《Neurochemistry International》：Calcineurin inhibition mitigates activation of enteric glia
in vitro and affects their crosstalk with macrophages
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本研究针对炎症性肠病（IBD）中肠胶质细胞（EGCs）的炎症激活机制，探讨了钙调神经磷酸酶（CN）的关键作用。研究人员通过体外模型，利用环孢素（CsA）抑制CN活性，发现其能显著降低LPS+ATP诱导的EGCs炎症标志物（如GFAP、NLRP3、HMGB1）表达，并抑制NF-κB p65核转位。进一步研究表明，CN抑制可减少EGCs促炎因子释放，从而减弱巨噬细胞的迁移和促炎基因（COX-2、IL-1β、TNF-α）表达，同时增强其吞噬功能。该研究揭示了CN在肠神经免疫调控中的新机制，为IBD治疗提供了潜在靶点。
炎症性肠病（IBD）是一类慢性、复发性的肠道炎症性疾病，主要包括克罗恩病和溃疡性结肠炎，其发病机制复杂，涉及遗传、环境、免疫异常及肠道神经系统的多重因素。近年来，肠神经系统（ENS）在IBD中的作用逐渐受到关注。肠胶质细胞（EGCs）作为ENS的重要组成部分，在生理状态下维持肠道稳态，但在炎症刺激下可转化为反应性表型，释放促炎因子，加剧黏膜损伤。钙调神经磷酸酶（CN）是一种钙离子/钙调蛋白（Ca2+/CaM）依赖的丝氨酸/苏氨酸磷酸酶，在免疫细胞和中枢神经胶质细胞的炎症反应中发挥关键作用。然而，CN在EGCs炎症激活及与免疫细胞相互作用中的具体机制尚不明确。为此，Aurora Patti等人发表在《Neurochemistry International》上的研究，通过构建体外共培养模型，深入探讨了CN抑制对EGCs炎症反应及其与巨噬细胞互作的影响。
本研究主要采用细胞共培养、Western blot、免疫细胞化学、qRT-PCR、Transwell迁移实验和吞噬功能测定等关键技术方法。研究人员使用EGC/PK060399egfr肠胶质细胞系和RAW 264.7巨噬细胞系，通过LPS+ATP模拟炎症环境，并利用CN抑制剂环孢素（CsA）处理，系统评估了CN在EGCs炎症激活及巨噬细胞功能调控中的作用。
炎症诱导在EGCs
通过Western blot和免疫细胞化学分析发现，LPS+ATP处理显著上调了EGCs中GFAP、HMGB1和NLRP3的表达，并促进NF-κB p65核转位。CsA预处理可逆转这些炎症指标的变化，并增加HMGB1的核定位，提示CN抑制能有效缓解EGCs的炎症激活。
活化肠胶质细胞对免疫细胞的影响
Transwell实验显示，LPS+ATP激活的EGCs可促进巨噬细胞迁移，而CsA处理能抑制该效应。此外，qRT-PCR结果表明，EGCs的炎症条件培养基可诱导巨噬细胞中COX-2、IL-1β和TNF-α基因表达上调，CN抑制则显著降低这些促炎因子的表达。吞噬功能实验进一步揭示，CN抑制条件下EGCs的条件培养基可增强巨噬细胞的吞噬能力。
本研究首次证实CN在EGCs炎症反应中的核心作用，并揭示其通过调控EGCs-巨噬细胞互作影响肠道免疫平衡。CN抑制不仅减轻EGCs的炎症激活，还促进巨噬细胞向具有修复功能的表型转化。该研究为CN靶向药物（如CsA）在IBD治疗中的机制提供了新视角，强调肠神经免疫轴作为潜在干预靶点的重要性。
