂药代动力学研究提供关键技术支撑。
黄腐酚(xanthohumol)作为一种天然黄酮类化合物，因其抗炎、抗氧化和抗癌潜力近年来备受关注。然而，其在生物体内的低溶解度和快速代谢严重限制了临床应用。为解决这一瓶颈，研究人员尝试将黄腐酚封装于纳米结构脂质载体(NLCs)中以提高生物利用度，但缺乏可靠的生物分析方法来精准追踪其在复杂生物基质（如血浆）中的动态变化。
本研究发表于《Scientific Reports》，旨在开发一种专属性强、灵敏度高的反相高效液相色谱(RP-HPLC)方法，用于定量分析大鼠血浆中负载黄腐酚的NLCs。研究团队在NLCs中添加后生元丁酸钠(sodium butyrate)以增强制剂功能，并以姜黄素(curcumin)作为内标物。通过优化色谱条件（Altin C-18色谱柱，流动相为乙腈-0.1%冰乙酸水溶液65:35，流速1 mL/min，检测波长370 nm），实现了黄腐酚（保留时间7.03 min）与内标（4.5 min）的基线分离。方法学验证表明，在2-10 ng/mL范围内线性良好（R2=0.9992），日内、日间精密度RSD均低于2%，且血浆基质及辅料无干扰。稳定性实验（短期、长期、冻融）显示黄腐酚回收率偏差在±5%以内，证实方法稳健性。
关键技术方法概要
研究采用RP-HPLC结合紫外检测技术，以大鼠血浆为生物样本，通过蛋白沉淀前处理，建立等度洗脱程序。同时表征NLCs的粒径（120.27 nm）、Zeta电位（-11.7 mV）和包封率（95%），以验证载体在血浆中的稳定性。
研究结果分析
- 1.
方法特异性
色谱图中黄腐酚与内标峰形尖锐，血浆内源性物质、丁酸钠及空白NLCs均无干扰，证明方法可特异性识别目标物。
- 2.
线性与灵敏度
标准曲线在低浓度区间（2-10 ng/mL）呈现优异线性，检测限满足微量黄腐酚定量需求。
- 3.
精密度与准确度
低、中、高浓度质控样本的RSD均<2%，回收率接近100%，符合生物分析指南要求。
- 4.
稳定性验证
黄腐酚在血浆中经历多次冻融循环后含量变化<5%，表明样本处理流程可靠。
- 5.
NLCs稳定性
载药NLCs在血浆中粒径、电位及包封率保持稳定，证实纳米载体在生物环境中结构完整性。
结论与意义
本研究成功构建的RP-HPLC方法具备高灵敏度、重复性好和抗基质干扰能力强等特点，为黄腐酚NLCs制剂的药代动力学研究提供关键工具。尤其通过引入后生元丁酸钠，拓展了纳米载体在调节肠道微环境方面的应用潜力。该方法的标准化流程可直接推广至其他难溶性药物的生物分析领域，为纳米药物临床转化奠定技术基础。
