《Virus Research》：PCBP2 Inhibits Antiviral Innate Immune Responses via the MAVS-Mediated Signaling Pathway in Severe Fever with Thrombocytopenia Syndrome
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本研究针对发热伴血小板减少综合征（SFTS）缺乏有效治疗手段的临床困境，首次揭示RNA结合蛋白PCBP2通过促进MAVS的K48连接多聚泛素化降解，负向调控RLR信号通路的关键机制。研究人员通过单细胞测序、基因敲除/过表达等技术证实PCBP2下调可增强Ⅰ型干扰素应答并抑制病毒复制，为宿主靶向治疗提供了新策略。
在东亚地区，一种名为发热伴血小板减少综合征（SFTS）的蜱媒传染病正持续威胁公共健康。这种由新布尼亚病毒（Dabie bandavirus, DBV）引发的疾病死亡率高达6%-30%，患者会出现血小板减少、多器官衰竭等严重症状。更棘手的是，目前既没有获批的疫苗，也缺乏特效抗病毒药物。临床观察发现，病毒载量是决定病情严重程度的关键因素——高病毒载量患者的死亡率显著增加，就连广谱抗病毒药法匹拉韦对这类患者也收效甚微。这提示我们，病毒可能具有特殊的免疫逃逸机制，但具体机制至今成谜。
多聚胞嘧啶结合蛋白2（PCBP2）是一种多功能RNA结合蛋白，既往研究显示它既能调控基因转录后表达，又参与天然免疫调节。在其他病毒感染者中，PCBP2被证实能够负向调控抗病毒信号通路。那么，在DBV感染过程中，PCBP2是否也会"助纣为虐"？这个问题成为了南京医科大学研究团队关注的焦点。近日发表在《Virus Research》上的这项研究，首次系统揭示了PCBP2在SFTS发病中的双重角色：既是病毒复制的"帮凶"，又是宿主免疫的"刹车"。
研究人员首先通过单细胞转录组分析发现，SFTS患者外周血单个核细胞中PCBP2表达显著下调，且表达水平与疾病严重程度呈负相关。为了验证这一现象，团队构建了IFNAR-/-小鼠模型（该模型因缺失Ⅰ型干扰素信号通路而对DBV易感），发现病毒感染后小鼠外周血和组织中的PCBP2表达随病毒载量升高而逐步下降。在THP-1细胞系中，DBV感染24小时后PCBP2蛋白水平也明显降低。
那么PCBP2的下调对病毒复制有何影响？研究人员通过慢病毒敲降和质粒过表达技术调控PCBP2表达水平，发现了一个有趣的现象：敲降PCBP2能显著增强干扰素β（IFN-β）及其下游效应分子ISG12a、G1P3的表达，而过表达PCBP2则产生相反效果。进一步机制研究表明，PCBP2能够直接与线粒体抗病毒信号蛋白（MAVS）结合，促进其发生K48连接的多聚泛素化修饰，进而被蛋白酶体降解。这条MAVS-TBK1-IRF3信号轴正是抗病毒天然免疫的核心通路，其被抑制自然为病毒复制创造了有利条件。
功能实验证实了这一推测：PCBP2敲降使病毒滴度下降约60%，而过表达则使病毒复制增强1.5倍。这些变化与细胞活性无关，说明PCBP2确实是通过调控免疫信号通路而非影响细胞状态来左右病毒复制。
该研究创新性地描绘了PCBP2在DBV感染中的动态调控网络：感染初期，基础水平的PCBP2通过抑制MAVS信号为病毒复制打开"绿灯"；随着感染进展，宿主通过下调PCBP2试图重启抗病毒应答，但这种补偿性反应在重症患者中往往为时已晚。这一发现不仅解释了PCBP2表达与病情严重度之间的负相关关系，更揭示了病毒与宿主在免疫调控层面的激烈博弈。
关键技术方法包括：对30例中度和30例重症SFTS患者外周血进行单细胞转录组分析；建立IFNAR-/-小鼠感染模型观察病毒载量与PCBP2表达动态；通过慢病毒介导的基因敲降和质粒过表达技术在THP-1细胞中调控PCBP2表达；采用免疫共沉淀和泛素化分析验证PCBP2与MAVS的相互作用及修饰方式。
研究结果方面：
3.1 PCBP2在SFTS患者PBMCs中表达下调且与疾病严重程度相关
通过单细胞转录组分析发现，SFTS患者外周血细胞中PCBP2 mRNA表达普遍降低，严重患者尤为明显。qRT-PCR和Western blot验证PCBP2在mRNA和蛋白水平的表达均显著下调，且低表达患者预后更差。
3.2 DBV感染在体内外模型中均下调PCBP2表达
IFNAR-/-小鼠感染实验显示，PCBP2表达随感染时间延长而逐渐下降，且高剂量感染组下调更显著。组织免疫组化证实肝、脾等靶器官中PCBP2蛋白表达减少。THP-1细胞感染模型表明，PCBP2在感染24小时后开始显著下调。
3.3 PCBP2负调控RLR介导的抗病毒信号通路
基因操作实验表明，PCBP2过表达抑制DBV诱导的IFN-β、ISG12a和G1P3表达，而敲降PCBP2产生相反效果。Western blot显示PCBP2负调控MAVS-TBK1-IRF3信号轴活化，但不影响上游受体RIG-I表达。功能上，PCBP2促进病毒复制，其敲降使病毒滴度降低而过表达增强病毒复制。
3.4 PCBP2靶向MAVS并诱导其降解
免疫共沉淀和免疫荧光证实PCBP2与MAVS存在直接相互作用和胞质共定位。蛋白酶体抑制剂MG132处理可逆转PCBP2过表达引起的MAVS降解。泛素化分析显示PCBP2促进MAVS的K48连接多聚泛素化，这是蛋白质降解的标志性修饰。
这项研究首次阐明PCBP2通过促进MAVS泛素化降解来抑制抗病毒免疫的新机制，为理解DBV免疫逃逸策略提供了全新视角。值得注意的是，PCBP2在感染过程中的动态变化反映了病毒与宿主免疫系统的复杂博弈：病毒可能利用PCBP2的免疫抑制功能建立早期感染，而宿主则通过下调PCBP2试图挽回败局。这种精细调控既体现了宿主对抗病毒的智慧，也暴露了病毒利用宿主因子实现免疫逃逸的"阴谋"。
从转化医学角度看，该研究为SFTS治疗提供了新思路。针对PCBP2的宿主靶向治疗可能成为传统抗病毒药物的有效补充，特别是对于高病毒载量的重症患者。此外，监测PCBP2表达水平或许可作为评估病情和预后的生物标志物。尽管该研究还存在一些局限，如PCBP2下调的具体上游机制尚未完全阐明，但无疑为这个死亡率居高不下的传染病领域注入了新的希望。
