《Veterinary Microbiology》：Occurrence of tick-borne pathogens in questing ticks, ticks from riding horses, and red deer blood in Western Pomerania, Poland
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本研究针对气候变化与人类活动加剧蜱媒病风险的问题，在波兰西北部休闲林区开展蜱媒病原体（TBPs）多样性研究。通过分子检测技术，在游走蓖子硬蜱（Ixodes ricinus）、马体寄生蜱及马鹿（Cervus elaphus）血液中系统评估了伯氏疏螺旋体（Borrelia burgdorferi s.l.）、嗜吞噬细胞无形体（Anaplasma phagocytophilum）和立克次体（Rickettsia spp.）的流行率与共感染特征。结果显示蜱虫中伯氏疏螺旋体复合体阳性率达16.9%（69/409），马体寄生蜱病原体携带率显著更高（73.3%），并首次在区域内发现病原体多重共感染现象（包括四重感染）。该研究为休闲林区人兽共患病风险预警提供了关键科学依据。
随着气候变暖推动蜱虫活动期延长，以及城市绿地与自然森林交错带成为人群休闲热点区域，蜱媒疾病（Tick-borne diseases）对公共卫生的威胁日益凸显。在欧洲各地，蓖子硬蜱（Ixodes ricinus）作为多种病原体的传播媒介，其携带的伯氏疏螺旋体（Borrelia burgdorferi sensu lato）、嗜吞噬细胞无形体（Anaplasma phagocytophilum）和立克次体（Rickettsia spp.）等病原体可引发莱姆病（Lyme borreliosis）、人粒细胞无形体病（Human granulocytic anaplasmosis）及斑点热等严重疾病。尤其值得关注的是，这些病原体可能通过单一蜱虫叮咬实现共同传播，导致临床表现复杂的多重感染。然而，在波兰西北部西波美拉尼亚地区，针对休闲林区蜱媒病原体多样性及其在动物宿主中循环规律的系统研究尚属空白。为此，安娜·雷马泽夫斯卡（Anna Rymaszewska）团队在《Veterinary Microbiology》发表论文，通过多样本来源的病原体筛查，揭示了该地区蜱媒病原体的传播网络与风险特征。
研究团队采用跨学科技术路线展开调查。在样本采集方面，分别从米?dzyzdroje、Iglice、Tanowo和Wa?cz四个休闲林区采用布旗法收集游走蜱（n=409），从马场马匹体表采集寄生蜱（n=135），并获取狩猎马鹿血液样本（n=42）。通过形态学与分子鉴定（12S rRNA基因测序）确认所有蜱虫均为蓖子硬蜱。病原体检测采用多重分子技术：使用巢式PCR（nested PCR）扩增伯氏疏螺旋体flaB基因、嗜吞噬细胞无形体msp4基因和立克次体16S rRNA基因等靶点；对伯氏疏螺旋体阳性样本进一步采用限制性片段长度多态性分析（PCR-RFLP）进行基因分型；通过Sanger测序和BLAST比对完成病原体物种验证。统计学分析使用卡方检验比较不同发育阶段、采集地点和饱血状态的病原体检出率差异。
3.1. 蜱虫种群特征
所有544只蜱虫均鉴定为蓖子硬蜙，其中游走蜱以若虫为主（80.4%），马体寄生蜱包含未饱血（69.6%）与饱血个体（30.4%），为评估吸血状态对病原体携带的影响提供了样本基础。
3.2. 游走蜱病原体流行率与多样性
在游走蜱中，伯氏疏螺旋体总检出率为16.9%，其中Tanowo地区阳性率最高（34.7%）。基因分型显示伯氏阿弗西氏疏螺旋体（B. afzelii）和伽氏疏螺旋体（B. garinii）为优势基因种，分别占阳性样本的34.8%和24.6%。值得注意的是，27.5%的阳性蜱存在两种及以上伯氏疏螺旋体基因种共感染。嗜吞噬细胞无形体检出率为6.8%，其中msp4基因标记检测效率最优（占阳性样本的8%）。立克次体检出率达16.4%，优势物种为R. helvetica（11%），同时检出罕见物种R. raoultii（0.5%）和R. monacensis（0.3%）。共感染分析发现，12例蜱虫同时携带立克次体与伯氏疏螺旋体，8例存在嗜吞噬细胞无形体与伯氏疏螺旋体共感染，甚至发现一例三重共感染（伯氏疏螺旋体、嗜吞噬细胞无形体与R. helvetica）。
3.3. 马体寄生蜱病原体分布
马体寄生蜱的病原体负荷显著高于游走蜱，伯氏疏螺旋体检出率达66.7%，且饱血幼虫阳性率高达100%。嗜吞噬细胞无形体在未饱血若虫中检出率最高（22%），而饱血个体检出率显著降低（2.4%），提示吸血过程可能影响病原体检测。立克次体在马体蜱中流行率较低（6.7%），但发现7例与伯氏疏螺旋体的共感染。
3.4. 马鹿血液病原体检测
马鹿血液中嗜吞噬细胞无形体检出率最高（19.1%），伯氏疏螺旋体仅在两例样本中检出（4.8%），印证了鹿类对螺旋体的天然抗性。发现一例四重共感染（嗜吞噬细胞无形体联合三种伯氏疏螺旋体基因种），证明野生宿主在维持病原体多样性中的关键作用。
本研究通过多维度监测揭示了西波美拉尼亚地区蜱媒病原体的复杂传播生态。研究发现，休闲林区游走蜱携带多种致病病原体，且马匹作为扩增宿主显著提升伯氏疏螺旋体在蜱群中的流行率。马鹿血液中嗜吞噬细胞无形体的高检出率与其作为主要储存宿主的生态角色相符。尤为重要的是，研究首次在该地区记录到病原体四重共感染现象，证实人类在休闲活动中有同时暴露于多种病原体的风险。这些发现为优化蜱媒疾病监测策略、评估人兽共患病跨物种传播风险提供了科学依据，凸显了在气候变化背景下持续开展"一体化健康"（One Health）监测的必要性。
