基于蛋白质组学与RT-PCR分析泰和乌骨鸡空肠FABP6响应鸡白痢沙门菌感染的表达特征与潜在机制

《Poultry Science》：Jejunum FABP6 expression and potential mechanism response to Salmonella Pullorum inoculation revealed by Proteomic profiling and RT-PCR in Chinese Taihe Black-Bone Silky Fowls

本研究针对鸡白痢沙门菌（S. Pullorum）感染导致雏鸡高死亡率及肠道健康受损的问题，通过蛋白质组学与RT-PCR技术系统分析了泰和乌骨鸡空肠蛋白表达谱变化。研究发现感染后FABP6和ACE2蛋白表达显著下调，并通过PPARα通路参与宿主防御反应，为开发新型诊断标志物和治疗靶点提供了理论依据。

鸡白痢沙门菌（Salmonella Pullorum）是严重危害禽类健康的革兰氏阴性病原体，尤其对2-3周龄雏鸡造成高死亡率，给养殖业带来巨大经济损失。更严峻的是，沙门菌耐药性问题日益突出，南亚地区数据显示其耐药率十年间从53%升至77%，而鸡白痢沙门菌的耐药率高达90.06%。目前尚无有效疫苗，氟苯尼考等抗生素成为主要治疗选择，但长期使用可能导致肠道菌群失衡和黏膜屏障损伤。

在这背景下，研究人员聚焦具有地理标志价值的泰和乌骨鸡（Taihe Black-Bone Silky Fowl, TBSF），其市场价格是普通白羽肉鸡的十倍，但鸡白痢沙门菌感染导致的经济损失尤为显著。空肠作为营养吸收的关键部位，其蛋白表达响应病原体入侵的机制尚不明确。为此，研究团队通过多组学技术揭示了宿主防御的新靶点，成果发表于《Poultry Science》。

关键技术方法

研究设置空白对照组、低中高剂量感染组（1.39×10⁸、2.78×10⁸、5.56×10⁸CFU/mL）及氟苯尼考治疗组（LD组），采集21日龄雏鸡空肠组织。采用数据非依赖采集（Data-Independent Acquisition, DIA）蛋白质组学技术鉴定8977种蛋白质，结合HE染色观察组织形态，并通过RT-PCR验证FABP6、ACE2、PPARα基因表达。数据分析基于Majorbio Cloud平台，差异蛋白筛选标准为Fold Change>1.5或<0.67且P<0.05。

研究结果

生长性能与空肠形态变化

感染后各组体重无显著差异，但空肠隐窝深度在感染组显著低于空白组（P<0.05），提示肠道屏障结构受损。氟苯尼考治疗未逆转隐窝变浅，表明抗生素可能加剧黏膜损伤。

蛋白质组学分析

共鉴定出128,851条肽段，各组差异蛋白数量分别为L组976个、LD组536个、M组635个、H组673个。KEGG富集分析显示差异蛋白主要富集于信号转导、感染性疾病（病毒/细菌）、免疫系统等通路。86个共有差异蛋白中，FABP6（脂肪酸结合蛋白6）和ACE2（血管紧张素转换酶2）在空白组表达显著高于感染组（P<0.01）。

RT-PCR验证

FABP6和PPARα mRNA在空白组表达最高（P<0.05），而ACE2 mRNA在感染组上调。相关性分析显示PPARα与FABP6表达呈正相关（P<0.05），提示FABP6可能通过PPAR信号通路响应感染。

结论与意义

本研究首次系统揭示鸡白痢沙门菌感染通过下调FABP6/ACE2表达破坏空肠屏障功能，而氟苯尼考治疗虽抑制病原增殖，但未能完全恢复蛋白表达平衡。FABP6作为PPARα通路的关键因子，可能通过调节脂代谢和免疫浸润参与宿主防御，为开发靶向疗法提供了新思路。研究成果不仅为泰和乌骨鸡抗病育种提供分子标记，也为控制禽源性沙门菌传播提供了理论支撑。