通过乳酸发酵过程对奥卡拉(Okara)中多酚代谢产物的生成进行评估与预测建模

《Food Microbiology》:Evaluation and predictive modelling of okara (poly)phenol metabolite production via lactic acid fermentation

【字体: 时间:2026年02月05日 来源:Food Microbiology 4.6

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  酱油渣经乳酸菌(LAB)和枯草芽孢杆菌单菌或共培养发酵后,酚类物质含量显著提升(最高增38%),主要归因于β-葡萄糖苷酶将异黄酮苷转化为苷元,并生成苯乳酸衍生物。实验采用多因素设计优化发酵条件,结合预测模型确定关键变量。

  
维森特·阿古约(Vicente Agulló)| 玛蒂娜·马雷拉(Martina Marrella)| 洛雷娜·桑切斯·马丁内斯(Lorena Sanchez Martinez)| 索尼娅·菲古奇亚(Sonia Figuccia)| 卢卡·丰特基阿里(Luca Fontechiari)| 贾斯敏·哈吉·萨杜恩(Jasmine Hadj Saadoun)| 卢卡·卡拉尼(Luca Calani)| 丹尼尔·德尔·里奥(Daniele Del Rio)| 佩德罗·梅纳(Pedro Mena)| 卡米拉·拉齐(Camilla Lazzi)| 安娜丽莎·里奇(Annalisa Ricci)| 莱蒂齐亚·布雷斯基亚尼(Letizia Bresciani)
意大利帕尔马大学食品与药物系人类营养研究组,43125帕尔马

摘要

奥卡拉(Okara)是一种富含异黄酮等生物活性化合物的大豆加工副产品,具有很高的利用价值。本研究探讨了乳酸菌(LAB)和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)在单菌培养或共培养条件下,如何通过控制发酵过程改善奥卡拉的酚类成分。实验设计涵盖了不同的接种量、发酵温度和时间,并使用UHPLC-QqQ-MS/MS技术对酚类化合物进行了定量分析。结果表明,乳酸菌的发酵显著提高了奥卡拉的酚类含量和成分结构,尤其是使用Pediococcus pentosaceusLactobacillus paracasei在25°C下进行长时间发酵时,总酚含量增加了38%。发酵过程中,异黄酮苷通过β-葡萄糖苷酶的作用被转化为相应的苷元。虽然检测到了苯乳酸衍生物,但未发现其他低分子量的酚类化合物。通过预测建模,确定了影响酚类成分的关键因素,并优化了发酵条件。共培养实验进一步凸显了选择合适微生物组合的重要性。总体而言,这些发现为将奥卡拉转化为具有增强健康功效的功能性食品成分提供了有效的生物技术方法,有助于其在循环经济框架下的产业化应用。

引言

大豆(Glycine max)是全球消费量最大的豆类之一,也是东方饮食中的基础食材,常用于各种发酵食品中(Liu et al., 2022)。随着全球化,大豆及其制品已广泛融入西方饮食。目前,大豆是全球第四大重要农作物,年产量约为3.7亿吨,主要种植在巴西、美国、阿根廷、中国、印度、巴拉圭和加拿大(USDA, 2024)。大豆制品的消费增加与其营养价值和功能性密切相关,尤其是其中丰富的生物活性化合物,如(多)酚类(染料木黄酮、染料木素、苷元)、β-胡萝卜素和必需脂肪酸,这些成分被认为有助于预防多种非传染性疾病(Kim et al., 2022; Wang et al., 2021; Wei et al., 2020)。
大豆制品(如豆腐和豆奶)的生产会产生大量不溶性残渣,称为“奥卡拉”(亦称“豆渣”或“biji”),这是大豆压榨的副产品(Wong et al., 2016)。每公斤干大豆大约会产生1.2–1.8公斤的湿奥卡拉,中国、日本和韩国是主要生产国(Guimar?es et al., 2018; Mok et al., 2019)。由于水分含量高且口感不佳,大部分奥卡拉被丢弃,导致食物浪费和环境影响(Wang et al. 2024)。然而近年来,人们对奥卡拉的兴趣显著增加,多项研究表明其可作为可持续且营养丰富的食品成分(Huang 2024; Zhu 2023)。
奥卡拉富含膳食纤维、蛋白质和异黄酮,适合作为功能性食品成分。多项研究表明,摄入富含异黄酮的食品有助于预防癌症、骨质疏松症、心血管疾病、糖尿病和肥胖症等慢性疾病(Kim et al., 2022; Feng et al., 2021; Khosravi et al., 2021; Jannah et al, 2020; Guevara-Cruz et al., 2020)。因此,将奥卡拉重新引入酸奶、烘焙食品和挤压零食等食品中,可以提升产品营养价值并减少农业废弃物(Chen et al., 2023; Pesic et al., 2023; Aussanasuwannakul et al., 2022)。
固态发酵(SSF)是一种低成本、可持续的奥卡拉利用方法,基于微生物在固态材料表面的生长和产物形成,无需液体参与,便于食品工业应用(Mok et al., 2019)。该工艺通过增加可溶性纤维和蛋白质含量以及将β-异黄酮苷转化为更易吸收的苷元,提升了奥卡拉的感官和功能性(Asghar et al., 2023; Hadj Saadoun et al., 2021)。乳酸菌(LAB)因能产生生物活性代谢物和理想的风味化合物而特别适合用于SSF(Hadj Saadoun et al., 2021)。此外,乳酸菌或肠道微生物群代谢异黄酮可产生如O-去甲基安戈莱辛(O-desmethylangolensin)和雌马酚(equol)等生物活性物质,进一步增强了发酵奥卡拉的健康促进作用(Rafii, 2015)。
尽管取得了一定进展,但以往研究多聚焦于乳酸菌单菌培养,对能够模拟自然生态系统中的微生物相互作用并提高生物活性化合物产量的共培养方法关注不足。同时,很少有研究将实验数据与预测建模结合,以确定影响(多)酚含量的关键因素或优化发酵参数。这一研究空白凸显了通过发酵利用奥卡拉的迫切需求。
基于此,本研究假设在控制条件下联合使用特定乳酸菌菌株可产生协同效应,促进(多)酚类转化,从而提高生物活性代谢物的产量。预测建模的应用有助于识别关键工艺变量,优化发酵结果。
因此,本研究旨在探讨乳酸菌单菌培养和共培养对奥卡拉酚类成分的影响,确定驱动(多)酚类转化的关键微生物和工艺因素,鉴定新生成的(多)酚类代谢物,并利用预测建模优化发酵条件,以最大化酚类含量和生物活性化合物的产生。

化学试剂

分析试剂

3-(4?-羟基苯基)乳酸、3-(苯基)乳酸、阿魏酸和柚皮苷购自Sigma-Aldrich(Merck KGaA,德国)。染料木黄酮、二氢染料木黄酮、苷元、二氢染料木素、染料木素和O-去甲基安戈莱辛购自Toronto Research Chemicals(加拿大安大略省多伦多)。香草酸购自Alfa Aesar Chemicals,p-香豆酸购自Honeywell Fluka? Chemicals(Thermo Fisher Scientific Inc.)

单菌培养

进行了11次单菌培养实验以确定奥卡拉的最佳发酵条件,具体见表1。各样品的细菌生长情况、未发酵奥卡拉的pH值以及发酵后的pH值见表2。
评估了多种因素对奥卡拉发酵过程的影响,但并非所有因素都对微生物生长有显著作用。

讨论

食品产业向循环经济的转型推动了将食物废弃物和副产品转化为高附加值材料的努力,因为这些废弃物仍含有(多)酚类、类胡萝卜素、维生素和膳食纤维等营养成分和生物活性化合物。多种回收技术(包括固态发酵、溶剂辅助提取和超临界CO2处理)已被应用于此目的(Sarker et al., 2024)。本研究

结论

四种乳酸菌菌株对奥卡拉的发酵显著改变了其酚类成分,显著增加了生物活性化合物的含量。这种变化归因于微生物菌株的代谢活动及其在发酵过程中的酶活性和相互作用。通过多因素实验,获得了对发酵过程的深入理解。

作者贡献声明

丹尼尔·德尔·里奥(Daniele Del Rio):撰写、审稿与编辑。卢卡·卡拉尼(Luca Calani):方法学设计、数据分析。贾斯敏·哈吉·萨杜恩(Jasmine Hadj Saadoun):方法学设计、数据管理。卢卡·丰特基阿里(Luca Fontechiari):方法学设计、数据管理。莱蒂齐亚·布雷斯基亚尼(Letizia Bresciani):撰写、审稿与编辑、资金筹集、概念构思。安娜丽莎·里奇(Annalisa Ricci):撰写、审稿与编辑、概念构思。卡米拉·拉齐(Camilla Lazzi):撰写、审稿与编辑、监督、概念构思。佩德罗·梅纳(Pedro Mena):撰写、审稿与编辑、概念构思。索尼娅·菲古奇亚(Sonia Figuccia):形式审查

未引用参考文献

Donkor and Shah, 2008; Gouripur and Kaliwal, 2017; Gul and Durante-Mangoni, 2024; Huang et al., 2024; Khosravi and Razavi, 2021; Kim, 2022; Kim et al., 2021; Meng et al., 2025; Pe?i? et al., 2023; Soybeans,; Vong and Liu, 2009; Vong and Liu, 2016; Wang et al., 2024; Zhu et al., 2023.

资助

本研究由帕尔马大学资助,项目名为“Bando di Ateneo 2022 per la ricerca”,并与意大利大学与研究部(MUR-Italian Ministry of Universities and Research)及NextGenerationEU共同资助,项目编号为737/2021 - PNR - PNRR。

利益冲突声明

作者声明不存在可能影响本文研究的已知财务利益或个人关系。
致谢
感谢Massimiliano Rinaldi教授提供奥卡拉供应商的联系方式。
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