《Immunity, Inflammation and Disease》：Investigating the Role of A20 in Respiratory Syncytial Virus Immunopathogenesis in a BALB/c Mouse Model
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本文通过构建A20基因敲低与过表达的BALB/c小鼠模型，揭示A20（TNFAIP3）作为免疫负调控因子在呼吸道合胞病毒（RSV）感染中的关键作用。研究发现A20下调会加剧肺部炎症细胞浸润（如中性粒细胞）、促炎因子（TNF-α、MIP-1α等）释放及组织损伤，而过表达A20虽未显著改善病理指标，但提示其潜在免疫调节功能。研究为RSV相关免疫病理的靶向干预提供新思路。
引言
呼吸道合胞病毒（RSV）是引发婴幼儿、老年人及免疫缺陷人群支气管炎和肺炎的主要病原体，全球每年导致约3.2百万住院病例及近20万儿童死亡。其致病机制与宿主过度免疫反应导致的肺部损伤密切相关，而调控炎症信号通路的关键分子如A20（TNFAIP3）可能成为缓解病理损伤的潜在靶点。A20作为NF-κB信号的负调控因子，通过泛素化修饰抑制炎症通路激活，但其在RSV感染中的体内作用尚未明确。
材料与方法
研究通过构建携带A20基因或A20-shRNA的慢病毒载体，经静脉注射导入BALB/c小鼠，并于次日鼻腔接种RSV-A2毒株（5×106PFU/只）。感染后第5天（病理峰值时间点）收集支气管肺泡灌洗液（BALF）和肺组织，采用RT-PCR检测A20表达，ELISA分析细胞因子（MIP-1α、TNF-α、IFN-γ、IL-10）水平，H&E染色评估肺部病理损伤，并通过实时PCR量化病毒载量。
结果
- 1.
A20表达调控验证：RSV感染显著诱导BAL细胞中A20表达（p<0.0001）。shRNA介导的A20敲低使表达量进一步下降（p=0.04），而过表达组A20水平显著升高（p=0.003）。
- 2.
免疫细胞浸润：A20敲低组BALF中总细胞数由57.5万增至71.2万（p=0.04），中性粒细胞浸润显著增加（p=0.03），而A20过表达组细胞浸润呈下降趋势但未达统计学差异。
- 3.
细胞因子风暴：A20敲低显著提升促炎因子MIP-1α（p=0.03）、TNF-α（p=0.03）及IFN-γ（p=0.02）水平，IL-10无显著变化。过表达组细胞因子水平轻微降低。
- 4.
肺部病理与疾病指标：RSV感染组肺部炎症评分为24%，A20敲低后升至34%（p=0.02），组织切片显示支气管周围及血管周炎症加剧。A20过表达组病理损伤略有减轻。体重变化与病毒载量虽无统计学差异，但A20敲低组呈现更严重的体重下降趋势。
讨论
本研究首次在动物模型中证实A20下调通过增强NF-κB及IRF3/7通路活化，加剧RSV感染后的炎症反应与组织损伤。A20可能通过去泛素化作用抑制TBK1/IKKi激酶活性，进而限制干扰素及趋化因子（如CCL5）的过度产生。值得注意的是，A20过表达未显著改善病理指标，可能与静脉给药靶向肺上皮细胞效率低、非生理性表达水平或补偿性信号激活有关。未来需优化递送系统（如气道局部给药），并结合人源气道类器官模型深入探讨A20与RSV蛋白（如NS1）的相互作用。
结论
A20是RSV免疫致病的关键负调控因子，其功能缺失会导致炎症失控与肺损伤恶化。尽管过表达A20未显示显著治疗效果，但其免疫平衡作用仍具转化潜力。后续研究应聚焦于靶向递送策略、多时间点动态分析及A20协同分子的机制挖掘。
