bZIP转录因子CsFcr3调控暹罗炭疽菌对DMI和QoI类杀菌剂敏感性的功能研究

　　

摘要：

目的 从我国橡胶树炭疽病的田间优势菌暹罗炭疽菌（Colletotrichum siamense）中克隆bZIP转录因子CsFcr3，明确其序列和结构特征，分析CsFcr3在暹罗炭疽菌对6种不同类型杀菌剂敏感性中的生物学功能，为深入研究病原真菌耐药性调控机制奠定基础。 方法 采用同源克隆从C. siamense中克隆了bZIP转录因子CsFcr3，并进行序列及结构特征分析，利用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）分析杀菌剂胁迫下CsFcr3的表达模式；利用同源重组和PEG介导的原生质体转化技术对CsFcr3进行基因敲除，分析敲除突变体对不同杀菌剂敏感性的变化。 结果 CsFcr3开放阅读框长度为1 101 bp，编码336个氨基酸残基，具有bZIP_Yap保守结构域；RT-qPCR结果表明，DMI类杀菌剂苯醚甲环唑、戊唑醇、咪鲜胺及甲氧基丙烯酸酯（QoI）类杀菌剂吡唑醚菌酯胁迫下CsFcr3均显著上调表达；与野生型菌株相比，CsFcr3基因缺失突变体对氟康唑、戊唑醇和咪鲜胺的敏感性均降低，对吡唑醚菌酯的敏感性增加，而对苯醚甲环唑和咯菌腈的敏感性无显著变化。 结论 从暹罗炭疽菌中克隆得到具有bZIP转录因子典型基序和保守结构域的CsFcr3，且与酿酒酵母Yap3p高度同源。CsFcr3主要参与调控暹罗炭疽菌对DMI类和QoI类杀菌剂的敏感性而不参与菌株对吡咯类杀菌剂敏感性的调控。