稳定同位素标记衍生化结合LC-MS/MS测定葱属食品中的甾体皂苷元

　　摘要： 目的：为提高葱属食品中甾体皂苷元（如剑麻皂苷元和菝葜皂苷元）的检测灵敏度和准确度，该研究建立了一种基于稳定同位素标记衍生化结合液相色谱-串联质谱的分析方法。方法：采用D0/D5-吡啶和三氟甲磺酸酐（Tf2O）对甾体皂苷元的3-羟基进行电荷标记衍生化，利用D0和D5同位素衍生物峰面积比进行内标定量。结果：优化后的衍生化反应在室温下10 min即可完成，衍生化产物稳定性良好；方法学验证表明，其线性范围宽（0.5～200 ng/mL，R2＞0.999 4），检出限显著降低至0.2 ng/mL（较未衍生化方法降低95%），精密度（日内相对标准偏差（relative standard deviation，RSD）≤4.02%，日间RSD≤4.36%）和加标回收率（95.5%～104.2%）优异。将该方法应用于实际葱属样品分析，成功测定并揭示了大葱、小葱、洋葱和大蒜中剑麻皂苷元与菝葜皂苷元的含量分布特征。结论：该策略通过电荷标记增强电离效率和同位素内标补偿基质效应，为葱属食品中甾体皂苷元的高灵敏、高准确度定量提供了可靠方案，并可为其他低电离效率天然产物的分析提供参考。