《Journal of Virological Methods》：Effects of porcine epidemic diarrhoea virus vaccination timing and route of administration on colostrum antibody levels and prevention of diarrhoea in piglets on a pig farm with porcine epidemic diarrhoea
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本研究评估了不同PEDV疫苗接种策略（包括口服活疫苗）对母猪初乳中IgA、IgG和中和抗体滴水平的影响，并分析了其对仔猪PEDV防护的临床效果。结果显示， thrice vaccination 组（5K3K1L）中仔猪初乳IgA水平最高，腹泻和生长迟缓显著改善，验证了优化疫苗程序对增强黏膜免疫的关键作用。
作者名单：Bo Kyu Kang | Dong Suk Min | Deok Il Kim | Seo Hyun Jung | Bo Kyeong Kim | Jin A Lee | Do Yeon Kim | Joong Young Park | Jin Sik Oh
研究机构：MEDIAN Diagnostics，韩国江原道春川市，邮编24399
摘要
仔猪依赖从母猪乳汁中获得的被动免疫力，这些免疫力来源于母猪体内产生的抗体。本研究评估了在感染猪流行性腹泻病毒（PEDV）的母猪中，根据疫苗接种的时间、频率和途径，其初乳中的抗体谱（IgA、IgG和中和抗体）的差异，并评估了PEDV疫苗接种对新生仔猪的临床保护效果。接受两次或更多次疫苗接种的母猪所产的仔猪（包括在分娩前1周口服减毒活疫苗的3K1L组和5K3K1L组）表现出腹泻和生长迟缓的消失，并且断奶体重显著增加。而在分娩前1周口服活疫苗的母猪所产的仔猪，其IgA水平明显高于分娩前2周接种疫苗的母猪所产的仔猪。各组之间的中和抗体滴度存在显著差异（p=0.023）：三次接种疫苗的组（5K3K1L组）的中和抗体滴度显著高于接种一次（1K1L组）和两次（3K1L组）的组。接种疫苗组与未接种疫苗组之间的IgG水平没有显著差异。总体而言，本研究提供了科学证据，证明了母猪初乳中的抗体水平（尤其是IgA）与对PEDV的临床保护作用之间的关联。
引言
猪流行性腹泻病毒（PEDV）是一种肠道冠状病毒，会导致新生仔猪出现急性水样腹泻、脱水和高死亡率，给全球养猪业造成严重经济损失。自2013年在韩国全国范围内重新出现以来，许多繁殖猪群中持续发生了PEDV疫情（Chattha等人，2015年；Song等人，2015年；Madson等人，2016年；Jung和Saif，2017年）。这种持续传播的主要原因是传统疫苗株（G1a）与当前流行的野毒株（G2b）之间的抗原不匹配，以及农场内部存在免疫空白（Vazquez等人，2015年；Lee，2021年）。
保护新生仔猪免受病毒性肠炎的关键在于有效传递被动免疫力。母猪初乳中的分泌型免疫球蛋白A（sIgA）通过直接阻止病毒附着和侵入肠道黏膜表面发挥主要防御作用（Wilson和Butcher，2004年；Reyes等人，2006年；Saif，2015年）。由于PEDV是一种通过粪-口途径传播的黏膜病毒，基于黏膜IgA的免疫力比系统性IgG介导的免疫力更为重要（Langel等人，2016年；Jung等人，2020年）。通过肠道-乳腺免疫轴，肠道黏膜中产生的产生IgA的浆细胞会迁移到乳腺，在初乳中积累，并在仔猪出生后立即传递给它们（Oh等人，2020年）。
PEDV疫苗分为灭活疫苗和减毒活疫苗两种类型，它们在免疫诱导机制上存在显著差异。肌肉注射的灭活疫苗主要刺激系统性IgG反应，而口服的减毒活疫苗则更有效地诱导肠道黏膜中的IgA反应（Wilson和Butcher，2004年；Lee等人，2016年；Li等人，2025年）。因此，在实际应用中，越来越多地采用联合疫苗接种方案：先用灭活疫苗进行初次免疫，再用减毒活疫苗进行加强免疫，以优化黏膜免疫力（Pyo等人，2018年）。
口服减毒活疫苗的接种时机被认为是成功传递IgA的关键因素。分娩前约1周是IgA浆细胞向乳腺迁移的最佳时期，此时雌激素/孕酮比例增加，趋化因子（如CXCL12和CCL28）的表达也升高（Kim等人，2019年；Oh等人，2020年）。在此期间口服减毒活疫苗可以最大程度地促进初乳中IgA的积累。然而，即使进行了多次初次和加强免疫，如果疫苗接种时机不在免疫激活窗口期内，即所谓的“免疫窗口”之外，黏膜IgA的诱导和运输效率可能会显著降低（Jung等人，2015年；Lee等人，2016年）。因此，母猪PEDV疫苗接种的效果在很大程度上取决于所使用的疫苗类型、接种途径和时机。
病毒中和（VN）抗体是评估对PEDV保护作用的重要指标。然而，先前的研究表明，VN抗体滴度与黏膜IgA水平的相关性较弱，不一定能反映实际的临床保护程度（De Arriba等人，2002年；Reyes等人，2006年）。这一局限性凸显了建立以IgA反应为中心的免疫监测系统的必要性，而不仅仅是依赖系统性抗体滴度。
尽管黏膜免疫非常重要，但很少有研究直接比较在不同接种策略下母猪初乳中的IgA和IgG抗体水平。因此，本研究旨在通过比较在感染PEDV的农场中，使用不同组合和接种时间的灭活疫苗和活疫苗对母猪初乳中PEDV特异性IgA、IgG和VN抗体的水平，来确定最佳的母猪疫苗接种方案。同时，本研究还试图找出能够最大化乳汁生成免疫力并为哺乳仔猪提供最强临床保护的免疫方案。
农场信息
本研究在韩国全罗北道伊克桑的一个养猪场进行，该农场共有400头母猪。研究前两年内没有进行过PEDV疫苗接种。平均每窝产仔数为14.9头，平均断奶仔猪数为11.5头。大约5日龄的仔猪经常出现腹泻，并伴有生长迟缓现象。平均断奶体重为4.5公斤，较低。由于PEDV导致的仔猪死亡率为……
病原病毒的鉴定及临床症状的变化
在实施疫苗接种计划之前，对腹泻仔猪的粪便样本进行病原分析后发现其中含有PEDV基因和抗原（PEDV Ag快速检测试剂盒结果为++；PEDV qRT-PCR Ct值为21-23）。S基因的部分序列分析与参考病毒（JBSJ10株）的相似度达到99.3%，确认检测到的病毒属于PEDV 2b基因型（表3）。接种3K1L疫苗的母猪所产的仔猪的腹泻和生长迟缓症状消失了。
讨论
本研究评估了在感染PEDV的农场中，不同PEDV疫苗接种方案对仔猪临床症状和体重变化的影响。接种疫苗前，腹泻仔猪的粪便样本中检测到了PEDV（2b基因型）。接种3K1L和5K3K1L疫苗后，腹泻和生长迟缓症状消失，平均断奶体重从4.1公斤显著增加到7.0公斤。这一发现表明，PEDV感染引起的绒毛萎缩是……
资金来源
本研究得到了韩国食品、农业和林业技术规划与评估研究所（IPET）的支持，该研究属于农业、食品和农村事务部（MAFRA）资助的高风险动物传染病控制技术开发计划（项目编号：RS-2024-00398764）。
作者贡献声明
Dong Suk Min： 方法学
Deok Il Kim： 方法学
Seo Hyun Jung： 方法学
Bo Kyeong Kim： 方法学
Jin A Lee： 方法学
Do Yeon Kim： 数据可视化
Joong Young Park： 资源管理、方法学
Jin Sik Oh： 文章撰写、审稿与编辑、项目监督、概念构思
Bo Kyu Kang： 文章撰写、审稿与编辑、初稿撰写、概念构思
利益冲突声明
所有作者均已审阅手稿并同意将其提交给您的期刊。不存在需要声明的利益冲突。
致谢
利益冲突
本研究在没有任何商业或财务关系的情况下进行。
