妊娠期间长期缺氧会损害Rad介导的CaV1.2通道抑制作用，并增加妊娠绵羊的子宫血管阻力

《Journal of Physiology》：Chronic hypoxia during gestation impairs Rad-mediated inhibition of CaV1.2 channel and increases uterine vascular resistance in pregnant sheep

子宫动脉血流动力学妊娠适应机制研究中发现慢性缺氧通过TET2介导的Rad基因启动子超甲基化抑制Rad表达，降低CaV1.2通道活性，导致血管阻力增加。过表达Rad可逆转缺氧诱导的CaV1.2活性升高和血管收缩现象。

　　

摘要

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我们最近的研究表明，在绵羊模型中，单体G蛋白Rad的上调是一种新的调控机制，能够抑制子宫动脉在妊娠适应过程中的Ca_V1.2通道电流。在本研究中，我们测试了这样一个假设：妊娠期间的慢性缺氧通过启动子高甲基化下调Rad基因的表达，从而削弱了Rad对子宫动脉中Ca_V1.2通道活性的抑制作用。我们发现，与正常氧环境下对照组动物相比，适应高海拔缺氧环境的妊娠母羊的子宫动脉Ca_V1.2电流密度和血管阻力显著增加。RNA-seq分析显示子宫动脉中的Rad基因表达显著下调，这一结果通过qRT-PCR和Western blot得到了验证。我们发现，绵羊的Rad基因启动子包含一个位于转录起始位点附近的CG岛，在长期缺氧的妊娠母羊的子宫动脉中该CG岛发生高甲基化，导致启动子活性降低。敲低ten-eleven转位甲基胞嘧啶双加氧酶2（TET2）能够重现缺氧的影响，即增加Rad基因启动子的甲基化程度，降低Rad基因表达，并上调子宫动脉中的Ca_V1.2通道活性。在绵羊子宫动脉中过表达Rad可以逆转妊娠缺氧引起的Ca_V1.2通道活性和肌生成张力的增加，尽管对子宫动脉的血管阻力没有显著影响。总体而言，我们的研究揭示了缺氧介导的Rad基因下调以及妊娠期间子宫动脉Ca_V1.2通道过度活跃的新机制，为理解与妊娠缺氧相关的母体并发症中的子宫血流动力学异常提供了新的见解。

关键点

• 妊娠期间的慢性缺氧会增加妊娠母羊子宫动脉中的Ca_V1.2电流密度和血管阻力。
• RNA-seq分析显示，缺氧妊娠动物的子宫动脉中Rad基因表达显著下调。
• 缺氧妊娠动物的子宫动脉中Rad基因启动子发生高甲基化，甲基化程度的增加导致Rad基因启动子活性降低。
• 敲低ten-eleven转位甲基胞嘧啶双加氧酶2（TET2）能够通过增加Rad基因启动子的甲基化程度、降低Rad基因表达以及上调子宫动脉中的Ca_V1.2通道活性来重现缺氧的影响。
• 在体内过表达Rad可以消除妊娠缺氧引起的子宫动脉Ca_V1.2通道活性和肌生成张力的增加。

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