一种可视化筛选转基因通用载体pCamRUBY的构建和应用研究

　　

摘要：

目的 构建并验证一种可视化筛选转基因通用载体pCamRUBY，以期提高植物遗传转化效率。 方法 在以RUBY作为报告基因的基础上利用2A技术构建成一个通用表达载体pCamRUBY，以Spe和Kan抗性基因分别构建验证载体pCamSpeRUBY和pCamKanRUBY，并分别以拟南芥和棉花为材料进行遗传转化验证和色素含量鉴定。 结果 该载体具有可视化程度高，载体序列小，内含由Sal I、Apa I、Xba I、Sac I和Spe I组成的MCS位点和T2A（optimized）序列等特点。分别获得可裸眼观察筛选的具有红色表型性状的转基因拟南芥和棉花阳性植株或组织，并可得到稳定遗传后代。 结论 该通用表达载体pCamRUBY可直接连接外源基因正常表达、可稳定遗传且可直接裸眼观察筛选的红色性状转基因阳性植株，且不影响包含叶绿素含量在内的其他表型性状。