《Frontiers in Immunology》：Yinhua Gouteng decoction alleviates tic disorder symptoms by modulating neuro-inflammation in a rat model
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本研究系统阐述银钩藤汤（YHGTD）通过调控肠道菌群-TLR4/MyD88/NF-κB轴改善IDPN诱导抽动障碍（TD）模型鼠的神经炎症机制。实验证实YHGTD可抑制小胶质细胞活化，降低纹状体及外周IL-1β、TNF-α、IL-6等炎症因子，调节多巴胺（DA）系统功能，并逆转肠道菌群紊乱，为中药多靶点治疗TD提供实验依据。
引言
抽动障碍（Tic Disorders, TD）是一种儿童期发病的神经发育障碍，以不自主的运动性抽动和发声性抽动为特征。全球约6%的儿童受累，且男性患病率显著高于女性。TD常共患注意缺陷多动障碍、强迫障碍等精神疾病，约23%患者症状持续至成年，严重影响心理健康和社会适应能力。多巴胺系统功能紊乱被认为是TD发病的核心机制，DRD2拮抗剂虽有一定疗效，但存在体重增加、镇静、锥体外系症状等不良反应。近年研究发现神经炎症在TD发病中起关键作用，患者体内IL-1β、TNF-α、IL-6等促炎细胞因子水平升高，神经影像学显示基底节区小胶质细胞激活。肠道菌群通过菌群-肠-脑轴与中枢神经系统沟通，TD患者存在肠道菌群紊乱和促炎细菌富集。TLR4/MyD88/NF-κB信号通路是肠脑轴中的重要分子枢纽，但其在TD中的作用尚不明确。银钩藤汤（Yinhua Gouteng Decoction, YHGTD）作为整合银翘散和天麻钩藤饮优化的中药复方，具有抗炎和神经保护双重特性，临床研究显示其能有效缓解儿童抽动症状，但具体机制有待阐明。
材料与方法
采用4周龄雄性SD大鼠，腹腔注射IDPN（250 mg/kg/天）连续7天建立TD模型。将大鼠随机分为对照组、模型组、硫必利组（23.80 mg/kg）及YHGTD低（11.78 g/kg）、中（23.56 g/kg）、高剂量组（47.12 g/kg），干预4周。通过行为学评分、自发活动测试评估抽动样行为；LC-MS/MS检测纹状体多巴胺（DA）含量；qPCR和Western blot检测DRD1、DRD2及炎症因子mRNA和蛋白表达；免疫荧光染色观察小胶质细胞标志物Iba1；ELISA检测血清IL-1β、TNF-α、IL-6水平；16S rRNA测序分析肠道菌群；Western blot检测纹状体和结肠TLR4、MyD88、p-IκBα、IκBα、NF-κB p65蛋白表达。
结果
- 1.
行为学改善：YHGTD中、高剂量组显著降低IDPN诱导的TD大鼠运动行为和刻板行为评分（P<0.01），减少总活动距离，延长休息时间，恢复正常运动轨迹。中剂量YHGTD效果最为稳定。
- 2.
神经病理保护：H&E染色显示YHGTD减轻纹状体神经元核固缩、胞质嗜酸性变等损伤，改善神经元结构。
- 3.
多巴胺系统调节：YHGTD显著提升纹状体DA水平（P<0.05），下调DRD1和DRD2的mRNA和蛋白表达（P<0.001）。
- 4.
神经炎症抑制：免疫荧光显示YHGTD抑制小胶质细胞活化；qPCR检测发现其降低纹状体IL-1β、TNF-α、IL-6的mRNA表达（P<0.05）。相关性分析显示行为学指标与DRD1、DRD2及炎症因子水平呈正相关，与DA水平负相关。
- 5.
外周炎症缓解：YHGTD降低血清和结肠中IL-1β、TNF-α、IL-6水平（P<0.01）。
- 6.
肠道菌群调节：16S rRNA测序显示YHGTD逆转模型组肠道菌群结构紊乱，降低促炎菌群（如Clostridiaceae）丰度，恢复菌群稳态。
- 7.
TLR4/NF-κB通路抑制：YHGTD下调纹状体和结肠中TLR4、MyD88、p-IκBα、NF-κB p65蛋白表达（P<0.05），而IκBα无显著变化。
讨论
本研究证实YHGTD通过多靶点机制缓解TD症状：一方面调节DA系统功能，改善DR超敏；另一方面抑制小胶质细胞活化，降低中枢和外周炎症因子水平。肠道菌群分析提示YHGTD可能通过重塑肠道微生态，减少促炎细菌易位，进而抑制TLR4/MyD88/NF-κB通路激活，阻断神经炎症级联反应。该研究首次从菌群-肠-脑轴角度揭示YHGTD抗TD机制，为中药免疫调节作用提供实验依据。局限性在于模型单一、未开展菌群功能验证实验及TLR4通路拮抗研究，未来需通过粪便移植、基因敲除模型深入探讨因果机制。
结论
YHGTD可通过调控肠道菌群-TLR4/MyD88/NF-κB轴，抑制外周和中枢炎症反应，改善TD模型鼠抽动行为及多巴胺系统功能紊乱，体现中药多成分、多通路、整体调节的治疗优势。
