硼替佐米诱导神经病变中皮肤神经TrkA表达上调与神经血管互作异常的相关性研究

《Brain Pathology》：TrkA abundance is increased in cutaneous nerves in bortezomib-induced neuropathy

本研究揭示硼替佐米诱导的周围神经病变（BIPN）患者皮肤神经纤维中TrkA蛋白表达显著升高，并伴随表皮内神经纤维密度（IENFD）降低和真皮血管化增强。通过多模态检测技术，发现TrkA积累与治疗周期相关，且疼痛亚组呈现独特的神经-血管相互作用模式，为NGF/TrkA信号通路在BIPN中的作用机制提供了新视角。

　　

1 引言

多发性骨髓瘤（MM）是第二常见的血液恶性肿瘤，硼替佐米（BTZ）作为其一线治疗药物，通过可逆性抑制26S蛋白酶体的苏氨酸位点诱导肿瘤细胞凋亡。然而BTZ诱导的周围神经病变（BIPN）发生率高达13%–36%，其中部分患者出现神经病理性疼痛，严重影响生活质量。研究表明，神经营养因子受体TrkA作为神经生长因子（NGF）的高亲和力受体，在疼痛信号传导和血管调节中起关键作用。本研究通过分析BIPN患者皮肤活检样本，探讨TrkA定位与表达变化及其与神经血管互作的关系。

2 材料与方法

2.1 研究人群

纳入2021–2024年维尔茨堡大学医院的50例BIPN患者（含19例疼痛亚组和31例无痛亚组）及27例健康对照。所有患者均经国际骨髓瘤工作组标准确诊，并接受定量感觉测试（QST）和神经传导研究（NCS）评估。

2.2 感觉神经功能检测

采用德国神经病理性疼痛研究网络（DFNS）标准化方案进行QST，包括冷/热检测阈值（CDT/WDT）、机械痛阈（MPT）等参数，并通过z分数进行年龄和性别校正。神经传导检测包括腓肠神经和正中神经的感觉神经动作电位（SNAP）振幅和传导速度（NCV）。

2.3 皮肤活检与免疫荧光染色

取远端小腿皮肤样本，通过抗PGP9.5、CGRP、TrkA和GAP43抗体标记神经纤维，使用深度学习工具deepflash2进行自动分割分析。TrkA抗体特异性通过HEK293细胞过表达实验验证。

2.4 定量分析

计算表皮内神经纤维密度（IENFD）、平均荧光强度（MFI）及神经-血管互作面积（神经纤维周围5μm范围内的血管区域）。qPCR检测TrkA和NGF的mRNA表达，采用2^?ΔΔCT法分析。

3 结果

3.1 患者临床特征

疼痛亚组体重指数（BMI）显著高于无痛亚组（p=0.017）。腓肠神经SNAP振幅异常率在疼痛亚组达84.2%，显著高于无痛亚组（50%）。QST显示疼痛亚组在CDT和机械检测阈值（MDT）方面异常率更高，提示小纤维神经病变为主。

3.2 神经纤维密度变化

BIPN患者IENFD_PGP9.5较对照组降低（p=0.027），而CGRP⁺神经纤维面积在真皮层的占比升高18.3%（对照组12.6%）。深度学习自动计数与人工计数显著相关（r=0.35, p<0.01）。

3.3 TrkA表达调控

虽TrkA mRNA表达无组间差异，但TrkA蛋白MFI在表皮神经纤维中升高5倍（p<0.01），且与BTZ治疗周期数正相关（r=0.33）。疼痛亚组NGF mRNA水平高于无痛亚组（p<0.05）。

3.4 神经-血管互作

BIPN患者真皮血管总面积增加（p<0.05），但无痛亚组的神经-血管互作面积是对照组的3倍（p<0.001），疼痛亚组则与对照组无差异。提示血管邻近性可能具有保护作用。

3.5 神经再生标记

GAP43表达在组间无差异，但疼痛亚组的GAP43 MFI低于无痛亚组（p<0.05），表明疼痛状态下神经再生能力受损。

4 讨论

本研究首次揭示BIPN中TrkA蛋白在存活神经纤维的累积现象，可能与蛋白酶体抑制导致的TrkA降解受阻有关。疼痛亚组中NGF mRNA上调与TrkA积累共存，或通过增强经典/非经典信号通路驱动疼痛。神经-血管互作的空间分布差异为症状异质性提供了新解释。未来可探索Trk激酶抑制剂（如拉罗替尼）对BIPN的干预潜力。

研究局限性

包括非肽能神经纤维标记方法的简化、单时间点分析以及TrkA磷酸化状态未检测等，需通过动态观察和信号通路验证深化机制研究。