《Frontiers in Cellular and Infection Microbiology》：In vitro antibacterial activity of platelet-rich plasma against Gram-positive and Gram-negative pathogens
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本研究通过改良琼脂扩散法、菌落形成单位计数和细菌生长曲线分析，系统评估了富血小板血浆（PRP）、贫血小板血浆（PPP）和冷冻富血小板血浆（Fro-PRP）对五种常见伤口感染病原体（包括大肠杆菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌、金黄色葡萄球菌和粪肠球菌）的体外抗菌效果。结果表明，PRP及其衍生物均表现出抗菌活性，其中PRP的抑菌作用最强且持续时间最长，而冷冻保存会一定程度削弱其长期抗菌能力。研究为PRP作为兼具再生与抗感染功能的辅助治疗策略提供了实验依据，对临床难治性感染伤口管理具有重要参考价值。
引言
细菌感染是伤口最常见的并发症之一，会通过引发过度炎症反应、破坏细胞功能及胶原代谢平衡，导致伤口迁延不愈甚至发展为慢性伤口。富血小板血浆（PRP）作为一种含高浓度血小板、生长因子和细胞因子的自体生物制剂，已被证实可促进组织修复，但其抗菌作用尚存争议。本研究旨在明确PRP及其衍生物（PPP、Fro-PRP）对五种常见伤口病原体（包括革兰阴性菌：大肠杆菌Escherichia coli、肺炎克雷伯菌Klebsiella pneumoniae、阴沟肠杆菌Enterobacter cloacae；革兰阳性菌：金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus、粪肠球菌Enterococcus faecalis）的体外抗菌活性。
材料与方法
研究采用Trima Accel血液成分分离机制备白细胞贫乏型PRP，血小板浓度较全血提升5.5倍（(1288.15 ± 470.99) ×109/L）。通过改良琼脂扩散法（50 μL样品）、菌落形成单位（CFU）计数（共培养0 h、2 h、4 h、6 h）和细菌生长曲线（OD600监测0–28 h）三种方法评估抗菌效果。统计分析采用单因素方差分析（ANOVA）及LSD/Tamhane事后检验，以P < 0.05为显著性标准。
结果
- 1.
抑菌圈分析：PRP、PPP和Fro-PRP均对肺炎克雷伯菌和金黄色葡萄球菌产生显著抑菌圈（P < 0.01），而对大肠杆菌、阴沟肠球菌和粪肠球菌的抑菌圈与0.9% NaCl对照组无统计学差异。
- 2.
CFU计数：PRP在2 h–6 h内持续抑制所有菌株增殖；Fro-PRP对肺炎克雷伯菌和阴沟肠球菌的早期（2 h）抑菌作用强于PRP，但6 h时PRP效果更优；PPP仅短期（2 h）抑制部分菌株。
- 3.
生长曲线：PRP对所有菌株均呈现持续抑菌作用（0–24 h），且效果显著强于PPP和Fro-PRP。Fro-PRP对金黄色葡萄球菌的抑菌作用在12 h后消失，而对粪肠球菌在12 h后甚至出现轻微促生长现象。三者均主要表现为 bacteriostatic（抑菌）而非 bactericidal（杀菌）效应。
讨论
PRP的抗菌机制可能源于血小板释放的活性氧（ROS）、抗菌肽（如PF4、CXCL7、防御素）以及血浆中的补体成分。本研究使用的P-PRP（白细胞贫乏型）提示抗菌作用主要依赖血小板和血浆成分。不同方法的结果差异（如琼脂扩散法中抑菌圈不明显）可能与血小板无法在固体介质中迁移，仅血浆成分扩散有关。冷冻保存可能通过破坏血小板结构或活性成分稳定性，削弱PRP的长期抗菌能力。
结论
PRP对革兰阳性和阴性常见伤口病原体均具有显著抑菌活性，且效果优于PPP和Fro-PRP。尽管其抗菌谱和机制仍需深入探索，但PRP作为兼具组织再生与抗感染潜力的生物制剂，为感染伤口治疗提供了新的辅助策略。后续需通过体内实验和临床试验进一步验证其临床应用价值。
