转录因子MpR2R3-MYB17调控地钱胞芽发育的功能研究

　　

摘要：

目的 探究MpR2R3-MYB17基因在地钱胞芽发育调控中的功能及分子机制，为进一步揭示地钱胞芽发育调控机制提供新的依据。 方法 基于地钱基因组信息克隆MpR2R3-MYB17的全长CDS序列，对其编码蛋白质进行生物信息学分析并瞬时转化烟草检测MpR2R3-MYB17亚细胞定位。构建过表达载体和CRISPR/Cas9基因编辑载体，利用农杆菌介导的非组培依赖的地钱转化方法获得MpR2R3-MYB17过表达株系和突变体株系以评估表型变化。 结果 生物信息学分析表明，MpR2R3-MYB17的开放阅读框的长度为1 277 bp，编码421个氨基酸，具有2个保守的SANT序列，是R2R3型MYB转录因子。系统发育树揭示MpR2R3-MYB17与拟南芥R2R3-MYB第9亚家族聚为一支，其中与AtMYB17同源性最高。亚细胞定位分析表明，MpR2R3-MYB17蛋白定位于细胞核内，提示其可能直接参与转录调控过程。表型分析表明，与野生型相比，过表达株系的叶状体上胞芽杯密度和胞芽数量显著增加，或在高表达状态下形成未分化细胞团，且叶状体的生长受到抑制。突变体株系的胞芽杯密度及单个胞芽杯内胞芽数量均较野生型显著降低。 结论 MpR2R3-MYB17作为细胞核定位的转录因子参与调控地钱胞芽杯和胞芽的发育过程。