《ACS Food Science & Technology》：Brazilian Geopropolis from Melipona mondury: A Natural Source of Antioxidant and Antifungal Compounds
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本研究首次系统评估了巴西无刺蜂Melipona mondury所产地蜂胶的化学组成、抗氧化活性及抗真菌潜力。通过LC-ESI-QTOF-MS/MS技术鉴定出12种活性成分（包括C-甲基化黄酮类化合物），证实其总酚（TP）和总黄酮（TF）含量符合巴西法规标准。研究显示地蜂胶对耐药性白色念珠菌（Candida albicans）和巴西孢子丝菌（Sporothrix brasiliensis）具有显著抑制活性（MIC低至281.25 μg·mL–1），DPPH自由基清除实验表明其抗氧化能力与酚类含量呈正相关。该研究为开发新型天然抗真菌剂提供了理论依据。
引言
地蜂胶是由无刺蜂（如Melipona mondury）利用植物树脂、花粉、蜡质、土壤等材料构建的蜂巢结构物质，具有显著的抗菌、抗真菌和抗病毒特性。在传统医学中，地蜂胶被广泛应用于治疗多种疾病，其抗氧化、抗炎和免疫调节功能备受关注。然而，针对M. mondury地蜂胶的系统研究仍较为有限，特别是其化学成分与生物活性的关联尚未明确。随着耐药真菌（如白色念珠菌和巴西孢子丝菌）感染的日益严重，开发新型抗真菌药物成为迫切需求。本研究旨在填补这一空白，深入分析M. mondury地蜂胶的化学特性及其抗真菌潜力。
材料与方法
地蜂胶样品采集自巴西里约热内卢的Barra da Tijuca森林，经冷冻粉碎后采用超声辅助提取法（UAE）制备乙醇提取物（EEGP），并通过液-液分配获得正己烷（Fr. Hex）、二氯甲烷（Fr. DCM）和甲醇-水（Fr. MeOH/H2O）三个极性段分。利用液相色谱-电喷雾电离-四极杆-飞行时间串联质谱（LC-ESI-QTOF-MS/MS）技术对EEGP进行化学成分鉴定。总酚（TP）和总黄酮（TF）含量分别采用Folin-Ciocalteu法和氯化铝法测定，抗氧化活性通过DPPH自由基清除实验评估，抗真菌活性则通过微量肉汤稀释法测定最小抑菌浓度（MIC）。
结果与讨论
EEGP及段分制备
超声提取法获得EEGP的得率为17.2%，显著高于传统浸提法。段分中，Fr. Hex得率最高（61.1%），表明地蜂胶中的活性成分以非极性物质为主。研究证实，UAE法在缩短提取时间的同时提高了提取效率，为地蜂胶的规模化开发提供了技术支撑。
EEGP的化学谱分析
LC-ESI-QTOF-MS/MS分析共鉴定出12种化合物，包括6种黄酮类（如C-甲基化黄酮(2S)-cryptostrobin和(2S)-strobopinin）、4种酚酸（如咖啡酸和香草醛）以及2种萜类（如贝壳杉烯酸）。值得注意的是，C-甲基化黄酮的存在提示蜂胶的植物来源可能涉及桃金娘科（Myrtaceae）植物，这为后续溯源研究提供了线索。
酚类化合物含量及抗氧化活性
EEGP的TP和TF含量分别为2.30 mg GAE·100 mg–1和1.07 mg QE·100 mg–1，均符合巴西对蜂胶制品的法规要求。DPPH实验显示EEGP的IC50为67.60 μg·mL–1，其中Fr. DCM段分活性最强（IC50=54.41 μg·mL–1）。相关性分析表明，TP与抗氧化活性呈负相关（r2=-0.77），证实酚类物质是其主要抗氧化成分。与其他无刺蜂地蜂胶相比，M. mondury蜂胶表现出更优的抗氧化性能，凸显其地域特异性。
抗真菌活性评估
抗真菌实验显示，EEGP对巴西孢子丝菌的MIC为281.25 μg·mL–1，对白色念珠菌的MIC为1125 μg·mL–1。段分中，Fr. MeOH/H2O对巴西孢子丝菌的抑制活性与EEGP相当，而Fr. Hex和Fr. DCM对白色念珠菌的抑制效果较弱。值得注意的是，实验所用真菌菌株对伊曲康唑均表现出耐药性（MIC>16 μg·mL–1），而地蜂胶提取物仍能有效抑制其生长，提示其可能通过破坏细胞膜结构或抑制酶活性发挥作用。与其他蜂胶相比，M. mondury地蜂胶的抗真菌活性处于中等水平，但其成本较低且来源可持续，具备开发潜力。
结论
本研究首次证实M. mondury地蜂胶富含黄酮类和酚类化合物，兼具抗氧化和抗真菌活性。其抗真菌效果尤其针对耐药菌株，为开发新型天然抗真菌剂提供了重要依据。未来研究应聚焦于单体制备、作用机制解析及体内实验验证，以推动其医药应用。
